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艰难梭菌实验检测试剂（酶联法）

广州健仑生物科技有限公司

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艰难梭菌实验检测试剂（酶联法）

 测试原理：

CoproELISA^Tm 值C。艰难梭菌 GDH 是一种用于检测人类粪便中 GDH的酶免疫测定法。

• 分裂的微孔用艰难梭菌 GDH 特异性单克隆抗体包被。
• 将辣根过氧化物酶（HRP）缀合的单克隆抗 GDH 抗体加入到抗体包被的微孔中。
• 将粪便样品稀释在样品稀释剂中并加入微孔中。在该步骤中，艰难梭菌 GDH 由 HRP 缀合的抗体标记并通过包被的抗体固定。
• 通过洗涤除去未结合的缀合物。
• 加入 TMB-底物，底物被过氧化物酶水解，得到还原底物的蓝色溶液。
• 加入终止溶液后，蓝色变为黄色，应由 ELISA 读数器在450 / 620nm 波长下读取。
• 吸光度与艰难梭菌的水平成比例样品中的 GDH。
•  

    程序手册摘要

           加入 50μlHRP-Conjugate（即用型）

           加入 100μl 阴性对照（样品稀释剂），100μl 阳性对照和 100μl 稀释样品

盖板并在 37℃，100％湿度下孵育 50 分钟

用洗涤缓冲液（300μl）洗涤 5 次

加入 100μlTMB-底物

盖上盖板并在室温下孵育 15 分钟

加入 100μl 终止液

读取 OD 450 / 620nm 处的吸光度

       解释结果

中文版说明书由健仑生物技术人员翻译，具体以英文原版为准。

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致病性：

艰难梭菌是一种厌氧生长的革兰阳性梭状产毒芽孢杆菌，

为人类肠道中的正常菌群，抗生素的应用可导致该菌过度生长。自1978年开始，艰难梭菌被认为与抗生素相关性腹泻有关，曰前认为25%的抗生素相关性腹泻由艰难梭菌引发。随着广谱抗菌药物的广泛使用，在范围内，艰难梭菌相关性腹泻发生率不断升高，近年来出现暴发流行，其流行菌株发生基因变异，产生毒素的能力增加，患者病死率及病情复发率升高，已引起医学界的重视。

艰难梭菌可产生两种毒素：肠毒素和细胞毒素。肠毒素能趋化中性粒细胞浸润回肠肠壁，释放细胞因子，导致肠道大量失水和出血性坏死。细胞毒素能解聚肌动蛋白，损坏细胞骨架，导致局部肠壁细胞坏死，有直接损伤肠壁作用。