化工仪器网
详细介绍
特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
产品名称 | 规格 | 货号 |
48T | FS-02R6341 |
组成及试剂配制:
1、酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
实验外包:
1.基因组学：基因芯片、SNP检测、DNA甲基化检测、生物信息学分析
2.转录组学：microRNA芯片、LncRNA芯片、表达谱芯片、RNA-seq
3.蛋白质组学：2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因检测：DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白质检测：Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫荧光、ELISA
6.病理检测：HE染色、特殊染色、组织切片、免疫组化、流式细胞分选
7.代谢组学：GC-MS、LC-MS、NMR
8.细胞及动物模型：原代细胞、细胞模型、动物模型构建
使用方法：
一、稀释PCR阳性对照（以10E2-10E7拷贝/μL这6个10倍稀释度为例） 1. 注意：由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体样品做阳性对照，只提供可以直接使用的DNA片段作为阳性对照。 2. 标记6个离心管，分别为7，6，5，4，3，2。 3. 用带芯枪头分别加入45 μL荧光PCR专用模板稀释液（用带芯枪头，下同）。 4. 在7号管中加入5 μL 1×10E8拷贝/μL 的阳性对照，充分震荡1分钟，得1×10E7拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。 5. 换枪头，在6号管中加入5 μL 1×10E7拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡1分钟，得1×10E6拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。 6. 换枪头，在5号管中加入5 μL 1×10E6拷贝/μL的阳性对照到5号管中，充分震荡1分钟，得1×10E5拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。 7. 重复上面的操作直到得到6个稀释度的阳性对照。放冰上待用。 | 二、样品DNA的制备 8. 如果有N个样品，必须设置N+2个提取， 多出的一个是PC（样品制备阳性对照）， 一个是NC（样品制备阴性对照）。 可以用10μL上步制备的PCR阳性对照的第4号（浓度为1×10E4 拷贝/μL，10μL相当于1万拷贝）或第5号（浓度为1×10E5 拷贝/μL，10μL相当于10万拷贝）再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样，以此作为PC。另外用水作为NC。如果每次制备需要200μL样品，则PC和NC的体积也必须是200μL。 9. 用自选方法纯化样品的DNA，本试剂盒跟市场上大多数病毒。 | 三、设置qPCR反应（20 μL体系，在样品制备室进行） 10. 如果只做1次重复，则标记N+9个PCR管，其中N+2个用于上步得到的N+2个样品，1个用于PCR阴性对照，6个用于PCR阳性对照。如果做2-3次重复，则反应设置数量相应增加2或3倍。 11. 产品仅用于科研在标记管中按下表加入各成分（本表只列出一次重复。样品管和阴性对照设置完毕后才设置阳性对照，并且阳性对照样品要等所有管子盖上盖子储存好后加）
|
PCR实验步骤：
①取冻存已裂解的细胞，室温放置5分钟使其*溶解。
②两相分离 每1ml的试剂裂解的样品中加入0.2ml的lvfang，盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后，15到30℃孵育2到3分钟。4℃下12000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚lvfang相，中间层以及无色水相上层。RNA全部被分配于水相中。水相上层的体积大约是匀浆时加入的TRIZOL试剂的60%。
③RNA沉淀将水相上层转移到一干净无RNA酶的离心管中。加等体积异丙醇混合以沉淀其中的RNA，混匀后15到30℃孵育10分钟后，于4℃下12000rpm 离心10分钟。此时离心前不可见的RNA沉淀将在管底部和侧壁上形成胶状沉淀块。
④RNA清洗 移去上清液，每1ml试剂裂解的样品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀?；煸群?，4℃下7000rpm离心5分钟。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室温空气中干燥5-10分钟。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA时，先加入无RNA酶的水40μl用枪反复吹打几次，使其*溶解，获得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法测定先用稀释用的TE溶液将分光光度计调零。然后取少量RNA溶液用TE稀释(1:100)后，读取其在分光光度计260nm和280nm处的吸收值，测定RNA溶液 浓度和纯度。
GP-II ELISA Kit 大鼠糖原磷化同工IIMulti-class antibodies： 48T
TRPV1/VR1 辣椒受体抗体Multi-class antibodies： 0.1ml
Rhesus antibody Rh GADD45B 生长抑制DNA损伤基因GADD45β抗体 0.1ml
aFGF-1(Human acidic fibroblast growth factor 1) ELISA Kit 人性成纤维细胞生长因子1 96T
NIRF 环指蛋白107抗体 0.2ml
ANKRD42 锚蛋白重复结构域蛋白42抗体 0.2ml
TRPV1/VR1 辣椒受体抗体Multi-class antibodies： 0.1ml
CTX- I (Human C-telopeptide of type I collagen) ELISA Kit 人Ⅰ型胶原C端肽Multi-class antibodies： 48T
Phospho-HSL (Ser552) 磷化敏感脂肪抗体Multi-class antibodies： 0.1ml
Rhesus antibody Rh MATK 酪蛋白激细胞分裂抗体 0.2ml
GCK(Human glucokinase) ELISA Kit 人葡萄糖激 96T
RNF15 环指蛋白15抗体 0.2ml
chemerin 趋化抗体 0.1ml
Phospho-HSL (Ser552) 磷化敏感脂肪抗体Multi-class antibodies： 0.1ml
Rabbit Bovine IgM/Cy5.5 Cy5.5标记的兔抗IgM 0.1ml
GGT5 heavy chain γ-谷酰转肽5重链抗体 0.2ml
Rhesus antibody Rh ACTR1A (α/β-centractin) 肌动蛋白相关蛋白1抗体 0.2ml
Phospho-Mcl1 (Ser159/Thr163)/FITC 荧光标记磷化髓样细胞白血病-1抗体IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Bov IgG/FITC FITC标记的兔抗IgG 0.3ml
RARRES1/TIG1/FITC 荧光标记视黄受体应答蛋白1抗体IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
轮状病毒RNAPCR检测试剂盒植物果聚糖连续循环反应比色法检测试剂盒20次犬肝辅因子Ⅱelisa检测试剂盒
食物果聚糖连续循环反应比色法检测试剂盒20次犬γ氨基丁elisa检测试剂盒
蓝藻果聚糖连续循环反应比色法检测试剂盒20次胶原Ielisa检测试剂盒
酒类果糖法检测试剂盒20次猴肿瘤坏死因子αelisa检测试剂盒
果菜果糖法检测试剂盒20次兔子受体elisa检测试剂盒
饮料果糖法检测试剂盒20次鲑鱼补体蛋白3elisa检测试剂盒
糖果果糖法检测试剂盒20次犬Aelisa检测试剂盒
面食果糖法检测试剂盒20次猴E选择elisa检测试剂盒
豆类半乳甘露糖比色法检测试剂盒20次兔肌钙蛋白Ⅰelisa检测试剂盒
魔芋葡甘露聚糖比色法检测试剂盒20次兔子白介8elisa检测试剂盒
凝胶软糖葡甘露聚糖比色法检测试剂盒20次犬肌红蛋白elisa检测试剂盒
果菜D-葡萄糖法检测试剂盒20次乙酰胆受体抗体elisa检测试剂盒说明
乳品D-葡萄糖法检测试剂盒20次兔子脑钠/脑钠尿肽elisa检测试剂盒
食物D-葡萄糖法检测试剂盒20次绵羊补体片段3b受体elisa检测试剂盒
糖果D-葡萄糖法检测试剂盒20次猫α干扰elisa检测试剂盒
化工仪器网