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小鼠滋養(yǎng)層干原代細胞
小鼠滋養(yǎng)層干細胞分離自胎盤組織；胎盤（placenta）是哺乳動物妊娠期間由胚胎的胚膜和母體子宮內(nèi)膜聯(lián)合長成的母子間交換物質(zhì)的過渡性器官，由羊膜、葉狀絨毛膜和底蛻膜構(gòu)成。胎兒在子宮中發(fā)育，依靠胎盤從母體取得營養(yǎng)，而雙方保持相當(dāng)?shù)莫毩⑿浴ＬケP還產(chǎn)生多種維持妊娠的激素，是一個重要的內(nèi)分泌器官。有些爬行類和魚類也以胎生方式繁殖后代，胚胎生長出一些輔助結(jié)構(gòu)如卵黃囊、鰓絲等與母體組織緊密結(jié)合，以達到母子間物質(zhì)的交換，這樣的結(jié)構(gòu)稱假胎盤。滋養(yǎng)層干細胞是胎盤組織細胞的祖細胞，與胚胎著床和胎盤的形成密切相關(guān)。胚胎著床和胎盤形成是母體與胎兒建立聯(lián)系的關(guān)鍵時期，此時期滋養(yǎng)層細胞增殖速度快，滋養(yǎng)層干細胞自我更新和分化旺盛，與多種妊娠相關(guān)疾病的發(fā)生、發(fā)展及其增殖、功能調(diào)節(jié)的失常有密切關(guān)系。在哺乳動物胚胎發(fā)育過程中，胚胎細胞第一次分化形成內(nèi)細胞團和滋養(yǎng)外胚層。滋養(yǎng)層干細胞是胎盤細胞的前體細胞，在胎盤發(fā)育中有重要作用。
英文名稱 | Mouse Trophoblast Stem Cells | 組織來源 | 胎盤組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7444 |
細胞形態(tài) | 成纖維細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：小鼠滋養(yǎng)層干細胞
組織來源：胎盤組織
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳2-3代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
方法簡介
公司實驗室分離的小鼠滋養(yǎng)層干采用囊胚組織貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的小鼠滋養(yǎng)層干經(jīng)HLA-E（白細胞抗原）免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
1）復(fù)蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
COS-7L, 非洲綠猴腎成纖維細胞 人癌細胞，MCF7細胞 PT67(小鼠逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝細胞) | 核糖體RNA合成蛋白40抗體 |
VAMP1囊泡相關(guān)膜蛋白1抗體 | 細胞外信號調(diào)節(jié)激酶5抗體 |
梅克爾-格魯伯綜合征相關(guān)蛋白抗體 | 淀粉結(jié)合域蛋白1抗體 |
病樣蛋白3抗體 | 清道夫脫帽酶/熱休克蛋白1抗體 |
血管緊張素Ⅱ受體相關(guān)蛋白抗體 | 鉀電壓閥門通道混合器相關(guān)亞家族成員7抗體 |
人侵襲性脈絡(luò)膜黑色素瘤細胞;C918 | 人胎盤絨膜癌細胞;BeWo |
HCC-9724細胞，人肝癌細胞 小鼠肥大細胞癌細胞,P815細胞 牛腎細胞;MDBK | MDCK(犬腎細胞) 5×106cells/瓶×2 |
人支氣管上皮細胞RNAHBEpiC miRNA5 μg | M1(小鼠白血病細胞) 5×106cells/瓶×2 |
CL-0347HCC38(人導(dǎo)管癌細胞)5×106cells/瓶×2 | 人干細胞因子單克隆抗體細胞株;AMS2(SCF3) |
BIU-87細胞，人膀胱癌細胞 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染了neor和LIF基因的STO細胞株,SNL細胞 CSC, 小鼠心肌細胞 | 小鼠滋養(yǎng)層干原代細胞淀粉結(jié)合域蛋白1抗體 |
A673(人橫紋肌瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 | VEGFA Others Human 人 / 食蟹猴 VEGF / VEGFA / VEGF165 人細胞裂解液 (陽性對照) |
COLO 205人結(jié)腸癌細胞 COLO 205 human colon cancer cells 1640+10% FBS | 人臍靜脈內(nèi)皮細胞HUVEC |
表皮角化細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | 調(diào)亡誘導(dǎo)因子6相互作用蛋白/多巴胺受體相互作用蛋白4抗體 |
鈣調(diào)酸酶調(diào)節(jié)蛋白2抗體（唐氏綜合征候選區(qū)域蛋白1樣蛋白2） | 獼猴肌肉細胞;MMm7 |
原鈣粘附蛋白α8抗體 | 丙型肝炎病毒-NS3反轉(zhuǎn)錄激活蛋白2抗體 |
類狀瘤病毒16-E7抗體 | 人侵襲性脈絡(luò)膜黑色素瘤細胞;C918 |
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