詳細(xì)介紹
兔原代細(xì)胞
產(chǎn)品名稱(chēng) | 兔細(xì)胞 | 組織來(lái)源 | 詳見(jiàn)說(shuō)明 |
英文名稱(chēng) | 詳見(jiàn)說(shuō)明 | 貨號(hào) | X0005 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) |
1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個(gè)瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時(shí)間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)夜)。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類(lèi);
1. 細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細(xì)胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
A498細(xì)胞,人腎癌細(xì)胞系 蝙蝠肺細(xì)胞,Tb 1 Lu細(xì)胞 CL-0430RS1(大鼠皮膚成纖維樣細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 | 核纖層蛋白A識(shí)別因子抗體 |
X射修復(fù)交叉互補(bǔ)蛋白抗體 | 細(xì)胞粘附分子3抗體(脊髓灰質(zhì)炎受體相關(guān)蛋白3) |
免疫球蛋白超家族成員21抗體 | 凋亡細(xì)胞清除受體抗體 |
生發(fā)中心B淋巴細(xì)胞相關(guān)蛋白2抗體 | 趨化素樣因子超家族成員1抗體 |
血管生成素3/血管生成素4抗體 | 假定腫瘤抑制亮拉鏈蛋白1抗體 |
EA.hy926(人臍靜脈細(xì)胞融合細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 | LX-2 人肝星形細(xì)胞 |
中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);DUKXB11 carrying pDEF202-hTPO-P1 | HCT116, 人結(jié)直腸癌細(xì)胞 |
小鼠肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL | IL36A Protein Human 重組人 IL1F6 / IL36A 蛋白 (His 標(biāo)簽) |
人胚肺二倍體細(xì)胞;KMB-17 | PC-3M(人前列腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 |
293-mTLR5 人胚腎細(xì)胞 Human embryonic kidney cell line 293-mTLR5 DMEM+10% FBS+10ug/ml Blasticidin | 兔原代細(xì)胞凋亡細(xì)胞清除受體抗體 |
CXCL16 Protein Canine 重組狗 CXCL16 / SR-PSOX 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) | HA Others H7N9 甲型流感 H7N9 (A/Hangzhou/1/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
HME6細(xì)胞,人黑色素瘤細(xì)胞 動(dòng)物雙歧桿菌 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0919 | 小鼠成骨細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL |
草魚(yú)腎細(xì)胞;GIK | 同源盒蛋白B6抗體 |
鈣轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗體 | CSF3 Protein Human 重組人 G-CSF / CSF3 蛋白 (isoform b) |
載脂蛋白A2抗體 | 補(bǔ)體C1S鏈多肽抗體 |
李斯特菌菌體蛋白抗體 | EA.hy926(人臍靜脈細(xì)胞融合細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 |