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elisa试剂盒要开发新的小分子RNA的提取方法
阅读:297 发布时间:2020-1-3多数传统RNA分离试剂盒目的是为回收mRNA 而设计的,往往会弃去较小的RNA分子以减少干扰提高mRNA得率。因此这些步骤会导致一些小分子RNAs,如微小RNAs的损失。另外,此类方法往往涉及酚/lv仿等有毒化学物质的抽提。多数RNA纯化试剂盒采用的标准玻璃纤维滤膜或者硅胶滤膜,不能有效的回收更小的小分子RNA,如微小RNA。
elisa试剂盒由于微小RNA存在的广泛性和多样性,提示微小RNA可能有非常广泛多样的生物功能。尽管对微小RNA的研究还处于初级阶段,据推测微小RNA在高级真核生物体内对基因表达的调控作用可能和转录因子一样重要并可能代表在一个新发现的层次上的基因表达调控方式。对一部分微小RNA的研究分析提示微小RNA参与生命过程中一系列的重要进程,包括早期发育,细胞增殖,细胞凋亡,细胞死亡,脂肪代谢和细胞分化以及和癌症的发生发展密切相关。可见,对小分子RNA的研究日益受到重视。然而,进行小分子RNA分析的第yi个关键步骤就是从生物样本中纯化小分子RNAs。
微小RNA的分子量相对较小,对于常规的核酸提取法都不适用。微小RNA只有在乙醇浓度很高的条件下(大于70% )才能与核酸提取柱相结合,从而得到分离。但在该浓度的乙醇条件下,绝大多数的其他分子,特别是大分子都会被沉淀,使分离无法进行。 目前多采用利用毒性很强的酚以及lv仿等有机试剂,首先将大分子沉淀除掉,然后纯化总的核酸。除了使用的试剂有毒外,大分子的DNA和RNA仍然会影响对微小RNA的进一步分析。因此,有必要开发新的小分子RNA的提取方法。
elisa试剂盒由于小分子RNA可能参与分化、发育、组织生长、脂肪代谢等生理过程,在不同的组织和发育阶段的表达水平有所不同,进一步了解小分子RNA的生物功能具有重要意义。
微小RNA(microRNA,简称miRNA)是生物体内源长度约为20-23个核苷酸的非编码单链小分子RNA,通过与靶mRNA的互补配对而在转录后水平上对基因的表达进行负调控, 导致mRNA的降解或翻译抑制。