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                                  犬Ⅳ型胶原（Col Ⅳ）检测试剂盒样品收集方法

 

十二月，我想起那年周末我常常出现在阿纤家，在寒冷的天气，我带着帽子，戴着围巾，拿着讨厌的数学卷子听阿纤耐心的讲，讲得我自己都觉得不好意思再问一遍。十二月，我记得我陪着一个女孩在操场哭了一个晚自习，她的眼泪，浸湿我的围巾，她倔强的说不要上课。我们傻傻的站在那里，不知道是那年的风太大还是那时候的操场好冷，我觉得自己已经那木了站在那里。接下来介绍 犬Ⅳ型胶原（Col Ⅳ）检测试剂盒样品收集方法。

 

 

样品收集:

 

1. 血清：全血样品于室温放置2小时或4℃过夜后于1000×g离心20分钟，取上清即可检测，收集血液的试管应为一次性的无热原，无内毒素试管。

 

2. 血浆：抗凝剂推荐使用EDTA-Na2，样品采集后30分钟内于1000×g离心15分钟，取上清即可检测。避免使用溶血，高血脂样品。

 

3. 组织匀浆：用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样品对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂）加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。zui后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟，取上清检测。

 

4. 细胞培养上清：取细胞培养上清于1000×g离心20分钟，除去杂质及细胞碎片。取上清检测。

 

5. 其它生物样品：1000×g离心20分钟，取上清即可检测

 

6. 样品应清澈透明，悬浮物应离心去除。

 

7. 样品收集后若在1周内进行检测的可保存于4℃，若不能及时检测，请按一次使用量分装，冻存于-20℃(1个月内检测)，或-80℃（6个月内检测），避免反复冻融。

 

8. 如果您的样品中检测物浓度高于标准品zui高值，请根据实际情况，做适当倍数稀释（建议先做预实验，以确定稀释倍数）。