化工儀器網(wǎng)
詳細介紹
參數(shù)規(guī)格：
產品貨號：FS-02R6346
產品規(guī)格：48T 0.1PCR管
產品分類：PCR-熒光探針法/PCR法
產品運輸：低溫運輸
實驗過程：
一、試劑準備 1. DNA模板 2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物） 3．10×PCR Buffer 4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5．Taq酶 | 二、操作步驟 1．在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1（10pM） 2μl 引物2（10PM） 2μl Taq酶（2U/μl） 1μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。 2．調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。 3．結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。 |
注意事項
1.公司產品僅用于科研整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作，各區(qū)實驗服、儀器、耗材應獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解，樣本處理過程應在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻，并應瞬時離心。
5.試劑盒內所配陰性和陽性對照在第一次使用前應全部轉移至標本準備區(qū)，并單獨存放。
6.為防止熒光干擾，應避免裸手直接接觸PCR反應管，并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7.儀器擴增相關參數(shù)應按照本說明書相關要求進行設置；不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；
3.樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。
4.除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板5次（也可用洗板機洗板）。
6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL，15min內，在450nm波長處測定各孔的OD值。
HSP-27 ELISA Kit 大鼠熱休克蛋白27Multi-class antibodies： 48T
TRAF2 壞死因子受體相關因子2抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh GLB1L3 β半乳糖苷1樣蛋白3抗體 0.2ml
GP- II b III a/CD41+CD61 ELISA Kit 大鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa 96T
phospho-NIPA(Ser354) 磷化間變性瘤激核相互作用伴侶蛋白抗體 0.1ml
Beta-arrestin 1 β-抑制蛋白1抗體 0.2ml
TRAF2 壞死因子受體相關因子2抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
BRCA-2(Human breast cancer susceptibility protein 2) ELISA Kit 人癌易感蛋白2Multi-class antibodies： 48T
HIF-1 Beta/ARNT1 缺氧誘導因子1β 抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
Rhesus antibody Rh MFAP3L 微絲相關蛋白3樣抗體 0.1ml
PKC(Human protein kinase C) ELISA Kit 人蛋白激C 96T
RIP1 受體相互作用蛋白激1抗體 0.1ml
C6orf132 6號染色體開放閱讀框132抗體 0.2ml
HIF-1 Beta/ARNT1 缺氧誘導因子1β 抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
Rabbit dog IgG/HRP 辣根過氧化物標記的兔抗狗IgG 0.1ml
GLRB 甘受體β/GlyR β抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh ADCY1 腺苷環(huán)化1抗體 0.2ml
LY-86/MD-1/FITC 熒光標記MD-1蛋白抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit chicken IgG/HRP 辣根過氧化物標記的兔抗雞IgG 0.1ml
Tau protein/FITC 熒光標記微管相關蛋白抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
副溶血性弧菌核酸檢測試劑盒48T 0.1PCR管通用型稻白葉枯病野油菜假單孢菌稻變種（Xanthomonas campestris pv.oryzae；Xco）基因檢測試劑盒20次小鼠游離脂肪elisa檢測試劑盒
通用型野油菜黃單胞菌菜豆疫病致病變種（Xanthomonas campestris pv.pelargonii；Xcp）基因檢測試劑盒20次小鼠鈣通道阻滯劑elisa檢測試劑盒
通用型野油菜黃單胞菌菜豆疫病致病變種（Xanthomonas campestris pv.phaseoli；Xcph）基因檢測試劑盒20次小鼠骨保護配體elisa檢測試劑盒
通用型番茄瘡痂病辣椒斑點病菌（Xanthomonas campestris pv.vesicatoria；Xcv）基因檢測試劑盒20次小鼠血漿α顆粒膜蛋白elisa檢測試劑盒
通用型角胡麻葉斑病嗜麥芽黃黃單胞菌（Xanthomonas maltophilia；Xm）基因檢測試劑盒20次小鼠睪酮elisa檢測試劑盒
通用型柑桔枯萎病茍養(yǎng)木桿菌（Xylella fastidiosa；Xf）20次小鼠橫紋肌輔肌動蛋白αelisa檢測試劑盒
基因檢測試劑盒小鼠磷肌醇3elisa檢測試劑盒
通用型甘薯黑斑?。?/span>Ceratocystis fimbriata）基因檢測試劑盒20次小鼠熱休克蛋白60elisa檢測試劑盒
通用型B1比色法檢測試劑盒20次小鼠糖皮質受體βelisa檢測試劑盒
血液B1比色法檢測試劑盒20次小鼠游離睪酮elisa檢測試劑盒
食物B1比色法檢測試劑盒20次小鼠降鈣基因相關肽elisa檢測試劑盒
植物B1比色法檢測試劑盒20次小鼠顆粒Belisa檢測試劑盒
B1比色法檢測試劑盒20次小鼠解脲脲原體抗體elisa檢測試劑盒
酵母B1比色法檢測試劑盒20次小鼠血管緊張Ⅰelisa檢測試劑盒
體液B1比色法檢測試劑盒20次小鼠色Celisa檢測試劑盒
化工儀器網(wǎng)