详细介绍
化学结构:
5-Carboxy-TET是一种带有羧基(-COOH)的荧光染料,属于TET(Tetrachlorofluorescein)系列荧光素。这种化合物结合了荧光素的光学特性和羧基的化学反应性,广泛用于生物化学和生物研究中,尤其是在荧光标记和检测方面。
TET:Tetrachlorofluorescein,是一种荧光素,发出绿色荧光。
COOH:羧基(-COOH)位于分子的5位,用于化学偶联反应。
化学性质:羧基具有酸性,可以与碱发生中和反应,也可以与胺类或醇类发生偶联反应。
结构式:
基础知识概述:
155911-13-0,5-Carboxy-TET,TET carboxylic acid
英文名:5-Carboxy-TET,TET carboxylic acid,TET-COOH
分子式:C21H8Cl4O7
分子量:514.1
规格标准:1mg、5mg、10mg
试剂厂家:陕西新研博美生物科技有限公司
合成方法:
1.羧基化反应
从TET出发,通过化学反应引入羧基。例如,使用卤代酸或酯化反应引入羧基。
使用卤代酸(如溴乙酸)或酯化试剂(如DCC和NHS)。
注意事项:
纯度标准95%+
保存建议:避免反复冻融,避光保存,储液应该立即使用,任何未用的溶液分装小份冷冻于 < -20°C
注意事项:仅用于科学研究
相关应用:
(1)生物标记
蛋白质标记:
通过羧基与蛋白质上的胺基(-NH?)发生偶联反应,将荧光素标记到蛋白质上,用于荧光成像或流式细胞术。
例如,使用N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)酯化反应,将5-Carboxy-TET与蛋白质上的胺基结合。
核酸标记:
通过羧基与核酸末端的胺基修饰位点结合,用于荧光标记的核酸探针。
例如,通过酰胺键将5-Carboxy-TET连接到核酸的末端。
(2)荧光探针
细胞成像:
用于标记细胞内的生物分子,通过荧光显微镜观察细胞内的动态变化。
例如,标记细胞膜蛋白或细胞器蛋白,用于研究细胞的生理过程。
流式细胞术:
用于标记细胞表面或细胞内的生物分子,通过流式细胞仪进行定量分析。
例如,标记细胞表面的受体蛋白,用于检测细胞的活化状态。
(3)药物递送
药物偶联:
通过羧基与药物分子上的胺基结合,将药物分子连接到荧光素上,用于药物递送系统的开发。
例如,将药物分子与5-Carboxy-TET结合,用于荧光成像指导的药物递送。
实验操作注意事项:
保存条件:应密封保存在干燥、避光的环境中,避免长时间暴露在空气中。
反应条件:在进行偶联反应时,需要根据目标分子的性质选择合适的反应条件(如pH值、温度、反应时间)。
纯化:反应后的产品可能需要通过色谱法(如HPLC)进行纯化,以去除未反应的原料和副产物。
应用案例:
(1)蛋白质标记
实验步骤:
准备蛋白质溶液:将目标蛋白质溶解在适当的缓冲液中。
活化5-Carboxy-TET:将5-Carboxy-TET与NHS和DCC反应,生成NHS酯。
偶联反应:将活化的5-Carboxy-TET与蛋白质溶液混合,室温孵育1-2小时。
纯化:通过透析或凝胶过滤去除未反应的染料。
检测:通过荧光光谱仪或荧光显微镜检测标记效果。
(2)核酸标记
实验步骤:
准备核酸探针:将核酸探针末端修饰为胺基。
活化5-Carboxy-TET:将5-Carboxy-TET与NHS和DCC反应,生成NHS酯。
偶联反应:将活化的5-Carboxy-TET与核酸探针混合,室温孵育1-2小时。
纯化:通过HPLC或凝胶电泳纯化标记后的核酸探针。
检测:通过荧光光谱仪检测标记效果。
相关试剂(部分):
Carboxy-PEG4-phosphonic acid ethyl ester
MTS-1,5-EDANS-Carboxyethyl
5(6)-Carboxy-X-rhodamine N-Succinimidyl Ester
Amino-Tri-(carboxyethoxymethyl)-methane (HCl)
diSulfo-Cy7 carboxylic acid(Ethyl)
Amino-Tri-(carboxyethoxymethyl)-methane
Mal-Cyclohexanecarboxylicacid
Carboxy-PEG11-phosphonic acid
Carboxy polymethylene
Carboxy-PEG11-sulfonic acid
2-Carboxyethyl methanethiosulfonate
2-Amino-1,3-bis(carboxylethoxy)propane HCl salt
Carboxy-Amido-PEG5-N-Boc
155911-13-0,5-Carboxy-TET,TET carboxylic acid