详细介绍
组织来源:颅骨组织
种属来源:大鼠
细胞简介:大鼠成骨细胞分离自颅骨组织;颅骨位于脊柱上方,由23块形状和大小不同的扁骨和不规则骨组成。除下颌骨及舌骨外,其余各骨彼此借缝或软骨牢固连结,起着?;ず椭С帜?、感觉器官以及消化器和呼吸器的起始部分的作用。颅分脑颅和面颅两部分。脑颅位于颅的后上部,内有颅腔,容纳脑,共8块。面颅为颅的前下部分,包含眶、鼻腔、口腔等结构,构成面部的支架,共15块。成骨细胞是骨形成的主要功能细胞,负责骨基质的合成、分泌和矿化。骨不断地进行着重建,骨重建过程包括破骨细胞贴附在旧骨区域,分泌酸性物质溶解矿物质,分泌蛋白酶消化骨基质,形成骨吸收陷窝;其后,成骨细胞移行至被吸收部位,分泌骨基质,骨基质矿化而形成新骨;破骨与成骨过程的平衡是维持正常骨量的关键。成骨细胞培养不仅有助于了解骨形成机制、骨骼系统疾病的分子和细胞学基础,也是药物筛选、生物材料开发和生物工程研究的重要手段。
培养基:含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:梭形、多角形
传代特性:可传5代左右;3代以内状态佳
消化液:0.25%胰dan白酶
培养条件:气相:空气,95%;CO2,5%
传代比例:1:2
一、细胞基本属性
产品名称 | 产品规格 | 商品货号 |
大鼠成骨细胞 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | A01X1647 |
二、细胞培养状态
发货时发送细胞电子版照片
三、使用方法
大鼠成骨细胞是一种贴壁细胞,细胞形态呈梭形、多角形,在技术部标准操作流程下,细胞可传2-3代;建议您收到细胞后尽快进行相关实验。
客户收到细胞后,请按照以下方法进行操作。
1. 取出T25细胞培养瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。
2. 贴壁细胞消化
1)吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;
2)添加0.25%消化液1mL至T25培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余消化液,37℃温浴1-3min;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml培养基终止消化;
3)用吸管轻轻吹打混匀,按传代比例接种T25培养瓶传代,然后补充新鲜的培养基至5mL,置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养;
4)待细胞贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的培养基。
3. 细胞收货脱落
1)收集所有细胞悬液,1000rpm,离心5min,保留沉淀;
2)添加0.25%消化液0.5mL至离心管中,重悬沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱静置5-7min);消化完向离心管内加入5ml培养基终止消化;
3)经1000rpm,离心5min,丢弃上清,用5ml培养基重悬沉淀,接种于新的培养瓶内;
4)待细胞贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的培养基(37℃预热)。
5)原瓶内贴壁细胞按正常消化处理。
4. 细胞实验
因原代细胞贴壁特殊性,贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿(如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等)时,需要对实验器皿进行包被,以增强细胞贴壁性,避免细胞因没贴好影响实验;包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚赖氨酸PLL(0.1mg/ml),明胶(0.1%),依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。
公司正在出售的产品:
人肝内胆管上皮细胞 | 人牙周膜干细胞 |
蛋白体PSMα1重组兔单克隆抗体 | B淋巴细胞生发中心相关蛋白抗体 |
人脾外周血单个核细胞 | 甘肽硫转移ω1/glutathione S transferase Omega 1抗体 |
人脾成纤维细胞 | 磷化磷神经膜抗体 |
人脾小梁平滑肌细胞 | Dab2相互作用蛋白抗体 |
人骨髓巨噬细胞 | 细胞周期蛋白依赖性激抑制剂2C抗体 |
人外周血间充质干细胞 | Noxa蛋白抗体 |
人CIK细胞 | 周期K抗体 |
人脾脏单核细胞 | 原钙粘蛋白1抗体 |
人外周血巨噬细胞 | 磷化生肌决定因子Myf5抗体 |
人脾脏微血管内皮细胞 | 羧肽X(M14家族2)抗体 |
人Treg细胞 | 大鼠成骨细胞含亮氨神经胶质瘤失活蛋白4抗体 |
人淋巴结成纤维细胞 | DSCC1蛋白抗体 |
人骨髓肥大细胞 | 芳基磺基转移1抗体 |
人牙龈干细胞 | 免疫球蛋白超家族成员3抗体 |
四、注意事项
1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。
3. 传代培养过程中,消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和技术部沟通;由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,详尽告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。