详细介绍
中文名称:Annexin V-APC/PI细胞凋亡检测试剂盒
英文名称:
产品规格:50T|100T
发货周期:1~3天
细胞凋亡是细胞的基本特征之一,它在机体的胚胎发育、组织修复、内环境的稳定和一些疾病发生过程等方面起着十分重要的作用。 |
在正常细胞中,磷脂酰丝氨酸(PS)只分布在细胞膜脂质双层的内侧,而在细胞凋亡早期,细胞膜中的磷脂酰丝氨酸(PS)由脂膜内侧翻向外侧。在体内,巨噬细胞可以识别翻转到细胞膜表面的PS 从而将这些程序性死亡的细胞清除,因此凋亡过程中并不伴随局部的炎症反应,而在细胞坏死的过程中则常常伴随着炎症反应。
AnnexinⅤ是一种分子量为35-36kD的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白,能与细胞凋亡过程中翻转到膜外的PS 高亲和力特异性结合。PS 外翻发生在细胞核破裂,DNA 片段化以及凋亡相关蛋白出现之前,这使得Annexin V 与PS的结合成为凋亡早期的一种重要检测标志事件。
检测原理:
在正常的活细胞中,磷脂酰丝氨酸(phosphotidylserine,PS)位于细胞膜的内侧,但在早期凋亡的细胞中,PS 从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的表面,暴露在细胞外环境中。
Annexin-Ⅴ能与PS 高亲和力结合??赏ü赴獠啾┞兜牧字K堪彼嵊氲蛲鲈缙谙赴陌そ岷稀S帽昙橇薃PC的AnnexinⅤ作为荧光探针,利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡的发生。细胞坏死的过程中也会发生细胞膜损伤,坏死的细胞会结合Annexin V-APC。
Annexin V-APC 通常与细胞膜非渗透性核酸荧光染料联合使用以检测凋亡细胞。常用的染料是PI。正常细胞和早期凋亡细胞的细胞膜是完整的,核酸染料PI 不能透过完整的细胞膜,但在凋亡中晚期的细胞和坏死细胞,PI 能够透过细胞膜与细胞核结合呈现红色。
PI/Annexin V-APC试剂盒将Annexin Ⅴ与PI匹配使用,可以将凋亡早期的细胞和晚期的细胞以及死细胞区分开来。坏死细胞可以同时与Annexin V-APC和PI 结合显色,而PI 则被排除在活细胞(APC阴性)和早期凋亡细胞(APC阳性)之外。
Annexin V-APC 细胞凋亡检测试剂盒可以方便快捷的检测凋亡细胞,使用流式细胞仪、荧光显微镜或其它荧光检测设备进行检测。
储存条件:染色液2-8℃避光保存;结合液2-8℃保存;
注意事项:
1、本试剂盒仅供科学研究使用,不可用于诊断或治疗。
2、螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖和管内壁上的液体离心至管底,避免开盖时试剂损失。
3、禁止与其他品牌的试剂混用,否则会影响使用效果。
4、样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。
5、最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿,可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并*清除残留清洁剂。
6、避免皮肤或粘膜与试剂接触。
7、需长时间保存可-20℃避光保存。避免反复冻融,否则将会增加空白吸收,从而影响检测结果。最好小剂量分装,用避光袋或是黑纸、锡箔纸包住避光。
8、用培养基或 PBS 来配制待检测药物。如果待测药物有还原性,则测定不含细胞,仅含有 MTS 的待测药物溶液在 490 nm处的空白吸光度。如果该吸光度很小,则可以直接加入 MTS ,如果吸光度相对较大,则需要除去培养基,并用新鲜培养基洗涤细胞两次,然后加入新的 100 μl 培养基和 10 μl MTS 进行检测。
9、细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。
10、加 MTS 溶液后孵育时间的长短根据细胞的类型和细胞的密度等实验情况而定,对于大多数情况孵育 1 小时即可,白细胞需要培养较长时间。
11、如果不是使用 96 孔板检测,MTS 溶液的用量相应等比例增加即可。
操作规程:
1、在96孔板加入细胞00μL/孔,通常细胞增殖实验每孔加入00微升2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入00微升5000~0000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2、.加入适当浓度的0~0μL 受试化合物。
