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上海吉至生化科技有限公司
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2021-4-30 閱讀(712)
魚(yú)精蛋白的提取：
成熟精巢組織-均漿-硫酸酸解-NACL溶液提取-四層紗布過(guò)濾-加乙醇沉淀雜蛋白-離心-上清液-加TCA溶液沉淀-離心-魚(yú)精蛋白硫酸鹽。
魚(yú)精蛋白的純化：
分離提取后的魚(yú)精蛋白必須純化。利用魚(yú)精蛋白的電荷和分子大小，分別采用聚丙烯酰胺等電聚焦和凝膠過(guò)濾層析手段對(duì)提取的魚(yú)精蛋白粗提物進(jìn)行純化。在聚丙烯酰胺等電聚焦過(guò)程中，因魚(yú)精蛋白是帶正電荷的堿性蛋白質(zhì)，所以聚集于堿性端，而處在中、酸性區(qū)域的蛋白質(zhì)條帶則為雜蛋白。聚丙烯酰胺等電聚焦完畢后，取膠板的堿性端，經(jīng)擴(kuò)散洗脫、透析除鹽，然后進(jìn)行凝膠過(guò)濾層析。當(dāng)魚(yú)精蛋白粗提物通過(guò)凝膠過(guò)濾柱時(shí)，溶液中的物質(zhì)就按照不同分子量篩分開(kāi)來(lái)，魚(yú)精蛋白分子小，能夠進(jìn)入凝膠孔內(nèi)，所以最后被洗脫出來(lái)。
