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詳細(xì)介紹
小鼠陰道上皮原代細(xì)胞
小鼠陰道上皮細(xì)胞分離自陰道組織；陰道位于膀胱、尿道和直腸之間，是一個(gè)富有彈性的管狀器官。它在人類生殖過(guò)程中具有多種生理功能，是連接子宮與外陰的通道，是排出月經(jīng)血、娩出嬰兒的必經(jīng)之路，也是一個(gè)重要的性交器官。陰道壁按組織學(xué)由外到內(nèi)分三層，即黏膜層、肌層和外膜，陰道黏膜是外層，也就是淺表的那一層，相當(dāng)于皮膚的外面層一樣。陰道上皮呈粉紅色，表面為復(fù)層鱗狀上皮，但無(wú)角化層。在正常的月經(jīng)周期中，陰道上皮脫落的上皮細(xì)胞的形態(tài)隨著卵巢內(nèi)分泌的變化而改變，因此通過(guò)陰道脫落上皮的病理檢查便可以初步判斷卵巢的內(nèi)分泌功能狀況。陰道粘膜是指陰道內(nèi)壁分泌的保持陰道內(nèi)壁表面濕潤(rùn)，保持表面活力的粘液膜層，因?yàn)槠浔砻娑嗾吵?，故為粘膜。在卵泡期，陰道粘膜受雌激素作用，上皮增厚，表皮?xì)胞角化；陰道上皮細(xì)胞內(nèi)糖原豐富（注：陰道粘膜上皮是復(fù)層扁平上皮又名“復(fù)層鱗狀上皮"），在陰道桿菌作用下分解為乳酸，保持陰道的酸性環(huán)境；排卵后，受孕激素作用，陰道粘膜上皮大量脫落，角化現(xiàn)象消失。
英文名稱 | Mouse Vaginal Epithelial Cells | 組織來(lái)源 | 陰道 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號(hào) | YS-01X8544 |
細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 | 生長(zhǎng)特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：小鼠陰道上皮細(xì)胞
組織來(lái)源：陰道
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
包被條件：鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基：基礎(chǔ)培養(yǎng)基，含FBS、EGF、Hydrocortisone、腎上腺素、甲狀腺素、Insulin、Transferrin、Selenium Solution、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
傳代特性：可傳1-2代
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
小鼠陰道上皮細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
方法簡(jiǎn)介
實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠陰道上皮采用 - 膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法，并通過(guò)上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)
實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠陰道上皮經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個(gè)瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時(shí)間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。
人真皮成纖維細(xì)胞-胎兒總RNAHDF-f NA | IQCC蛋白抗體 |
0脂轉(zhuǎn)移蛋白抗體 | 1號(hào)染色體開放閱讀框25抗體 |
埃茲蛋白抗體 | 有絲分裂阻滯缺陷2樣蛋白1抗體 |
CD23/FcεRII抗體 | DPY19L2蛋白抗體 |
肉毒堿O-乙?；D(zhuǎn)移酶 | 附睪分泌蛋白4抗體 |
KIT Others Rat 大鼠 KIT / c-KIT 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) | HAoAF-c 人主動(dòng)脈外膜成纖維細(xì)胞(HAoAF) 500,000cells 腎動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) |
腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | AIM2 Others Human 人 AIM2 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
CD226 Others Mouse 小鼠 DNAM-1 / CD226 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) | CN3 Others Mouse 小鼠 Coactin 3 / CN3 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
PDGFRA Others Human 人 PDGFRa / CD140a 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) | HAoEC Pellet 人主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞團(tuán)塊 > 1 mio.cells 尿道上皮細(xì)胞生長(zhǎng)添加物UCGS |
CL-0459U14(小鼠子細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 | 小鼠陰道上皮原代細(xì)胞有絲分裂阻滯缺陷2樣蛋白1抗體 |
大鼠海馬趾星形膠質(zhì)細(xì)胞(RAh)(5×105) ACHN, 人腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞 Human | MDA-MB-435S 人導(dǎo)管癌細(xì)胞 |
EPO Protein Rat 重組大鼠 Erythropoietin / EPO 蛋白 (His 標(biāo)簽) | 猴脈絡(luò)膜-視網(wǎng)膜(內(nèi)皮)細(xì)胞;RF/6A 膠質(zhì)瘤細(xì)胞，SHG44細(xì)胞 RD(惡性胚胎橫紋肌瘤細(xì)胞) |
大鼠黑質(zhì)細(xì)胞(RNsn)(1×106) | 22號(hào)染色體開放閱讀框36抗體 |
含賴卷曲螺旋蛋白1抗體 | PIEC(豬髖動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞 ) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 CD10 / Neprilysin / MME 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
整合素樣金屬蛋白酶與樣3蛋白抗體 | 肽Y受體4抗體 |
半乳糖腦苷脂酶抗體 | KIT Others Rat 大鼠 KIT / c-KIT 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
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