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玉米矮小花叶病毒RT-PCR试剂盒

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更新时间:2022-04-14 10:28:41浏览次数:223

联系我们时请说明是化工仪器网上看到的信息,谢谢!

产品简介

供货周期 现货 规格 50次
货号 FS-P013397 应用领域 化工
主要用途 公司产品仅供科研    
玉米矮小花叶病毒RT-PCR试剂盒正在出售的产品:Pyk2 (Phospho-Tyr402) Antibody
NFκB-p65 (Phospho-Ser529) Antibody
β-Catenin (Phospho-Ser33) Antibody

详细介绍

特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!

产品名称

规格

货号

玉米矮小花叶病毒RT-PCR试剂盒

50次

FS-P013397

组成及试剂配制:

1、酶标板:一块(96孔)

2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。

3、 样品稀释液:1×20ml。

4、 检测稀释液A:1×10ml。

QQ截图20201022162313.png 

实验外包:

1.基因组学:基因芯片、SNP检测、DNA甲基化检测、生物信息学分析

2.转录组学:microRNA芯片、LncRNA芯片、表达谱芯片、RNA-seq

3.蛋白质组学:2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM

4.基因检测:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR

5.蛋白质检测:Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫荧光、ELISA

6.病理检测:HE染色、特殊染色、组织切片、免疫组化、流式细胞分选

7.代谢组学:GC-MS、LC-MS、NMR
8.细胞及动物模型:原代细胞、细胞模型、动物模型构建

使用方法:

一、稀释PCR阳性对照(以10E2-10E7拷贝/μL这6个10倍稀释度为例)

1. 注意:由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供可以直接使用的DNA片段作为阳性对照。

2. 标记6个离心管,分别为7,6,5,4,3,2。

3. 用带芯枪头分别加入45 μL荧光PCR专用模板稀释液(用带芯枪头,下同)。

4. 在7号管中加入5 μL 1×10E8拷贝/μL 的阳性对照,充分震荡1分钟,得1×10E7拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。

5. 换枪头,在6号管中加入5 μL 1×10E7拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得1×10E6拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。

6. 换枪头,在5号管中加入5 μL 1×10E6拷贝/μL的阳性对照到5号管中,充分震荡1分钟,得1×10E5拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。

7. 重复上面的操作直到得到6个稀释度的阳性对照。放冰上待用。

二、样品DNA的制备

8. 如果有N个样品,必须设置N+2个提取,

多出的一个是PC(样品制备阳性对照),

一个是NC(样品制备阴性对照)。

可以用10μL上步制备的PCR阳性对照的第4号(浓度为1×10E4 拷贝/μL,10μL相当于1万拷贝)或第5号(浓度为1×10E5 拷贝/μL,10μL相当于10万拷贝)再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样,以此作为PC。另外用水作为NC。如果每次制备需要200μL样品,则PC和NC的体积也必须是200μL。

9. 用自选方法纯化样品的DNA,本试剂盒跟市场上大多数病毒。

三、设置qPCR反应(20 μL体系,在样品制备室进行)

10. 如果只做1次重复,则标记N+9个PCR管,其中N+2个用于上步得到的N+2个样品,1个用于PCR阴性对照,6个用于PCR阳性对照。如果做2-3次重复,则反应设置数量相应增加2或3倍。

11. 产品仅用于科研在标记管中按下表加入各成分(本表只列出一次重复。样品管和阴性对照设置完毕后才设置阳性对照,并且阳性对照样品要等所有管子盖上盖子储存好后加)

 

 

 

 

 

 

 

 

PCR实验步骤:

①取冻存已裂解的细胞,室温放置5分钟使其*溶解。

②两相分离 每1ml的试剂裂解的样品中加入0.2ml的lvfang,盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后,15到30℃孵育2到3分钟。4℃下12000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚lvfang相,中间层以及无色水相上层。RNA全部被分配于水相中。水相上层的体积大约是匀浆时加入的TRIZOL试剂的60%。

③RNA沉淀将水相上层转移到一干净无RNA酶的离心管中。加等体积异丙醇混合以沉淀其中的RNA,混匀后15到30℃孵育10分钟后,于4℃下12000rpm 离心10分钟。此时离心前不可见的RNA沉淀将在管底部和侧壁上形成胶状沉淀块。

④RNA清洗 移去上清液,每1ml试剂裂解的样品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混匀后,4℃下7000rpm离心5分钟。

⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室温空气中干燥5-10分钟。

⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA时,先加入无RNA酶的水40μl用枪反复吹打几次,使其*溶解,获得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法测定先用稀释用的TE溶液将分光光度计调零。然后取少量RNA溶液用TE稀释(1:100)后,读取其在分光光度计260nm和280nm处的吸收值,测定RNA溶液 浓度和纯度。

