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日本生研 军团菌1-15群诊断血清
广州健仑生物科技有限公司
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广州健仑生物有代理日本生研、丹麦SSI、德国Sifin、泰国血清:
我司还提供其它进口或国产试剂盒:登革热、疟疾、流感、A链球菌、合胞病毒、腮病毒、乙脑、乙肝、寨卡、黄热病、黑热病、基孔肯雅热、克锥虫病、违禁品滥用、肺炎球菌、军团菌等试剂盒以及日本生研细菌分型诊断血清、德国SiFin诊断血清、丹麦SSI诊断血清等产品。
日本生研 军团菌1-15群诊断血清
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5、每个离心管加入1 ml TB,用移液器轻柔吹打重悬菌体。菌体*分散后,每管再加入9ml TB,将两管重悬液合为1管,冰浴15 min。
6、750-1000 g ,4°C离心收集菌体。
7、加入1 ml TB,用移液器轻柔吹打重悬菌体。菌体*分散后,每管再加入7ml TB(终体积与原始菌液体积比为1:12.5)。
8、在8 ml重悬液中加入280μl DMSO冰浴15 min,分装于预冷的离心管,每管100μl,在液氮中速冻,然后-70°C冻存备用。
三、注意事项
1、所用器具的洁净程度。这一点非常重要,所有与感受态有关的方法与文章必强调这一点,其重要性毋庸置疑。
2、培养基的装量。培养基的装量是很重要的,这关系到菌体生长过程中的能量代谢问题,是有氧还是无氧生长。厌氧生长出来的菌体是做不出效率高的感受态的。建议装量不要高于此值:培养基体积/三角瓶容量=100ml/500ml,50ml/250ml。
3、培养基的pH值。pH值并非单指配制或灭菌后的pH值,而且还包括整个摇瓶结束后的pH值。一般来说,接种前的pH值在6.8-7.2。等菌摇好后,可以测一下pH值,不要低于6.0,登革热在6.5以上。这表示菌体的代谢为有氧代谢,生长状态良好,按要求做,肯定效率不低。
4、培养后的OD值。这是一个非常重要的参数,只是当OD值达到一定的程度后,菌体要保持对数生长已经不太可能,因此很多指导方法上强调OD不得大于 0.6、0.8等等。同时,OD值大时菌体总量大,感受态数量要大一点。因此需要在OD值的两方面影响中找一个平衡点。