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2-8℃ 避光

開蓋后組份按要求條件保存。

一年

微孔板，酶標儀

血清、血漿、尿液、細胞、組織

微孔板，酶標儀

1.離心機
2.移液器
3.冰箱
4.冰盒

1.離心管
2.吸頭

1. 試劑盒僅科研使用。
2. 樣品含量如超出檢測范圍上，可用生理鹽水稀釋樣本后進行測定，測定結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)。
3. 試劑防止葡萄糖、等試劑的污染。
4. 試劑與樣本量可按照的要求，按照1:100的比例增減。

一、 樣本處理：
1. 血清（漿）：直接檢測，如超過線性范圍用生理鹽水稀釋后測定。
2. 培養(yǎng)液樣本：吸取培養(yǎng)液，1000轉(zhuǎn)/分，離心10min，取上清進行檢測。
注：一般建議細胞密度在106個/ml以上。
3. 組織樣本：
準確稱量組織重量，按重量（g）：體積（ml）=1:9的比例，加入9倍體積的勻漿介質(zhì)，冰水浴下機械勻漿，2500轉(zhuǎn)/分，離心10min，取上清進行檢測。

注：A.如組織樣本不存在高脂樣本，勻漿介質(zhì)統(tǒng)一用磷酸鹽緩沖液（0.1mol/L pH7.4）或生理鹽水進行提?。?br> B．如組織樣本為高脂樣本或部分為高脂樣本，勻漿介質(zhì)統(tǒng)一用無水乙醇進行提取。
4. 細胞樣本：
a、取適量的細胞(一般推薦>106以上)，1000轉(zhuǎn)/分，離心10min，棄上清，留細胞沉淀。
b、用等滲緩沖液（PBS或生理鹽水）清洗1~2次，1000轉(zhuǎn)/分，離心10min，棄上清，留細胞沉淀。
c、加入200~300μl的PBS或生理鹽水勻漿，冰浴條件下超聲破碎細胞，功率300W，每次3~5s，間隔30s，重復(fù)3~5次。亦可手動勻漿，制備好的勻漿液不可離心，待用。
也可用裂解液裂解（TritonX-100，1-2%,裂解30-40分鐘），裂解好的液體不可離心，待用。
注：破碎好的液體可顯微鏡觀察細胞是否破碎。

使用方法：
酶標儀TG測定操作:
1、 下表依次加入試劑：
2、 充分混勻, 37℃水浴中孵育10分鐘。
3、 酶標儀測定500~520nm吸光度。以空白管調(diào)零，讀取標準管和各待測管的吸光度。

計算：
血清、血漿等液體樣本(空白調(diào)零)：
TG(mmol/L)=｛(樣品管吸光度-空白管吸光度)/(標準管吸光度-空白管吸光度)｝×標準品濃度（2.26mmol/L）

細胞、組織等樣本(空白調(diào)零)：
TG(mmol/gprot)=｛(樣品管吸光度-空白管吸光度)/(標準管吸光度-空白管吸光度)｝×標準品濃度（2.26mmol/L）÷待測樣本蛋白濃度(gprot/L)

備注：
? 可根據(jù)使用儀器不同，等比例改變試劑與樣本的量。
? 樣品含量如超出檢測范圍上，可用生理鹽水稀釋樣本后進行測定，測定結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)。
? 試劑防止葡萄糖、等試劑的污染。
? 試劑與樣本量可按照的要求，按照1:100的比例增減

參考值：
健康成年人理想范圍：<1.7mmol/L(<150mg/dl)
邊緣升高：<1.7~2.25mmol/L(150~199mg/dl)
升高：<2.26~5.64mmol/L(200~499mg/dl)
很高：≥565mmol/L(≥500mg/dl)

性能指標：
1. 空白管OD≤0.2（光徑0.5cm）
2. 線性：0~9.04mmol/L范圍內(nèi)，r2＞0.995
3. 準確度: 相對偏差≤10%。
4. 靈敏度：檢測2.26mmol/L樣品管時，吸光度△A再0.2200~0.2900之間。
5. 測量精密度：批內(nèi)<5%，批間<8%