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大鼠角膜上皮细胞

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更新时间:2025-04-09 10:53:01浏览次数:296

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产品简介

供货周期 现货 规格 5×105cells/T25细胞培养瓶
主要用途 仅供科研实验 组织来源 眼角膜组织
大鼠角膜上皮细胞的相关产品:LTEP-a-2 (人肺腺癌细胞)1×10?cells/T25培养瓶小鼠附睾上皮细胞5×10?Cells/T25培养瓶HELF (人胚肺成纤维细胞)1×10?cells/T25培养瓶小鼠视网膜前体细胞5×10?Cells/T25培养瓶小鼠支气管上皮细胞5×10?Cells/T25培养瓶

详细介绍

产品属性:

产品名称

规格

组织来源

大鼠角膜上皮细胞

5×105cells/T25细胞培养瓶

眼角膜组织

商品详细介绍:

4.细胞简介:

分离自眼角膜组织;角膜位于眼球前壁的一层透明膜,约占纤维膜的前1/6,从后面看角膜呈正圆形,从前面看为横椭圆形。角膜厚度各部分不尽相同,中央部薄。角膜有十分敏感的神经末梢,如有外物接触角膜,眼睑便会不由自主地合上以保护眼睛。为了保持透明,角膜并没有血管,透过外界空气、泪液及房水获取养份及氧气。角膜分为五层,由前向后依次为:上皮细胞层、前弹力层、基质层、后弹力层、内皮细胞层。其主要功能如下:①角膜是的无血管的组织,具有透明的特性和合成许多蛋白的功能,分三层细胞层,外层即是上皮细胞;②角膜上皮细胞能参与先天性免疫,能感应病原体存在并发出信号从而激活角膜防御系统;③角膜上皮细胞能高效表达醛脱氢。角膜上皮细胞的体外培养对研究角膜的生理学、病理学、免疫学以及分子生物学都是极为重要的手段,常用于研究细胞代谢产物、病毒感染、各种生长因子和药物对细胞生长的影响。

5.方法简介:

实验室分离的采用胰dan白-胶原混合消化法结合差速贴壁法,并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。

6.质量检测:

实验室分离的经PCK免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

7.培养信息:

培养基  FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率    2-3天换液一次

生长特性  贴壁

细胞形态  上皮细胞样

传代特性  可传1-2代

消化液  0.25%胰dan白

培养条件  气相:空气,95%;CO2,5%

1.png

实验报告:

一、分离与培养:

二、免疫荧光鉴定:


   1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将成1mm3左右大小;
   2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
   3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织被消化;
   4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
   5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;

 

1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
   2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
   4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
   5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
   6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基,90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

滤泡型转运蛋白1/II型慢性淋巴性白血病抗体 锌指蛋白854封闭多肽 

谷草转氨2抗体 淋巴细胞特异性接头蛋白封闭多肽 

A型H1N1流感病毒神经氨抗体 TRIM9蛋白封闭多肽 

嗜粒细胞趋化蛋白CCL1抗体 真核翻译起始因子4B封闭多肽 

交叉反应: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian 吞噬细胞运动蛋白2封闭多肽 

DNAJC28蛋白抗体 11号染色体开放阅读框21封闭多肽 

组胺受体H1抗体 磷化氨基末端激1/2/3封闭多肽 

热休克蛋白90α抗体 三磷腺苷结合盒转运蛋白2封闭多肽 

BCL2相关蛋白A1抗体 干扰α受体2封闭多肽 

英文名称: Human Tau-4 SLU7蛋白封闭多肽 

强啡肽抗体 细胞粘附分子CD112封闭多肽 

人泌乳单克隆抗体 磷化原癌基因c-Raf封闭多肽 

交叉反应: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian 抑癌基因p16/p14/P19封闭多肽 

转录因子Sp2抗体 过氧化活化增生受体γ封闭多肽 

激活受体2B抗体 CD307a封闭多肽 

英文名称: CLDN7 莫洛尼白血病病毒10样蛋白1封闭多肽 

NACAD蛋白抗体 核糖体S6蛋白激β2封闭多肽 

磷化桩蛋白Paxillin抗体 磷化低密度脂蛋白受体相关蛋白1封闭多肽 
大鼠角膜上皮细胞EB-3 (人Burkitt's淋巴瘤细胞)(STR鉴定正确)RPMI-1640+10% FBS+1% P/S1×10?cells/T25培养瓶

猪成骨细胞5×10?Cells/T25培养瓶

C918 (人眼脉络黑色瘤细胞) (STR鉴定正确)RPMI-1640+10% FBS+1% P/S1×10?cells/T25培养瓶

人膀胱成纤维细胞5×10?Cells/T25培养瓶

MFC (小鼠胃癌细胞) (种属鉴定正确)RPMI-1640+10% FBS+1% P/S1×10?cells/T25培养瓶

SNB-19 (人胶质瘤细胞) (U-251 MG污染细胞系,)DMEM+10% FBS+1% P/S1×10?cells/T25培养瓶

786-O [786-0] (人肾透明细胞腺癌细胞) (STR鉴定正确)RPMI-1640+10% FBS+1% P/S1×10?cells/T25培养瓶

 


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