详细介绍
参数规格:
产品货号:FS-P013539
产品规格:50次
产品分类:纯化试剂盒
产品运输:低温运输
实验过程:
一、试剂准备 1. DNA模板 2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 二、操作步骤 1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。 2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。 3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。 4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。 |
注意事项
1.公司产品仅用于科研整个检测过程应严格按照本说明书要求分别在试剂准备区、样本处理区和PCR扩增区进行操作,各区实验服、仪器、耗材应独立使用,不能混用;实验用吸头采用带滤芯吸头;样本处理区应配有生物安全柜,样本处理在生物安全柜中进行操作;三个区应该配有紫外线杀菌装置。
2.为避免RNA降解,样本处理过程应在0-4℃条件下操作,且完成实验后立即上机检测;样本处理过程中使用的器具耗材应经过无核酶处理。
3.每次实验应该设置阴、阳性对照。
4.试剂盒所有试剂在使用前应该在常温下充分融化混匀,并应瞬时离心。
5.试剂盒内所配阴性和阳性对照在第一次使用前应全部转移至标本准备区,并单独存放。
6.为防止荧光干扰,应避免裸手直接接触PCR反应管,并应避免在PCR反应管上进行任何标记。
7.仪器扩增相关参数应按照本说明书相关要求进行设置;不同批号试剂不能混用。
8.ABI系列荧光定量PCR仪参数设置中不选ROX校正,淬灭基因选择None。
9.实验过程中产品的废弃物应该进行无害化处理后方可丢弃。
Laminin alpha5/FITC 荧光标记层粘蛋白α5抗体IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Socs 3/FITC 荧光标记细胞因子信号传导抑制蛋白3抗体IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh AKR1B1 糖还原抗体 0.2ml
Rabbit horse IgG/Gold 胶体金标记的兔抗马IgG 0.5ml
GPR158 G蛋白偶联受体GPR158蛋白抗体 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Goat IgM/RBITC 罗丹明标记的兔抗羊IgM 0.3ml
Socs 3/FITC 荧光标记细胞因子信号传导抑制蛋白3抗体IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
sVE-Cadherin (Human Vascular Endothelial-Cadherin Complex) ELISA Kit 人血管内皮钙粘着蛋白复合体Multi-class antibodies: 48T
PAG608 p53活化基因608单克隆抗体Multi-class antibodies: 0.1ml
Rhesus antibody Rh HSD3B1 滋养层细胞抗原3β-HSD抗体 0.1ml
T3(Mouse Tri-iodothyronine)ELISA Kit 小鼠状腺原 96T
Proteasome 20S alpha 3(Ser250) 磷化蛋白体PSMα3抗体 0.1ml
Chordin 原肠胚双向形成相关蛋白抗体 0.2ml
PAG608 p53活化基因608单克隆抗体Multi-class antibodies: 0.1ml
Donkey human IgG/PE-Cy3 PE-Cy3标记的驴抗人IgG 0.1ml
GCAP2 鸟苷环化激活蛋白2抗体 0.2ml
Rhesus antibody Rh ARSF 芳香基酯F抗体 0.2ml
IDE/FITC 荧光标记胰岛降解抗体IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Monkey IgG/HRP 辣根过氧化物标记的兔抗猴IgG 0.1ml
PKN2 /FITC 荧光标记蛋白激N2抗体IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
巴尔通体通用染料法荧光定量PCR试剂盒50次刺糖多孢菌种属: Saccharopolyspora│spinosa提供形式: 冻干物安全等级: 1模式菌株: no培养基: 609生长条件: 28-30℃存储条件: 真空冷冻干燥法
土地盐红菌种属: Halorubrum│terrestre提供形式: 冻干物安全等级: 1模式菌株: yes应用领域: 模式菌株培养基: 0212生长条件: 37℃存储条件: 液氮超低温冻结法;真空冷冻干燥法
香菇种属: Lentinula│edodes提供形式: 斜面培养物安全等级: 1模式菌株: no应用领域: 食用培养基: 0017生长条件: 25℃存储条件: 液氮超低温冻结法;真空冷冻干燥法
维涅兰德固氮菌种属: Azotobacter│vinelandii提供形式: 冻干物安全等级: 1模式菌株: yes应用领域: C*tion (3363). Fixes nitrogen. Preservation (3363).培养基: 0063生长条件: 30℃存储条件: -80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法;矿物油法;定期移植法
白介6(IL-6)ELISA试剂盒N-2-哌-N'-2-乙磺钠盐 99.5%L-亮氨乙酯盐盐 99%氢铝(>98%,BR)
白介5受体alpha(IL5RA)ELISA试剂盒磺钠 98%L-亮氨甲酯盐盐 98%铵三(>98%,BR)
白介-5(IL-5)ELISA试剂盒对羟基甲钠 CP,98%4'-甲氧基酮 99%碳钡(>99%,BR)
白介5(IL-5)ELISA试剂盒对羟基甲钠 99%对酮 96%甲酰(>98%,BR)
白介4受体(IL4R/CD124)ELISA试剂盒N-2-哌-N'-2-乙磺 99%香豆灵甲酯 98%比布里希猩红(>90%,BS)
白介4(IL-4)ELISA试剂盒鲁米诺 98%4-甲基-2-氧戊 98%柠檬钙;柠檬钙四
白介37(IL-37)ELISA试剂盒3-(N-啉)磺钠 99.5%(T)6-硝基吲唑 98%硫铯(分子生物学级)
白介35(IL-35)ELISA试剂盒N,N′-烯酰 CP,97%4-吡啶-4-基甲 98%铜片
白介33(IL-33)ELISA试剂盒N,N′-烯酰 for electrophoresis, ≥99.0% (T)4-甲氧基酮 98%化亚铜(>97%,BR)
白介32(IL-32)ELISA试剂盒N,N′-烯酰 for molecular biology, ≥99.0% (T)酮 98%化亚铜(>99%,BR)
白介31(IL-31)ELISA试剂盒 吗啉乙磺,一 分子生物学级, ≥99% (T)酮 99%2'-脱氧鸟苷5'二二钠盐
白介3(IL-3)ELISA试剂盒3-(N-啉)磺 99%L-氨乙酯盐盐 98%D-葡萄糖钠(> 98%,BR)
白介2诱导的T激(ITK)ELISA试剂盒吗啉乙磺钠盐 99%2-羟基喹喔啉 99%乙二四乙二钠一钙盐
白介2受体(IL-2R)ELISA试剂盒6-甲氧基喹啉 96%?;峭蜒醯?98%聚蔗糖70
白介2受体(IL2R)ELISA试剂盒3-甲基-2-并噻唑酮腙盐盐,合 98%4-叔丁基苄 99%碳胍(>98%,BR)
白介2可溶性受体β链(IL-2sRβ)ELISA试剂盒酚试剂 AR,98.0%2-氨基甲叔丁酯 97%六次甲基四(>99%,BC)
操作流程:
1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2.设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
3.样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5.弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。