化工仪器网
详细介绍
参数规格：
产品货号：FS-02R6688
产品规格：48T 0.1PCR管
产品分类：小宗农产品检测系列（Gm9）PCR-荧光探针法
产品运输：低温运输
实验过程：
一、试剂准备 1. DNA模板 2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物） 3．10×PCR Buffer 4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5．Taq酶 | 二、操作步骤 1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1（10pM） 2μl 引物2（10PM） 2μl Taq酶（2U/μl） 1μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。 2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。 3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。 4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。 |
注意事项
1.公司产品仅用于科研整个检测过程应严格按照本说明书要求分别在试剂准备区、样本处理区和PCR扩增区进行操作，各区实验服、仪器、耗材应独立使用，不能混用；实验用吸头采用带滤芯吸头；样本处理区应配有生物安全柜，样本处理在生物安全柜中进行操作；三个区应该配有紫外线杀菌装置。
2.为避免RNA降解，样本处理过程应在0-4℃条件下操作，且完成实验后立即上机检测；样本处理过程中使用的器具耗材应经过无核酶处理。
3.每次实验应该设置阴、阳性对照。
4.试剂盒所有试剂在使用前应该在常温下充分融化混匀，并应瞬时离心。
5.试剂盒内所配阴性和阳性对照在第一次使用前应全部转移至标本准备区，并单独存放。
6.为防止荧光干扰，应避免裸手直接接触PCR反应管，并应避免在PCR反应管上进行任何标记。
7.仪器扩增相关参数应按照本说明书相关要求进行设置；不同批号试剂不能混用。
8.ABI系列荧光定量PCR仪参数设置中不选ROX校正，淬灭基因选择None。
9.实验过程中产品的废弃物应该进行无害化处理后方可丢弃。
操作流程:
1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2.设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；
3.样本孔中加入待测样本50μL；空白孔不加。
4.除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5.弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液（350μL），静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。
6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7.每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。
GHRP-Ghrelin ELISA Kit 大鼠生长释放肽ghrelinMulti-class antibodies： 96T
TIMP-3 金属蛋白组织抑制因子-3抗体Multi-class antibodies： 0.1ml
Rhesus antibody Rh Glutamine synthetase/GLUL/GS 谷氨酰胺合成/谷氨连接抗体 0.1ml
Gzms-B ELISA Kit 大鼠颗粒B 96T
NR5A2/LRH1 成纤维细胞核受体Nr5a2抗体 0.2ml
ARSA 芳基酯A抗体 0.2ml
TIMP-3 金属蛋白组织抑制因子-3抗体Multi-class antibodies： 0.1ml
I CTP(Human Cross-linked Carboxy-terminal telopeptide of type I collagen) ELISA Kit 人Ⅰ型胶原交联羧基末端肽Multi-class antibodies： 48T
HSL/LIPE 敏感脂肪抗体Multi-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh MATR3/Matrin 3 核基质蛋白3抗体 0.1ml
MAO(Human monoamine oxidase) ELISA Kit 人单胺氧化 96T
RECK 金属蛋白抑制因子RECK抗体 0.2ml
C5orf55 5号染色体开放阅读框55抗体 0.2ml
HSL/LIPE 敏感脂肪抗体Multi-class antibodies： 0.2ml
Rabbit horse IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488标记的兔抗马IgG 0.1ml
GAPDH 3-磷甘油脱氢 0.1ml
Rhesus antibody Rh AKAP95/AKAP8 蛋白激A锚定蛋白95抗体 0.1ml
Phospho-Lamin A/C (Ser22) /FITC 荧光标记磷化核纤层蛋白A/C抗体IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Goat IgM/HRP 辣根过氧化物标记的兔抗羊IgM 0.1ml
Sox2/FITC 荧光标记胚胎干细胞关键蛋白抗体IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
油菜内源基因核酸检测试剂盒48T 0.1PCR管8-异构前列腺F2α（8-epi-PGF2α）elisa检测试剂盒
豚鼠葡萄糖转运蛋白2（GLUT2）elisa检测试剂盒
大鼠胰脂肪（PL）elisa检测试剂盒
大鼠骨成型蛋白2（BMP-2）elisa检测试剂盒
大鼠血管内皮生长因子（VEGF）elisa检测试剂盒
大鼠脂联（ADP/Acrp30）elisa检测试剂盒
睾酮（T）elisa检测试剂盒
脂氧A4（LXA4）elisa检测试剂盒
豚鼠钙调磷结合蛋白1（CABIN1）elisa检测试剂盒
豚鼠核因子-κB亚基p65（NF-κB p65）elisa检测试剂盒
豚鼠凝集样氧化低密度脂蛋白受体1（LOX-1）elisa检测试剂盒
大鼠AMPA离子能谷受体1（GRIA1）elisa检测试剂盒
大鼠白介1α（IL-1α）elisa检测试剂盒
大鼠骨?；ぃ?/span>OPG）elisa检测试剂盒
大鼠B瘤因子2（BCL-2）elisa检测试剂盒
化工仪器网