详细介绍
中文名称:Calcein-AM/PI活细胞/死细胞双染试剂盒
英文名称:Calcein-AM/PI Double Stain Kit
产品规格:500T
发货周期:1~3天
Calcein-AM是一种对活细胞进行荧光标记的细胞染色试剂,发绿色荧光(Ex=490nm, Em=515nm)。因其在传统的Calcein(钙黄绿素)基础上引入乙酰甲氧基甲酯(AM)基团,增加了疏水性,使其能够轻易穿透活细胞膜。一旦进入细胞后,Calcein-AM(本身不发荧光)被细胞内的酯酶剪切形成膜非渗透性的极性分子Calcein,从而被滞留在细胞内并发出强绿色荧光。与其它同类试剂(如BCECF-AM和CFDA)相比,由于Calcein, AM细胞毒性极低,是适合用于活细胞染色的荧光探针,而且不会抑制任何的细胞功能,如增殖和淋巴球的趋化性。 |
由于死细胞缺乏酯酶,Calcein-AM仅用于对活细胞的细胞生存能力测试和短期标记。因此,Calcein-AM常常与死细胞荧光探针如碘化丙啶(PI)等联合使用,同时进行活细胞和死细胞的荧光双重染色。碘化丙啶(Propidium iodide,PI)不能穿过活细胞的细胞膜,仅能穿过死细胞膜的无序区域而到达细胞核,并嵌入细胞的DNA双螺旋从而产生红色荧光(Ex=535 nm, Em=617 nm),因此PI仅对死细胞染色。由于Calcein和PI-DNA都可被490 nm激发,因此可用荧光显微镜同时观察活细胞和死细胞。而用545 nm激发,仅可观察到死细胞。
本试剂盒的工作原理就在于Calcein-AM和PI的双重染料,来进行活细胞和死细胞的双重染色标记,从而进行活细胞和死细胞水平的分析。根据我司优化的实验体系,单次就200μl细胞悬液进行染色。
注意事项
1)由于Calcein-AM对湿度非常敏感,若是Calcein-AM溶液每次取完需要量后,必须紧紧密封盖子。建议根据单次用量,分装密封保存。Calcein-AM工作液必须现配现用。
2)碘化丙啶(PI)有一定的致癌性,操作时一定要注意防护。若接触到皮肤,需要立即用自来水清洗。
3)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
储存条件:-20℃,有效期12个月
注意事项:
1、本试剂盒仅供科学研究使用,不可用于诊断或治疗。
2、螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖和管内壁上的液体离心至管底,避免开盖时试剂损失。
3、禁止与其他品牌的试剂混用,否则会影响使用效果。
4、样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。
5、最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿,可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并*清除残留清洁剂。
6、避免皮肤或粘膜与试剂接触。
7、需长时间保存可-20℃避光保存。避免反复冻融,否则将会增加空白吸收,从而影响检测结果。最好小剂量分装,用避光袋或是黑纸、锡箔纸包住避光。
8、用培养基或 PBS 来配制待检测药物。如果待测药物有还原性,则测定不含细胞,仅含有 MTS 的待测药物溶液在 490 nm处的空白吸光度。如果该吸光度很小,则可以直接加入 MTS ,如果吸光度相对较大,则需要除去培养基,并用新鲜培养基洗涤细胞两次,然后加入新的 100 μl 培养基和 10 μl MTS 进行检测。
9、细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。
10、加 MTS 溶液后孵育时间的长短根据细胞的类型和细胞的密度等实验情况而定,对于大多数情况孵育 1 小时即可,白细胞需要培养较长时间。
11、如果不是使用 96 孔板检测,MTS 溶液的用量相应等比例增加即可。
谷半胱连接催化亚基(GCLC)elisa试剂盒英文名称:GCLC ELISA Kit卷曲螺旋结构域蛋白11抗体包装500mg
谷半胱连接(GCLM)elisa试剂盒英文名称:GCLM ELISA Kit中心体蛋白55kDa抗体包装5ml
孤啡肽(OFQ)elisa试剂盒英文名称:OFQ ELISA Kit富含半胱与表皮生长因子样蛋白2抗体包装1g
高铁血红蛋白还原(MHBR)elisa试剂盒英文名称:MHBR ELISA Kit骨架相关蛋白2/肿瘤和微管相关蛋白抗体包装5g
高迁移率族蛋白1(HMG1)elisa试剂盒英文名称:HMG1 ELISA Kit染色质修饰蛋白4B(4C)抗体包装1g
