TOP10F`感受态细胞

TOP10F` Chemically Competent Cell
产品规格:

      
TOP10F`感受态细胞基因组:
F´{lacI<sup>q</sup> Tn10 (TetR)} mcrA ?(mrr-hsdRMS-mcrBC) Φ80lacZ?M15 ?lacX74 recA1araD139 ?(ara-leu)7697 galU galK rpsL endA1 nupG
TOP10F`感受态细胞背景说明：
   CMbio TOP10F`菌株来源于TOP10菌株。将F`{lacIq Tn10 (TetR)}因子转入TOP10菌株，即为TOP10F`。该F`因子携带lacI^q 抑制子，可抑制trc，tac，lac等启动子下游基因的表达，从而可以用于一些表达毒性蛋白质粒的扩繁。recA1和endA1的突变有利于插入DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取。CMbio TOP10F 可用于构建克隆，蓝白斑筛?。ㄈ缬糜诶栋装呱秆?，需在培养基中加入IPTG诱导β-半乳糖苷酶基因的表达）实验，具有四环素抗性。CMbio High5^TM系列TOP10F`感受态细胞经特殊工艺制作，经pUC19质粒检测转化效率>10<sup>7</sup>cfu/μg。
TOP10F`感受态细胞操作使用：

1. CMbio TOP10F`感受态细胞从-80℃拿出，迅速插入冰中，5分钟后待菌块融化，加入目的DNA（质粒或连接产物）并用手EP管底轻轻混匀，冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激60秒，迅速放回冰中并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3.  向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌培养基（2YT或LB），混匀后37℃，200 rpm复苏60分钟。
4. 5000rpm离心一分钟收菌，留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应 抗生素的2YT或LB培养基上。
5.  将平板倒置放于37℃培养箱12-16h，时间过长会产生假阳性小菌落。

TOP10F`感受态细胞注意事项：

1.  CMbio 感受态细胞在冰中缓慢融化，插入冰中8分钟内加入目标DNA，不可在冰中放置时 间过长，长时间存放会降低转化效率。
2.  混入质粒或连接产物时应轻柔操作
3. 转化高浓度的质?；蚋咝实牧硬锟上嘤跎僮钪沼糜谕堪宓木?。