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分析苯基尿素類殺蟲劑的實驗方法
閱讀：928 發(fā)布時間：2020-3-7色譜流動相的制備：
1M甲酸銨溶液：稱取63g甲酸銨，溶于1L HPLC級的水中。
流動相A：在1L水 (HPLC級) 中加入5mL 1M 甲酸銨溶液。
流動相B：在1L甲醇 (HPLC級) 中加入5mL 1M 甲酸銨溶液。
樣品制備（水果與蔬菜基質(zhì)）
基于Anastassiadies等人提出的方法[1]：
1. 稱量10g切碎的樣品；
2. 加入100µL內(nèi)標(biāo)溶液(D5 - Atrazine 1µg/mL)；
3. 加入10mL乙腈，劇烈振搖；
4. 加入4g無水MgSO4和1g的NaCl；
5. 馬上渦旋混合，以防止MgSO4共聚物的生成；
6. 振搖30s后，4300r/min離心5min；
7. 取出1mL初提液，轉(zhuǎn)移至含有150mg無水MgSO4的離心管中；
8. 混合，5200r/min離心1min；
9. 取出500µL上清液，用水將稀釋到1mL，得到提取液濃度約為0.5g/mL
基于Klein和Alder等人提出的方法[2, 3]：
1. 在5g或10g樣品中，加入水到10mL；
2. 加20mL甲醇，使用UltraTurrax 組織勻漿機(jī)勻漿2min；
3. 有時需要過濾或離心；
4. 加入NaCl溶液 (100mL水中含20g NaCl)，每6mL加入NaCl溶液2mL；
5. 用5mL樣品溶液浸泡 ChemElut 柱；
6. 5min后，用16mL二氯甲烷洗脫；
7. 40℃揮發(fā)至干；
8. 用甲醇與水的混合溶液1.25mL (甲醇0.25mL，水1mL) 重新溶解；
9. 用0.45µm濾膜過濾。
基于Lehotay et al.[4]提出的方法：
1. 使用Molinex 混合器或類似設(shè)備勻質(zhì)水果或蔬菜樣品；
2. 加入乙腈， (15.0 ± 0.05) g勻質(zhì)的樣品加乙腈15mL，超聲提取2min后，混旋5min；
3. 加入6g無水MgSO4和1.5g NaCl的混合物，劇烈振搖1min；
4. 3000r/min離心5min；
5. 取5mL上層溶液，加入1.8g 無水MgSO4和0.3g Bondesil C8 吸附劑；
6. 振搖20s；
7. 使用Eppendorf 5301型濃縮儀，或類似設(shè)備揮發(fā)至干；
8. 用乙腈/水＝1/9的溶液1mL重新溶解樣品；
9. 12000r/min 高速離心2min；
10. 上清液轉(zhuǎn)入自動進(jìn)樣器的進(jìn)樣瓶中備用。
色譜分離條件
Agilent 1100 系統(tǒng)：G1312A二元泵系統(tǒng)、G1367A型自動進(jìn)樣器、柱溫箱。
色譜柱：Phenomenex Synergi Fusion-RP反相柱，50mm×2mm，4µm，內(nèi)孔 80Å。
流動相：A相—水+5mM甲酸銨；B相—甲醇+5mM甲酸銨。
梯度設(shè)置：
MS/MS 檢測
API 3200™或3200 QTRAP® LC-MS/MS液質(zhì)分析系統(tǒng)。TurboIonSpray® 離子源，負(fù)離子模式，MRM掃描方式。