高密度脂蛋白(HDL)elisa试剂盒英文名称:HDL ELISA Kit磷化非受体酪激c-Abl抗体包装250mg
高分子量激肽原(HMWK)elisa试剂盒英文名称:HMWK ELISA Kit磷化非受体酪激c-Abl抗体包装1g
高尔基蛋白73(GP73)elisa试剂盒英文名称:GP73 ELISA Kit磷化非受体酪激c-Abl抗体包装5g
干细胞因子受体(SCFR)elisa试剂盒英文名称:SCFR ELISA Kit酪蛋白激1γ2抗体包装10MG
干细胞因子(SCF)elisa试剂盒英文名称:SCF ELISA Kit柯萨奇病蛋白受体B抗体包装100g
干扰诱导T-细胞α亚族趋化剂(ITαC)elisa试剂盒英文名称:ITαC ELISA Kit肿瘤抑制因子FBW7抗体包装25g
干扰调节因子3(IRF3)elisa试剂盒英文名称:IRF3 ELISA Kit粘附分子4抗体包装5g
干扰γ诱导单核因子(MIγ)elisa试剂盒英文名称:MIγ ELISA Kit钙调蛋白结合转录激活因子1抗体包装10g
干扰γ(IFNγ)elisa试剂盒英文名称:IFNγ ELISA Kit周期依赖性激5激活结合蛋白C53抗体包装5g
干扰β(IFNβ)elisa试剂盒英文名称:IFNβ ELISA Kit着丝粒蛋白H抗体包装1g
中甸隔指孢Dactylella│zhongdianensis 质量规格:>99%,BR载脂蛋白C3试剂盒乙酰蒲公英萜;Taraxeryl ac
枯草芽孢杆菌Bacillus│subtilis 质量规格:HPLC>98%,标准品载脂蛋白C2试剂盒异古伦宾;IsocoluMbin
暂未定名Cystofilobasidium│infirmominiatum 质量规格:进分,Sigma C1768载脂蛋白C1试剂盒吲哚;6-Hydroxyindole
Calcein-AM/PI活细胞/死细胞双染试剂盒乙二胺四乙铁钠盐
其他 EDTA铁钠;EDTA一钠铁;乙二胺四乙一钠铁;(OC-6-21)-[[N,N’-1,2-乙二基双[N-(羧基甲基)基乙根]](4-)N,N’,O,O’,O,N,O,N’]铁(1-)钠;铁依地钠;乙二胺四乙钠铁(Ⅲ)盐
英文名称: EDTA-FeNa
其他英文名称: Ethylenediaminetetraacetic acid ferric sodium salt;EDTA ferric sodium salt;Edathamil;EDTA iron(III) sodium salt
产品规格: CP,98.0%
包装:100克/500克
CAS号:15708-41-5
C10H12N2NaFeO8•3H2O=292.25
级别:CP
含量:≥98.0%
水溶解试验:合格
氯化物:≤0.1%
性状:黄色或黄褐色结晶粉末。无毒,加热至240℃分解。溶于水和,微溶于乙
用途:生化研究。主要用作络合剂;氧化剂;感光材料冲洗药品及漂白剂;黑白胶片减薄剂。生化上用于消除由于痕量重金属引起的催化反应的抑制。植物细胞培养
保存:RT
操作规程:
1、在96孔板加入细胞00μL/孔,通常细胞增殖实验每孔加入00微升2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入00微升5000~0000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2、.加入适当浓度的0~0μL 受试化合物。
3、将96孔板在37℃,含5% CO2空气及00%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4、将5×MTT 用稀释液稀释成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小时,使MTT 还原为甲臜。
6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板摇床摇匀。
7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度(如无570nm 滤光片,可以使用560-600nm 的滤光片)。
8、结果分析
a、细胞的存活率:将各测试孔的OD 值减去本底OD 值(*培养基加MTT,无细胞)或空白药物孔OD 值(*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT,无细胞),各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示,T 为加药细胞的OD 值,C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 0%时的药物浓度(IC90)