詳細介紹
小鼠胰腺上皮原代細胞
小鼠胰腺上皮細胞分離自胰腺組織;胰腺分為外分泌腺和內分泌腺兩部分。外分泌腺由腺泡和腺管組成,腺泡分泌胰液,腺管是胰液排出的通道。胰液中含有、原、脂肪酶、等。胰液通過胰腺管排入十二指腸,有消化蛋白質、脂肪和糖的作用。內分泌腺由大小不同的細胞團──胰島所組成,胰島主要由4種細胞組成:α細胞、β細胞、γ細胞及PP細胞。α細胞分泌胰高血糖素,升高血糖;β細胞分泌胰島素,降低血糖;γ細胞分泌,以旁分泌的方式抑制α、β細胞的分泌;PP細胞分泌胰多肽,抑制胃腸運動、胰液分泌和膽囊收縮。胰腺干細胞在發(fā)育上被認為分離自內胚層胰腺上皮,在隨后的胰腺發(fā)育過程中,胰腺干細胞分化為胰島細胞(α、β、δ、PP細胞)、導管上皮細胞以及腺泡細胞。胰腺組織中還存在大量的間充質來源的細胞,包括成纖維細胞、血管內皮細胞、血管平滑肌細胞以及星形細胞,其中以成纖維細胞占主要部分。要離體分離培養(yǎng)獲得胰腺上皮細胞就要排除間充質來源的細胞,尤其是成纖維細胞。目前常用的去除成纖維細胞方法有機械刮除法、消化以及膠原酶消化法等,胰腺上皮細胞的病變與急慢性胰腺炎的發(fā)生具有重大意義。
英文名稱 | Mouse Pancreatic Epithelial Cells | 組織來源 | 胰腺組織 |
產品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產品貨號 | YS-01X7090 |
細胞形態(tài) | 上皮細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產品名稱:小鼠胰腺上皮細胞
組織來源:胰腺組織
產品規(guī)格:5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
方法簡介
公司實驗室分離的小鼠胰腺上皮采用膠原酶分次消化法并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
公司實驗室分離的小鼠胰腺上皮經(jīng)Cytokeratin-19免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
CL-0110HL-60(人早幼粒急性白血病細胞)5×106cells/瓶×2 | 核酸內切酶G抗體 |
T細胞和嗜酸性粒細胞表達特應性皮炎蛋白ETEA抗體 | 細胞死亡調節(jié)蛋白抗體(凋亡、半胺酸蛋白酶激活抑制劑) |
錨蛋白重復結構域蛋白50抗體 | 電壓門控性鉀通道蛋白Kv4.2抗體 |
元突觸膜結合蛋白2抗體 | 親環(huán)蛋白(親環(huán)素)PPIG抗體 |
血管活性腸肽抗體 | 甲狀腺激素受體相關蛋白3抗體 |
人羊膜間充質基質細胞 | 大鼠主動脈內皮細胞培養(yǎng)基 100mL |
PC-12(高分化)大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞(高分化) PC-12 (high differeiation) rat pheochromocytoma cells (high differeiation) RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS | IFNA8 Protein Human 重組人 Ierferon alpha-B / IFNA8 蛋白 (His 標簽) |
人肝內膽管上皮細胞RNAHIBEpiC miRNA5 μg | HO-8910PM(人高轉移卵巢癌細胞) 5×106cells/瓶×2 |
C2C12 小鼠成肌細胞 | SW1116(人結腸腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 |
5637(HTB-9)細胞,人膀胱癌細胞 大鼠肝癌細胞(癌細胞接種到肝臟成瘤),Walker-256細胞 MLF, 小鼠淋巴成纖維細胞 | 小鼠胰腺上皮原代細胞電壓門控性鉀通道蛋白Kv4.2抗體 |
P19 小鼠畸胎瘤細胞 | F3 Others Rat 大鼠 Coagulation Factor III / Tissue Factor / CD142 人細胞裂解液 (陽性對照) |
SH-SY5Y細胞,人上皮瘤細胞 雷氏菌 人肝細胞RNAHH miRNA5 μg | 人脂肪間充質干細胞HMSC-ad |
表達小鼠MHCⅠ類分子Kb的人胚腎細胞;293KB | 特異性囊腫病液體蛋白15抗體 |
鈣腔蛋白 | 恒河猴腎細胞;MMK3 |
原鈣粘附蛋白12/血管內皮鈣粘蛋白2抗體 | 丙肝病毒核心抗原C區(qū)抗體 |
類固醇5α還原酶2抗體 | 人羊膜間充質基質細胞 |