详细介绍
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片*浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
产品属于:
中文名称 | 英文名称 | 产品规格 | 发货周期 |
Trypan blue | 10g | 1~3天 |
商品介绍:
台盼蓝(Trypan Blue),一种偶氮、亲水性酸性蓝色染料,可透过死亡细胞和垂死细胞的细胞膜,将其染成蓝色,而活细胞由于其细胞膜的完整性,可将台盼蓝排斥在外,因此,通过颜色的变化即可将活细胞(活细胞呈透明无色)和死细胞鉴别开来,基于此原理,本品广泛用于细胞活性水平的常规评估。细胞计数前,需要用生理盐缓冲液或者无血清培养基对细胞进行充分的清洗,因为细胞对血清蛋白具有非常高的亲和力,因此残留的血清蛋白会导致较暗的染色背景。 |
台盼蓝还可染色胶原和淀粉样蛋白。台盼蓝与蛋白结合形成的复合物可发出红色荧光。另外,台盼蓝(合适浓度)还常用来淬灭细胞表面的自荧光或者其他荧光信号。
本品为细胞培养级别,台盼蓝染色法主要用来鉴定组织分离到原代细胞的存活情况。只需3-5min染色,即可通过血球计数法分析结果。
中文别名:直接蓝14;锥虫蓝;曲利苯蓝
英文别名:Direct Blue 14; Dianil blue; Diaminine Blue
CAS:72-57-1
分子式:C34H24N6Na4O14S4
分子量:960.81
外观:棕色至黑褐色、黑色、黑褐色粉末
组分:染料含量,>40%
溶解性:溶于水(10mg/ml)
储存条件:室温
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将1mm3左右大?。?/span>
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
激活蛋白C(APC)elisa试剂盒英文名称:APC ELISA Kit9号染色体开放阅读框139抗体包装1g
激活T-细胞核因子1(NFATC1)elisa试剂盒英文名称:NFATC1 ELISA Kit9号染色体开放阅读框140抗体包装5g
基质细胞衍生因子4(SDF4)elisa试剂盒英文名称:SDF4 ELISA Kit9号染色体开放阅读框142抗体包装1g
基质细胞衍生因子1(SDF1)elisa试剂盒英文名称:SDF1 ELISA Kit9号染色体开放阅读框163抗体包装5g
基质金属蛋白9(MMP9)elisa试剂盒英文名称:MMP9 ELISA Kit9号染色体开放阅读框169抗体包装25g
基质金属蛋白8(MMP8)elisa试剂盒英文名称:MMP8 ELISA Kit9号染色体开放阅读框173抗体包装5g
基质金属蛋白7(MMP7)elisa试剂盒英文名称:MMP7 ELISA Kit9号染色体开放阅读框21抗体包装100g
基质金属蛋白3(MMP3)elisa试剂盒英文名称:MMP3 ELISA Kit磷化丝/苏蛋白激II β/casein kinase IIβ抗体包装25g
基质金属蛋白23B(MMP23B)elisa试剂盒英文名称:MMP23B ELISA Kit癌胚抗原抗体包装100g
基质金属蛋白2(MMP2)elisa试剂盒英文名称:MMP2 ELISA Kit癌胚抗原抗体包装25g
基质金属蛋白19(MMP19)elisa试剂盒英文名称:MMP19 ELISA Kit粘附分子相关蛋白/癌基因下调蛋白抗体包装500g
基质金属蛋白15(MMP15)elisa试剂盒英文名称:MMP15 ELISA Kit淋巴抗原Ly6c抗体包装25g
基质金属蛋白14(MMP14)elisa试剂盒英文名称:MMP14 ELISA Kit周期E抗体包装5g
基质金属蛋白13(MMP13)elisa试剂盒英文名称:MMP13 ELISA Kit7号染色体开放阅读框50抗体包装25g
基质金属蛋白12(MMP12)elisa试剂盒英文名称:MMP12 ELISA Kit7号染色体开放阅读框53抗体包装5g
: =JCM3025=CBS429.61=DSM43023=IFM1175=IFO13资源名称: 白色链孢囊菌 质量规格:>95%,EP,BR脂阿拉伯甘露聚糖试剂盒银杏双黄酮;ginkgetin
雅致小克银汉霉Cunninghamella│elegans 质量规格:效价测定整合连接激1试剂盒杨芽黄;Tectochrysin
葡萄座腔菌属Botryosphaeria│sp. 质量规格:>99%,USP34整合β4结合蛋白试剂盒鱼藤;deguelin
台盼蓝乙-α-萘酯
其他乙-1-萘酯;醋-1-萘酯;1-乙萘基酯;α-乙萘酯;1-萘基乙酯
英文名称:α-Napthyl acetate
其他英文名称:1-Napthyl acetate
产品规格:CP,98%
包 装: 25克
CAS号:830-81-9
C12H10O2=186.21
级别:CP
含量:≥98.0%
熔点:47~49℃
度(以H+计)/(mmol/100g):≤1.65
乙溶解试验:合格
用途:生化研究。组织化学中测定酯的底物。有机合成
保存:RT,避光