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小鼠ELISA試劑盒組成結構的方法
閱讀：203 發(fā)布時間：2020-11-4小鼠ELISA試劑盒原理：
采用競爭法測定金黃地鼠氧化低密度脂蛋白OXLDL水平。用金黃地鼠氧化低密度脂蛋白OXLDL抗原包被微孔板，制成固相載體，實驗時依次在微孔板中加入標本及標準品，并加入HRP標記的OXLDL抗體，標本及標準品中的抗體和一定量的酶標抗體競爭與固相抗原結合。反復洗滌后加底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化為藍色，再用硫酸終止反應，轉變成黃色。標本中抗體量越多，結合在固相上的酶標抗體愈少，顏色越淺。顏色的深淺和樣品中的OXLDL含量呈負相關。采用酶標儀在450nm波長測定吸光度（OD值），根據(jù)標準曲線，計算測試樣品中OXLDL濃度。
小鼠ELISA試劑盒安全性：
1. 避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。
2. 實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
4. 試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。
5. 實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
6. 不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同小鼠ELISA試劑盒批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
7. 使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。
8. 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
9. 洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
10. 底物A應揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
11. 加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
12. 按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
小鼠ELISA試劑盒組成結構：
一、血清：操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱量和肉毒素的試管。收集血液后，1000*g離心10分鐘將血紅細胞迅速小心的分離。
二、血漿：EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
三、細胞上清液：1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
四、 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液。
五、 保存：如果樣品不立即使用，應將其分成小部分-70℃保存，避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。