Stbl3感受態(tài)細胞

Stbl3 Chemically Competent Cell
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產品規(guī)格:

Stbl3感受態(tài)細胞基因型：
F- mcrB mrr hsdS20(r_B^-, m_B^-) recA13 supE44 ara-14 galK2 lacY1 proA2 rpsL20(Str^R) xyl-5λ^-leu mtl-1 endA1+
Stbl3感受態(tài)細胞簡要說明：
Stbl3菌株來源于 HB101 E. coli strain，是慢病毒載體系統(tǒng)推薦使用的菌株。基因組含有重組酶recA13突變，可有效抑制長片段末端重復區(qū)的重組，降低錯誤重組的概率；但不含核酸酶endA1突變，體內核酸酶含量較高，提取質粒時務必使用質粒提取試劑盒中去蛋白液。此菌株具有鏈霉素抗性，不存在lacI^qZΔM15，不可用于藍、白斑篩選。CMbio High5^TM系列Stbl3感受態(tài)細胞經特殊工藝制作，經pUC19檢測轉化效率>10⁸cfu/μg DNA。
Stbl3感受態(tài)細胞操作說明：

1. CMbio Stbl3感受態(tài)細胞放置冰中融化（或放手心或室溫片刻，待菌體處于冰水混合狀態(tài)時迅速插入冰中），加入目的DNA（質?；蜻B接產物）并用手EP管底輕輕混勻，冰上靜置25分鐘。

2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰上并靜置2分鐘，晃動會降低轉化效率。

1.  向離心管中加入0.9 mL 室溫 S.O.C. 培養(yǎng)基，使用其他培養(yǎng)基會降低轉化效率。
2.  30℃，225 rpm復蘇90分鐘。 （當質粒中含有不穩(wěn)定片段時， 30℃培養(yǎng)可降低錯誤重組的概率，若轉化control PUC19 計算轉化效率，則需37℃， 225 rpm復蘇60分鐘。）

5. 5000rpm離心一分鐘收菌，留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的S.O.C. 培養(yǎng)基上。
6.將平板倒置放于30℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。（若轉化control PUC19 計算轉化效率，則需37℃培養(yǎng)過夜）Stbl3感受態(tài)細胞注意事項：

1.  CMbio 感受態(tài)細胞在冰上融化。
2.  混入質粒或連接產物時應輕柔操作。

3. 轉化高濃度的質粒或高效率的連接產物可相應減少最終用于涂板的菌量。