3、将96孔板在37℃,含5% CO2空气及00%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4、将5×MTT 用稀释液稀释成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小时,使MTT 还原为甲臜。
6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板摇床摇匀。
7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度(如无570nm 滤光片,可以使用560-600nm 的滤光片)。
8、结果分析
a、细胞的存活率:将各测试孔的OD 值减去本底OD 值(*培养基加MTT,无细胞)或空白药物孔OD 值(*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT,无细胞),各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示,T 为加药细胞的OD 值,C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 0%时的药物浓度(IC90)
依泽替米贝;依折麦布英文名称: Meloxicam卷曲螺旋结构域蛋白51抗体包装5g
右雷佐生;右亚英文名称: Memantine HCl卷曲螺旋结构域蛋白125抗体包装1g
右雷佐生盐盐;右亚盐盐英文名称: Memantine hydrochloride卷曲螺旋结构域蛋白50抗体包装5g
左西孟旦英文名称: Methotrexate卷曲螺旋结构域蛋白90A抗体包装100mg
左旋地平/磺左旋地平英文名称: Methotrexate卷曲螺旋结构域蛋白71抗体包装100mg
Diabetes Research英文名称: Nimesulide卷曲螺旋结构域蛋白37抗体包装1g
MSDC-0160英文名称: Miconazole Nitrate卷曲螺旋结构域蛋白47抗体包装5g
Phenformin hydrochloride英文名称: Miconazole Nitrate卷曲螺旋结构域蛋白17抗体包装1g
Sotagliflozin(LX4211)英文名称: Micronomicin Sulfate卷曲螺旋结构域蛋白58抗体包装25g
艾格列净;依帕列净;恩格列英文名称: Micronomicin Sulfate卷曲螺旋结构域蛋白94抗体包装5g
伏格列波糖英文名称: 4-MUG卷曲螺旋结构域蛋白82抗体包装1g
格列本脲英文名称: MinoxidilCDK5激活结合蛋白2抗体包装250mg
格列吡英文名称: MinoxidilCDK2相互作用蛋白抗体包装5g
格列喹酮英文名称: Minoxidil Sulfate周期蛋白依赖性激14抗体包装1g
格列美脲英文名称: Minoxidil Sulfate癌胚抗原相关粘附分子19抗体包装5g
: AS4.273资源名称: 产色链霉菌 质量规格:>99.0%血血小板衍生生长因子AB试剂盒银杏内酯B;Ginkgolide B
成团泛菌Pantoea│agglomerans 质量规格:HPLC>98%,标准品血小板因子3试剂盒异钩藤碱;Isorhychophylli
: Bt0219资源名称: 苏云金芽胞杆菌 质量规格:>98.5%,BR血小板衍生生长因子CC试剂盒银杏内酯A;Ginkgolide A
Annexin V-APC/PI细胞凋亡检测试剂盒氧化铈
其他 二氧化铈;氧化高铈;玻璃白;铈土;氧化铈(IV)
英文名称: Cerium(IV) oxide
其他英文名称: Cerium dioxide;Ceria
产品规格: 4N
包装:100克
产品规格: 3.5N
包装:250克
CAS号:1306-38-3
CeO2=172.11
级别:4N
含量:≥99.99%
其他稀土族:≤0.05%
级别:3.5N
含量:≥99.95%
性状:纯品为重质粉末或立方体结晶,不纯品为浅黄色甚至粉红色至红棕色(因含有微量镧、镨等)。几乎不溶于水和。相对密度7.3。熔点1950℃。有毒,半数致死量(大鼠,经口)约1g/kg。。
用途:生化研究。氧化剂。有机反应催化剂。钢铁分析作稀土金属标样。氧化还原滴定分析。脱色玻璃。玻璃搪瓷遮光剂。耐热合金。
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