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2020-3-18 閱讀(1561)
二硫蘇糖醇（DTT）是一種小分子有機還原劑，化學式為C4H10O2S2。它是處于還原狀態(tài)的線性分子，被氧化后成為含有二硫鍵的六元環(huán)結(jié)構(gòu)。二硫蘇糖醇的名稱源自蘇糖（一種四碳單糖）。 DTT的異構(gòu)體是二硫代赤蘚糖醇（DTE），它是DTT的C3-差向異構(gòu)體。
用途：
DTT的用途之一是用作硫醇化DNA的還原和去保護劑。巰基化的DNA末端硫原子傾向于在溶液中形成二聚體，尤其是在存在氧氣的情況下。這種二聚化極大地降低了某些偶聯(lián)反應(yīng)實驗的效率（例如生物傳感器中DNA的固定）。將DTT添加到DNA溶液中，經(jīng)過一段時間的反應(yīng)后將其除去可以減少DNA的二聚化。
DTT也常用于還原蛋白質(zhì)中的二硫鍵。它可以用來防止蛋白質(zhì)中半胱氨酸之間形成的分子內(nèi)或分子間二硫鍵。但是，DTT通常無法還原嵌入蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)中的二硫鍵（無法獲得溶劑）。此類二硫鍵的還原通常需要將蛋白質(zhì)變性（高溫加熱或添加變性劑，例如6M鹽酸胍，8M尿素或1％SDS）。相反，根據(jù)存在DTT時二硫鍵還原速率的差異，可以判斷其嵌入深度。
還原性：
DTT是一種非常強的還原劑，其還原性很大程度上歸因于其氧化的六元環(huán)（含二硫鍵）的構(gòu)象穩(wěn)定性。 pH值為7時，其氧化還原電位為-0.33伏。
其中，在反應(yīng)中形成的中間狀態(tài)非常不穩(wěn)定，這是因為DTT上的第二硫醇基傾向于與被氧化的硫原子連接，因此該中間狀態(tài)迅速轉(zhuǎn)變成DTT的環(huán)狀氧化結(jié)構(gòu)，從而完成二硫鍵的還原。
DTT的還原能力受pH值的影響，并且僅在pH值大于7時才起還原作用。這是因為只有去質(zhì)子化的硫醇根陰離子（-S-）具有反應(yīng)性，而硫醇（-SH）不具有反應(yīng)性;巰基的pKa通常約為8.3。