LPLUNC1/FITC 荧光标记人鼻咽癌癌基因抗体IgGMulti-class antibodies: 0.2ml

 Syntaxin 1/Syn1A /FITC 荧光标记突触融合蛋白1抗体IgGMulti-class antibodies: 0.2ml

Rhesus antibody Rh ADFP 脂肪组织分化相关蛋白抗体  0.1ml

Rabbit  Goat IgG/PE-Cy3 PE-Cy3标记的兔抗羊IgG 0.1ml

phospho-GluR1 (Ser863) 磷化谷受体1抗体 0.1ml

Rhesus antibody Rh Rabbit  chicken IgM/Cy5 Cy5标记的兔抗鸡IgM  0.1ml

 Syntaxin 1/Syn1A /FITC 荧光标记突触融合蛋白1抗体IgGMulti-class antibodies: 0.2ml

HL(Human hepatic lipase) ELISA Kit 人肝脂Multi-class antibodies: 48T

 Hrasls3/HREV107 HRAS样抑制因子3抗体Multi-class antibodies: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Maspin 抑癌基因抗体  0.1ml

MMP11(Human matrix metalloproteinase 11) ELISA Kit 人基质金属蛋白11 96T

RAB3GAP1 RAB3-GTP激活蛋白催化亚单位1抗体 0.2ml

C5orf22 5号染色体开放阅读框22抗体 0.2ml

 Hrasls3/HREV107 HRAS样抑制因子3抗体Multi-class antibodies: 0.2ml

Rabbit  mouse IgM/Cy5 Cy5标记的兔抗小鼠IgM 0.1ml

GPR120 G蛋白偶联受体120抗体 0.2ml

Rhesus antibody Rh Annexin A1 膜粘连蛋白A1抗体  0.1ml

 IL-33/FITC 荧光标记白介33抗体IgGMulti-class antibodies: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Rabbit  human IgG/Cy3 Cy3标记的兔抗人IgG  0.1ml

 RhoA /FITC 荧光标记RhoA抗体IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
玉米矮小花叶病毒RT-PCR试剂盒堪萨斯分枝杆菌种属: Mycobacterium│Mycobacterium kansasii提供形式: 冻干物安全等级: 3模式菌株: no应用领域: 研究生长条件: 28存储条件: 真空冷冻干燥法

氧化葡糖杆菌种属: Gluconobacter│oxydans提供形式: 冻干物安全等级: 1模式菌株: no应用领域: 产维生C培养基: 0001生长条件: 30℃存储条件: 液氮超低温冻结法;真空冷冻干燥法

枯草芽孢杆菌种属: Bacillussubtilis(Ehrenberg)Cohn安全等级: 1模式菌株: no培养基: 2生长条件: 30-37℃

Gramellaportivictoriae种属: Gramellaportivictoriae分离基物: 香港维多利亚港的沉积物安全等级: 1模式菌株: yes应用领域: 模式菌株培养基: 102生长条件: 30℃

叶受体(FOLR)ELISA试剂盒异丁香酚(正+反) 分析标准品,用于环境分析2,5-二甲基-2,5-双(过氧化叔丁基)-3-己炔 试剂级缩宫,醋催产

(FA)ELISA试剂盒异戊 99%乙异戊酯 AR,99%紫杉

氧化型谷胱甘肽(GSSG)ELISA试剂盒无三化铁 ≥99.99% metals basis过氧化十二酰 98%紫杉(标准品)

氧化型低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA试剂盒三氟磺铟 98%过硫钠 99.99% metals basis盐帕洛诺司琼

氧化高密度脂蛋白(Ox-HDL)ELISA试剂盒2-亚氨基生物 98%四钠 AR,99%硫巴龙霉

氧化低密度脂蛋白抗体(OLAb)ELISA试剂盒肌苷-5′-二钠盐 99%四钠 99.5%硫巴龙霉(标准品)

氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA试剂盒5--2- 98%2,5-二甲基-2,5-双-(叔丁基过氧)己 93%甲磺帕珠沙星

氧还原蛋白过氧化物4(PRDX4)ELISA试剂盒胰岛 ≥27 USP units/mg (HPLC)正丁 GR(剧品)甲磺帕珠沙星(标准品)

延伸蛋白A(EloA)ELISA试剂盒烯异癸酯 98%,含70-100ppm对二酚稳定剂异丁 99%(剧品)甲磺培氟沙星

烟酰腺二核苷(NADPH)ELISA试剂盒2-丁酮 97%异丁 Standard for GC, ≥99.5% (GC)甲磺培氟沙星(标准品)

烟酰腺二核苷(NAD)ELISA试剂盒亚油  99%聚烯酰 非离子型,分子量:200万-1400万培美曲塞二钠

牙骨质蛋白1(CEMP-1)ELISA试剂盒1,2,3,4,5,6-六环己 分析标准品三酯 分析标准品,≥99.8%(GC)培美曲塞二钠(标准品)

牙本质基质蛋白1(DMP1)ELISA试剂盒1,2,3,4,5,6-六环己 97%三酯 CP酞磺噻唑

循环复合物(CIC)ELISA试剂盒DL-乳锂 97%三酯 98%匹格列酮

血影蛋白(spectrin)ELISA试剂盒溶菌,鸡蛋白 40000U/mg酚酯 99%匹格列酮(标准品)

血小板衍生生长因子可溶性受体α(PDGFsR-α)ELISA试剂盒亚麻 分析标准品 ,≥99% (GC)环胞霉A 98%匹格列酮盐盐


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