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目录:上海贝博生物科技有限公司>>蛋白质生物学>>蛋白提取和裂解>> 植物高尔基体蛋白提取试剂盒

植物高尔基体蛋白提取试剂盒
  • 植物高尔基体蛋白提取试剂盒
参考价 面议
具体成交价以合同协议为准
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具体成交价以合同协议为准
  • 品牌 贝博生物
  • 型号
  • 厂商性质 生产商
  • 所在地
属性

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更新时间:2025-07-24 21:55:30浏览次数:176评价

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产品概述 product description 贝博® BBproExtra® 植物高尔基体蛋白提取试剂盒提供全套试剂,适用于从各种新鲜植物组织样本中提取高尔基体蛋白。 本试剂盒含有的配方能够有效溶解高尔基体组份,本试剂盒含有的蛋白酶抑制剂混合物,阻止了蛋白酶对蛋白的降解,为提取高纯度的蛋白提供了保证。 本试剂盒提取的蛋白可用于Western Blotting、蛋白质电泳、免疫沉淀、ELISA、蛋白活性测定等下游蛋白研究实验。 本试剂盒提取的蛋白为具有天然蛋白构象的活性蛋白,下游应用范围广。 本试剂盒中不含有EDTA,与金属螯和层析等下游应用兼容。
保存温度
2-8℃
注意事项
1.蛋白酶抑制剂未开盖使用前也可以2-8℃储存??鞘褂煤?20℃储存。
2.蛋白酶抑制剂在2-8℃低温时是固体状态,从冰箱取出后恢复至室温或37℃短时间水浴,变成液体状态后离心至管底部再开盖。
3.试剂拆封后请尽快使用完!
有效期
一年
检测方法
WB,IP等
适用样本
植物
产品应用
WB,IP等
仪器准备
1.离心机
2.振荡器
3.涡旋混匀器
4.移液器
5.冰箱
6.冰盒
试剂准备
1.PBS缓冲液
2.蛋白定量试剂盒
耗材准备
1.离心管
2.吸头
3.一次性手套
使用注意事项
使用注意事项:
? 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
? 实验过程中的所有试剂须预冷;所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
? 蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀,不影响使用,溶解后正常使用。
? 如果试剂盒不能短时间内用完,蛋白酶抑制剂混合物不可以一次全部加入提取液。
? 可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。
? 下游实验如果是进行特定蛋白酶或磷酸酶的酶活性检测,提取液可以不加蛋白酶抑制剂或磷酸酶抑制剂,注意提取过程保持低温操作,缩短离心时间。
? 使用Dounce匀浆器匀浆,如果没有Dounce匀浆器,用普通玻璃匀浆器匀浆也可,但是高尔基体回收率会下降。

?
使用方法
1. 提取液准备:
每500ul冷的蛋白提取液C中加入2ul蛋白酶抑制剂混合物,混匀后置冰上备用。
2. 取200-500mg新鲜植物叶片组织样本,用PBS洗涤干净。
3. 用刀尽可能剪碎。
4. 加入1ml冷的试剂 A,置冰上10分钟。
5. 用Dounce匀浆器充分匀浆30-40次。
6. 将匀浆液在4℃,1000×g力条件下离心10分钟。弃沉淀,收集上清。
7. 将上清在4℃,3000×g力条件下离心10分钟。弃沉淀,收集上清。
8. 将上清在4℃,6000×g力条件下离心10分钟。弃沉淀,收集上清。
9. 将上清在4℃,50000×g力条件下离心20分钟。
10. 弃上清,在沉淀中加入500μl冷的试剂B,混匀。
11. 在4℃,50000×g力条件下离心30分钟。弃上清,收集沉淀。
12. 在沉淀中加入100-300ul冷的蛋白提取液C,吹打混匀后,在4℃条件下振荡20-30分钟。
13. 在4℃,12000×g条件下离心15分钟。
14. 将上清吸入另一预冷的干净离心管,即可得到高尔基体蛋白。
15. 将上述蛋白提取物定量后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。
常见问题分析
1.蛋白浓度低?
处理部分组织样本时可能没有裂解,导致蛋白浓度低。只要适当延长试剂C的处理时间即可。在持续振荡的条件下处理,没有振荡器也可间隔几分钟用吸头吹打混匀。
2.用什么方法定量蛋白?
建议用BCA法。不适合用Bradford法,因为试剂C中含有干扰Bradford法的组份,导致定量不准。如果已经进行过透析处理或者用脱盐柱改换过缓冲体系,则可以用Bradford法定量。
3.提取的蛋白具有活性吗?
本试剂盒不含有离子型去垢剂组份,不破坏蛋白的结构,没有对蛋白质之间原有的相互作用的破坏,蛋白均保持其天然构象和活性。

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