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上海淳麦生物科技有限公司

*0 感受态细胞产品说明书

时间:2019-3-19阅读:789
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产品规格(CAT#: DL1010)

 

*0:                                                     100μl/支

pUC19 (control vector,10pg/μl):                   10μl

保存条件(保质期):                            -80℃(6个月) 

 

基因型

F- mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC) φ80 lacM15 ΔlacX74 recA1 araΔ139 Δ(ara-leu)7697 galgalrpsL (StrRendA1 nup

 

 

 

 

产品说明

*0菌株来源于MC1061菌株,是目前实验室常用的感受态细胞之一,基因型与DH10B高度类似 (DH10B为galE15型,而*0为galU型)。*0生长速度快 (比DH5α快,但比Mach1-T1生长速度慢),10小时可见克隆,recA1和endA1的突变有利于插入DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取??捎糜诠菇寺?,蓝白斑筛选等实验。*0感受态细胞经特殊工艺制作,pUC19质粒检测转化效率>5×108cfu/μg DNA。 

 

操作方法

1. *0感受态细胞从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA (质?;蛄硬? 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打),冰中静置25分钟。

2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。

3. 向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌培养基 (2YTLB),混匀后37℃,200 rpm复苏60分钟。

4. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YTLB培养基上。

5. 将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作,将平板放37℃培养至少13 h

 

注意事项

1. 感受态细胞在冰中缓慢融化,插入冰中8分钟内加入目标DNA,不可在冰中放置时间过长,长时间存放会降低转化效率。

2. 混入质?;蛄硬锸庇η崛岵僮?。

3. 转化高浓度的质?;蚵实牧硬锟上嘤跎僦沼糜谕堪宓木?。

 

上海淳麦生物科技有限公司 4006815880

 

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