利什曼原蟲檢測寄生蟲抗體試劑體外診斷試劑：利什曼原蟲（Leishmania spp）泛指利什曼蟲屬的錐體蟲科原蟲，是一種會引起利什曼病的寄生蟲，在舊大陸的傳播過程中是利用一種白蛉屬的沙蠅為媒介，在新大陸的傳播媒介則為沙蠅屬（Lutzomyia）的沙蠅。
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利什曼原蟲檢測寄生蟲抗體試劑體外診斷試劑

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預(yù)期使用

    該檢測條用于診斷內(nèi)臟利什曼病，利用快速的免疫層析法在人血清中定性檢測杜氏利什曼原蟲（L. donovani）抗體。該實(shí)驗(yàn)有助于診斷內(nèi)臟利什曼病（VL）。并只用于體外診斷。

實(shí)驗(yàn)原理

    該檢測條的硝化纖維膜在實(shí)驗(yàn)區(qū)包被了rK39，在質(zhì)控區(qū)包被了雞抗蛋白A。在實(shí)驗(yàn)中，血清樣本與膠體金共軛物（膠體金標(biāo)記的蛋白A）反應(yīng)，而膠體金共軛物預(yù)先包被在檢測條上?；旌衔镌诿?xì)管作用下沿著硝化纖維膜移動，然后與重組的VL抗原反應(yīng)，并生成一條紅色帶。如果存在該紅色帶表明陽性結(jié)果，反之則為陰性結(jié)果。混合物繼續(xù)移動，到達(dá)固化的雞抗蛋白A區(qū)（質(zhì)控區(qū)），會在質(zhì)控區(qū)生成一條紅色帶。質(zhì)控區(qū)紅色帶的出現(xiàn)說明樣本體積充足、液體流動適宜和作為對試劑的質(zhì)控。

 

保存方法

    該密封袋或者瓶中含實(shí)驗(yàn)檢測條應(yīng)保存在20—28℃（室溫）直至有效期。瓶中含捕獲緩沖液也應(yīng)保存在20—28℃。暴露在超過30℃溫度下會影響實(shí)驗(yàn)性能，所以應(yīng)盡量避免。檢測條不應(yīng)冰凍保存。從密封袋中取出后應(yīng)在1小時(shí)內(nèi)使用，避免受濕度影響。

 

血清的采集

1該實(shí)驗(yàn)中應(yīng)使用人血清。全血樣本不應(yīng)采用，因?yàn)檫^度的背景可能會影響正確讀取實(shí)驗(yàn)帶。應(yīng)使用緩沖液稀釋血清，避免直接開始實(shí)驗(yàn)。陽性血清應(yīng)使用陰性血清進(jìn)行稀釋。

2 經(jīng)凝血后離心分離血清，盡量避免溶血。

3 應(yīng)在采集血清后盡快開展實(shí)驗(yàn)。血清不能長時(shí)間存放在室溫下。血清于2-8℃可保存3天。否則血清應(yīng)保存在20℃以下。

4 實(shí)驗(yàn)前血清平衡至室溫。冰凍的血清必須充分融解。血清避免反復(fù)凍融。

5 如果血清需要運(yùn)輸，其包裝應(yīng)該符合聯(lián)邦的傳染源運(yùn)輸法規(guī)。

 

試劑盒成分

該黑熱病快速檢測條的硝化纖維膜在實(shí)驗(yàn)區(qū)包被了重組的rK39，在質(zhì)控區(qū)包被了雞抗蛋白A。試劑盒的成分如下：

1、25份的獨(dú)立包裝檢測條或者25份檢測條于一個(gè)含干燥劑瓶子中。

2、1瓶的捕獲緩沖液

 

實(shí)驗(yàn)步驟

1 實(shí)驗(yàn)前讓血清平衡至室溫。

2 從密封袋或瓶中取出黑熱病快速檢測條

3 在檢測條箭頭下方加入20 ul的血清。

4 將檢測條置于實(shí)驗(yàn)管中，或者96孔的組織培養(yǎng)板的微孔中，根據(jù)檢測條上的箭頭，其末端應(yīng)該朝下。

5 加入2-3滴（150ul）的捕獲緩沖液

6 在10分鐘內(nèi)讀取結(jié)果。在讀取結(jié)果前，背景的清晰是十分重要的。尤其是當(dāng)樣本為低滴度的抗利什曼原蟲抗體時(shí)，就只有一條很弱的色帶出現(xiàn)在實(shí)驗(yàn)區(qū)（T）。10分鐘后讀取可能會導(dǎo)致錯(cuò)誤結(jié)果。

注意：不要只是加入捕獲緩沖液進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。必須首先加入20ul的血清。

      如果在加入捕獲緩沖液后的10-15秒并沒有觀察到膠體金的移動，可輕輕壓檢測條上的樣本加入?yún)^(qū)，直到觀察到膠體金的移動。

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利什曼原蟲檢測寄生蟲抗體試劑體外診斷試劑

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