详细介绍
化学结构:
Alexa Fluor 488 蛋白标记试剂盒是一种用于将荧光染料Alexa Fluor 488与蛋白质共价结合的试剂盒。该试剂盒适用于标记分子量在12至150 kDa之间的蛋白质,特别适合免疫球蛋白抗体。
染料特性:Alexa Fluor 488染料含有四氟苯基(TFP)酯基团,比常用的琥珀酰亚胺(NHS)酯更稳定。TFP酯能与蛋白质的伯胺反应,形成稳定的染料-蛋白共轭物。
荧光特性:Alexa Fluor 488的荧光激发和发射值分别为494 nm和519 nm,荧光强度在pH 4至10之间不受影响。
细胞成像:用于标记细胞内的蛋白质、多肽等生物分子,观察其分布和动态变化。
流式细胞术:用于标记细胞表面的受体、抗原等,进行细胞分类和计数。
免疫组化:用于标记组织样本中的特定蛋白质,进行定位和定量分析。
结构式:
基础知识概述:
英文名:Alexa Fluor 488 蛋白标记试剂盒,AF488 蛋白标记试剂盒
规格标准:1mg、5mg、10mg
试剂厂家:陕西新研博美生物科技有限公司
试剂盒组成:
Component A:Alexa Fluor 488 TFP ester,3瓶。
Component B:84 mg。
Component C:反应管,3个。
Component D:离心过滤器(Nanosep MF 0.2μm),3个。
Component E:纯化树脂(Bio-Gel P-6 fine resin),约3 mL。
蛋白质准备:
浓度要求:蛋白质浓度应为1 mg/mL,且缓冲液中不含伯胺,这些物质会抑制标记反应。
纯度要求:部分纯化的蛋白质样本或含有载体(如牛血清白蛋白)的蛋白质样本标记效果不佳。
脱盐处理:在标记前,可使用透析或小规模凝胶过滤去除蛋白质样本中的低分子量成分。
标记反应:
染料与蛋白质摩尔比(MR):根据蛋白质的分子量,推荐的染料与蛋白质摩尔比为1:10至1:50,以实现最佳标记效果。
反应步骤:
将蛋白质溶液与Component A(染料)和Component B混合。
在室温下反应30分钟。
使用Component D(离心过滤器)纯化标记后的蛋白质,去除未反应的染料。
注意事项:
纯度标准95%+
保存建议:避免反复冻融,避光保存,储液应该立即使用,任何未用的溶液分装小份冷冻于 < -20°C
注意事项:仅用于科学研究
相关试剂(部分):
Ald-Ph-PEG12-TFP ester
Bis-PEG4-TFP ester
TCO-PEG8-TFP ester
AF 488 TFP ester
4-Azide-TFP-amide-SS-Sulfo-NHS
Mal-PEG4-Glu(TFP ester)-NH-m-PEG24
Bis-Mal-Lysine-PEG4-TFP ester
AF 488 carboxylic acid
4-Azide-TFP-amide-SS-propionic acid
(±)-H3RESCA-TFP
Mal-amido-PEG12-TFP ester
Mal-amido-PEG4-TFP ester
Sulfo DBCO-TFP Ester
Alexa Fluor 488 蛋白标记试剂盒