详细介绍
参数规格:
产品货号:FS-P013441
产品规格: 50次
产品分类:纯化试剂盒
产品运输:低温运输
实验过程:
一、试剂准备 1. DNA模板 2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 二、操作步骤 1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。 2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。 3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。 4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。 |
注意事项
1.公司产品仅用于科研整个检测过程应严格按照本说明书要求分别在试剂准备区、样本处理区和PCR扩增区进行操作,各区实验服、仪器、耗材应独立使用,不能混用;实验用吸头采用带滤芯吸头;样本处理区应配有生物安全柜,样本处理在生物安全柜中进行操作;三个区应该配有紫外线杀菌装置。
2.为避免RNA降解,样本处理过程应在0-4℃条件下操作,且完成实验后立即上机检测;样本处理过程中使用的器具耗材应经过无核酶处理。
3.每次实验应该设置阴、阳性对照。
4.试剂盒所有试剂在使用前应该在常温下充分融化混匀,并应瞬时离心。
5.试剂盒内所配阴性和阳性对照在第一次使用前应全部转移至标本准备区,并单独存放。
6.为防止荧光干扰,应避免裸手直接接触PCR反应管,并应避免在PCR反应管上进行任何标记。
7.仪器扩增相关参数应按照本说明书相关要求进行设置;不同批号试剂不能混用。
8.ABI系列荧光定量PCR仪参数设置中不选ROX校正,淬灭基因选择None。
9.实验过程中产品的废弃物应该进行无害化处理后方可丢弃。
LH/Biotin 生物标记抗人促黄体生成抗体IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
STAT5/FITC 荧光标记信号转导和转录激活因子5(STAT5)抗体IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh AEV(Avian Encephalomyelitis virus) 禽脑脊髓炎病毒AEV抗体 0.1ml
Rabbit Goat IgM/Cy7 Cy7标记的兔抗羊IgM 0.1ml
GOLGA6L4 高尔基体膜相关蛋白6样蛋白4抗体 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit dog IgG/HRP 辣根过氧化物标记的兔抗狗IgG 0.1ml
STAT5/FITC 荧光标记信号转导和转录激活因子5(STAT5)抗体IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
PGE2(Human Prostaglandin E2) ELISA Kit 人前列腺E2Multi-class antibodies: 48T
EDG2/LPA1 溶血磷脂受体蛋白1抗体Multi-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh KLHL11 Kelch样蛋白11抗体 0.2ml
PI Ab-IgG/IgM)ELISA Kit 大鼠磷脂酰肌醇抗体IgG/IgM 96T
PTP4A2 肝再生磷酯2抗体 0.2ml
CAMKK2 钙调蛋白激激β抗体 0.1ml
EDG2/LPA1 溶血磷脂受体蛋白1抗体Multi-class antibodies: 0.2ml
Rabbit rat IgM/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488标记的兔抗大鼠IgM 0.1ml
GDE3 促进成骨细胞分化因子抗体 0.2ml
Rhesus antibody Rh API5 凋亡抑制因子5抗体 0.1ml
IL-13Ra1/FITC 荧光标记白细胞介-13受体a1抗体IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit human sIgA/Cy3 Cy3标记的兔抗人分泌型IgA 0.1ml
PTHrP/FITC 荧光标记甲状旁腺相关蛋白抗体IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
甲型肝炎病毒探针法荧光定量RT-PCR试剂盒问号状钩端螺旋体种属: Leptospira│interrogans提供形式: 冻结物安全等级: 2模式菌株: no应用领域: 血清学分型 Tarassovi tarassovi培养基: CM0114生长条件: 37℃存储条件: -80℃冰箱冻结法
伤寒沙门氏菌种属: Salmonella│typhi提供形式: 冻干物安全等级: 2模式菌株: no应用领域: 噬菌体分型用 Vi F4 9,12,Vi d -培养基: CM0051生长条件: 37℃存储条件: 真空冷冻干燥法
绿色木霉种属: Trichoderma│viride提供形式: 冻干物安全等级: 1模式菌株: no培养基: CM0091生长条件: 28-30℃存储条件: -80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法
海川西氏菌种属: Henriciella│marina分离基物: 样/海提供形式: 斜面培养物安全等级: 1模式菌株: yes应用领域: 模式菌株培养基: 1001生长条件: 28℃存储条件: 液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法
鞘脂(SM)ELISA试剂盒丁异戊酯 99%顺-6-壬烯 95%富马酮替芬
鞘氨激1(SPK1)ELISA试剂盒丁异戊酯 GCS,≥99.5% (GC)顺-6-壬烯 95%,FG富马酮替芬(标准品)
鞘氨(SPH)ELISA试剂盒丁异戊酯 ≥98%, FCC, Kosher, FG丁位壬内酯 98%酮咯
桥粒芯糖蛋白3(Dsg-3)ELISA试剂盒己异丁酯 98%乙橙花酯 95%来氟米特
桥粒芯糖蛋白2(DSG2)ELISA试剂盒乙异戊酯 AR,99%正辛 AR,99.0%来氟米特(标准品)
桥粒芯糖蛋白1(Dsg-1)ELISA试剂盒乙异戊酯 CP,98%1-辛 99%左氧氟沙星
桥粒芯糖蛋白-1(DGS-E1)ELISA试剂盒乙异戊酯 ≥99%, FCC, FG1-辛 97%左氧氟沙星(标准品)
桥粒糖蛋白2(DSC2)ELISA试剂盒甲异戊酯 mixture of isomers, ≥97%, FG罗勒烯 90%诺昔康
羟脯氨糖蛋白(HRGP)ELISA试剂盒异戊酯 97%桂乙酯 96%诺昔康(标准品)
羟脯氨(Hyp)ELISA试剂盒乙芳樟酯 96%3- 99%洛沙坦/沙坦
羟赖氨糖苷(HOLG)ELISA试剂盒乙酰 AR,99.0%3- ≥98%, FCC洛沙坦/沙坦
羟赖氨(Hyl)ELISA试剂盒叶 98%3- GR,99%马赛替尼
羟甲基戊二单酰辅A还原(HMG-CoAR)ELISA试剂盒芳樟 98%3- 95%美西林/氮脒青霉
羟甲基戊二单酰辅A(HMG-CoA)ELISA试剂盒DL-乳 ACS, ≥85%3- ≥95%, FCC甲羟孕酮/安宫黄体
羟基赖正己氨(HLNL)ELISA试剂盒月桂 AR,98%异丁氧基乙酯 98%甲羟孕酮(标准品)
羟基胶原吡啶交联(OH-PYD)ELISA试剂盒丁甲酯 Standard for GC,>99.5% (GC)异丁氧基乙酯 ≥98%, FCC甲巯咪唑/他巴唑/2-巯基-1-甲基咪唑
操作流程:
1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2.设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
3.样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5.弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。