詳細(xì)介紹
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,不直接用于食品、藥品、臨床或動(dòng)物的診斷或治療!
細(xì)胞屬性:
方法簡介
實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠牙周膜干采用膠原酶消化結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠牙周膜干經(jīng)CD44免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 小鼠牙周膜干原代細(xì)胞 | 組織來源 | 牙周膜 |
英文名稱 | Mouse Periodontal Ligament Stem Cells | 貨號(hào) | YS-01X8078 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) |
細(xì)胞簡介:
小鼠牙周膜干細(xì)胞分離自牙周膜組織;牙周膜(牙周韌帶、牙周間隙)是由致密結(jié)締組織所構(gòu)成。多數(shù)纖維排列成束,纖維的一端埋于牙骨質(zhì)內(nèi),另一端則埋于牙槽窩骨壁里,使牙齒固位于牙槽窩內(nèi);牙周膜內(nèi)有、血管、淋巴和上皮細(xì)胞等。成纖維細(xì)胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來。間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stem cells,MSCs)來源于胚胎時(shí)期的中胚層組織,具有很強(qiáng)的自我復(fù)制和多向分化潛能,具有向脂肪細(xì)胞、成骨細(xì)胞、軟骨細(xì)胞及肌細(xì)胞等多種終末細(xì)胞定向分化的能力,運(yùn)用 MSCs來修復(fù)軟骨損傷具有很好的應(yīng)用前景,目前已能夠從骨髓、脂肪、滑膜、骨骼、肌肉等組織以及羊水、臍帶、臍帶血中分離和制備間充質(zhì)干細(xì)胞。牙周膜干細(xì)胞參與了牙周組織的病變、修復(fù)及再生過程?,F(xiàn)在,利用牙周膜干細(xì)胞建立體外模型,已經(jīng)成為有關(guān)員研究牙周組織疾病的重要手段。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基:含FBS、EGF、bFGF、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):成纖維細(xì)胞樣
傳代特性:可傳2-3代左右
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
小鼠牙周膜干細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞培養(yǎng)方法:
1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個(gè)瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時(shí)間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。
操作步驟:
1.將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中,將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片,待細(xì)胞長至80%時(shí)取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應(yīng)的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染:用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍(lán)。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側(cè),再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),以免產(chǎn)生氣泡,封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
公司產(chǎn)品:
人真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞cDNAHDMEC cDNA | 酸化白細(xì)胞介素-7受體a抗體 |
環(huán)指蛋白3抗體 | 富含半分泌蛋白3抗體 |
非受體性蛋白酪激酶ETK抗體 | 酸化絲/蘇蛋白激酶MARK2抗體 |
巨噬細(xì)胞炎癥蛋白-1γ抗體 | 雙特異性蛋白酸酶7抗體 |
酸化細(xì)胞表面趨化因子受體2抗體 | 同源異型盒基因HLX1蛋白抗體 |
HDAC8 Others Mouse 小鼠 HDAC8 / HDACL1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | KNG1 Others Human 人 KNG1 / BDK / Kininogen-1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
腦靜脈血管平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml) | FCGR2B Others Human 人 CD32b / FCGR2B 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
BHK-21(倉鼠腎細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CM-M022小鼠甲狀腺上皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL 人B淋巴細(xì)胞瘤細(xì)胞;RAMOS | WARS Others Human 人 WARS / pRS 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
Gibco 17001-074 TM-C100 Basal Medium,liquid 450ml | SMPD1 Others Human 人 SMPD1 / ASM 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
CM-H006人肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基100mL | 小鼠牙周膜干原代細(xì)胞酸化絲/蘇蛋白激酶MARK2抗體 |
FCGR2B Others Cynomolgus 食蟹猴 CD32b / FCGR2B 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | CCL1 Protein Human 重組人 I-309 / CCL1 / TCA-3 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) |
人導(dǎo)管瘤細(xì)胞;BT-474 | 人脈絡(luò)絲內(nèi)皮細(xì)胞 (HCPEC)( 5×105 ) 人臍動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞 Raji,人Butt's淋巴瘤細(xì)胞 |
C8-D1A細(xì)胞,鼠小腦細(xì)胞 NCI-H1755 [H1755](人肺癌細(xì)胞) 恒河猴肺細(xì)胞;RM-L1 | 6型膠原蛋白α5抗體 |
腦海綿狀血管畸形蛋白1抗體 | IFNB1 Others Mouse 小鼠 IFNB1 / IFN-beta / Ierferon beta 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
整合素樣金屬蛋白酶與8型抗體 | 特異性轉(zhuǎn)錄因子DPF1抗體 |
糖0脂酰肌醇錨定蛋白137抗體 | HDAC8 Others Mouse 小鼠 HDAC8 / HDACL1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |