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探针法荧光定量PCR试剂盒的检测及TaqMan探针方法

阅读:705          发布时间:2020-2-13

                       探针法荧光定量PCR试剂盒的检测及TaqMan探针方法

     红灯高挂幸福摇,鞭炮齐鸣天地欢;日子美美心情好,阖家欢乐大团圆;敬杯美酒送好友,遥寄祝福无限好;祝你鼠年交好运,心想事成万事顺!接下来介绍 探针法荧光定量PCR试剂盒的检测及TaqMan探针方法

 

检测方法
1.SYBRGreenⅠ法:
在PCR反应体系中,加入过量SYBR荧光染料,SYBR荧光染料特异性地掺入DNA双链后,发射荧光信号,而不掺入链中的SYBR染料分子不会发射任何荧光信号,从而保证荧光信号的增加与PCR产物的增加*同步。
SYBR定量PCR扩增荧光曲线图
PCR产物熔解曲线图
2.TaqMan探针法:
探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;PCR扩增时,Taq酶的5’-3’外切酶活性将探针酶切降解,使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离,从而荧光监测系统可接收到荧光信号,即每扩增一条DNA链,就有一个荧光分子形成,实现了荧光信号的累积与PCR产物的形成*同步。

 

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