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Cy5 (Cyanine 5) 是一種發(fā)遠紅(far-red)熒光的花青素熒光染料。它的消光系數(shù)很高，熒光很亮，并且對pH不敏感，一般可以用633 nm或647 nm的激光束激發(fā)然后用 Cy5或APC濾片觀察，所以在絕大部分熒光儀器上都可以使用。Cy5熒光落在遠紅光區(qū)，使用Cy5或者其它遠紅光染料的一個重要優(yōu)勢是在這個長波長光譜范圍內(nèi)樣品背景熒光較低，而在這個區(qū)域CCD相機/檢測器檢測靈敏度。Cy5可以用來標記蛋白，抗體，多肽，核酸分子，納米粒等。

馬來酰亞胺(maleimide)是生物標記反應中常用的基團，它可以和巰基(-SH)通過親和加成反應生成穩(wěn)定的巰醚(thioester)結(jié)構(gòu)從而實現(xiàn)標記。盡管胺基(比如賴氨酸精氨酸側(cè)鏈)也有親和性，但在中性或微酸性緩沖液中，馬來酰亞胺選擇性標記巰基(反應速度比胺基快>1000倍)。標記反應反應迅速，選擇性高，產(chǎn)率好，另外，巰基是一種在生物分子中***存在的官能團，比如蛋白中的半胱氨酸(cysteine)和雙硫鍵等，因此馬來酰亞胺/巰基(maleimide/thiol)標記已成為僅次于NHS/胺基標記的***常用生物連接反應(bioconjugation)。

Cy5-馬來酰亞胺的水溶性較低，所以在水相的標記反應體系內(nèi)需要使用有機共溶劑，常用有機溶劑包括DMF，DMSO和乙腈等。如需標記的分子對有機溶劑敏感，可選擇磺化花青素（sulfonated cyanine），即磺化Cy5-馬來酰亞胺。兩者的光譜性質(zhì)幾乎一致，因此大部分應用可相互替換。兩者的主要區(qū)別在于：磺化染料是水溶性的，在水相的標記反應體系內(nèi)不需要使用有機共溶劑，并且降低染料在水中聚集的可能性，增強標記效率。

Cy5-馬來酰亞胺標記后的產(chǎn)物Ex/Em是640/664nm。和它具有相似熒光特性的染料包括Alexa Fluor 647，DyLight 649，ATTO 647等。

英文名：Cyanine5 maleimide

cy5-MAL

MAL-Cy5

中文名：花青素CY5-馬來酰亞胺

CAS號：1437872-46-2（無陰離子）

分子式：C38H45N4O3

分子量：605.8

外觀：深藍色固體

純度：95%溶解性：溶于有機溶劑（DMF、DMSO、二氯甲烷），幾乎不溶于水（31μm，23 mg/L）

儲存條件：-20°C避光避濕

注意事項：

1）Cy5-馬來酰亞胺水溶性較低，標記反應可在有機溶劑中進行或者含有機助溶劑的水相中進行。

2）天然生物分子中巰基一般于氧化狀態(tài)(如雙硫鍵)存在，在馬來酰亞胺標記前，務*還原劑(如DTT，TCEP)活化巰基并除去多余還原劑。

3）馬來酰亞胺也可以和疊氮化合物反應，應避免疊氮官能團。

4）標記反應不要放在強光下，因為大部分熒光化合物在強光下長時間照射會緩慢光漂泊(photobleaching)。

相關化合物：

Cyanine5 maleimide

1437796-65-0

Sulfo-Cyanine5 maleimide

2242791-82-6

Cyanine5 amine

1807589-58-7

Cyanine5 azide (DMSO solution)

1267539-32-1

Cyanine5 carboxylic acid chloride

1032678-07-1

Cyanine5 alkyne

1223357-57-0

Cyanine5 NHS ester chloride

1032678-42-4

Cyanine5 DBCO

2182601-71-2

Cyanine5.5 maleimide

1594414-90-0

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