实验要点及说明：

1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；

2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理；

3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；

4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；

5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

产品名称：小鼠胚胎成纤维细胞

产品英文：3T3-L1细胞

货号：BJ-01X1641

细胞培养条件：DMEM（含NAHCO3 1.5g/L)+10%小牛血清+1%L-谷氨酰胺+1%NEAA+1%丙酮酸钠+1%P/S

生长状态：贴壁生长

产品规格：1×106

单位：T25/瓶

是否提供细胞STR鉴定：不提供STR鉴定报告

保存培养温度（℃）37

运输温度（℃）：常温

我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，公司产品仅用于科研由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，*进口来源，*保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。 细胞到达客户手中，1个月内出现任何问题，导致细胞在冻存前死亡，我们公司都可以免费再向客户提供一次。

培养操作步骤 ：

1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布；

2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）；

3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时；

4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片*浸在培养液中；

5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。

操作要点：

1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。

2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过最易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。

4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。

5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。

6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

鸡可溶性间粘附分子1(sICAM-1)试剂盒支链淀粉2-丁炔 98%穿心莲内酯  98%

鸡可溶性E选择素(sE-selectin)试剂盒 支链淀粉2-丁炔乙酯 98%熊果苷 99%

鸡可溶性E选择素(sE-selectin)试剂盒 支链淀粉针头式过滤器 孔径:0.22μm 直径：13.0mm 800个/箱,100个/每包扁桃苷 97%

鸡表皮生长因子(EGF)试剂盒 支链淀粉苯酰 98%扁桃苷 分析标准品，>98%

鸡表皮生长因子(EGF)试剂盒 直链淀粉1-萘 AR，99.0%氢  分析标准品，98%（HPLC)

鸡胰岛素样生长因子1(IGF-1)试剂盒 直链淀粉1-萘 CP,98%氢  98%

鸡胰岛素样生长因子1(IGF-1)试剂盒 直链淀粉1-萘 分析标准品牛蒡子苷元 ≥98% (HPLC)

鸡生长激素(GH)试剂盒 马铃薯淀粉1-萘酚 AR，99.0%牛蒡子苷 分析标准品，>98%

鸡生长激素(GH)试剂盒 马铃薯浸出粉硫代硫钠，五水 AR,99% 分析标准品

鸡乙酰乙检测(ACAC)试剂盒马铃薯浸出粉5-氨-2-三氟苯 98%积雪草  98%

鸡乙酰乙检测(ACAC)试剂盒马铃薯浸出粉2-氟苄溴 97% 分析标准品，≥97%

鸡传染性鼻炎抗体(IC)试剂盒可溶性淀粉3-氟苄溴 95%土木香内酯 分析标准品，≥97%(HPLC)

鸡传染性鼻炎抗体(IC)试剂盒可溶性淀粉(三氟氧)苯 99%异补骨脂素 分析标准品，>98%

鸡透明质(HA)试剂盒糊精4-(三氟氧)苯 97%芦荟宁 分析标准品，≥99%

鸡透明质(HA)试剂盒α-环糊精烯酰氧三(三硅氧烷)硅烷 97%脱水羊藿素 分析标准品,≥99%(HPLC)

鸡硫类肝素(HS)试剂盒α-环糊精过氧化二异苯 CP,98%硫辛 98%
3T3-L1细胞桉糖

出芽短梗孢糖

多缩木糖

果糖

花楸糖

乌来糖

聚乙酰氨葡糖

壳二糖

漏芦糖