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小鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)前體原代細胞

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×10?
貨號 YS-01X7716 應用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 僅供科研實驗    
小鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)前體原代細胞公司出售的產(chǎn)品:大鼠原代冠狀動脈成纖維細胞 NCI-H446(人小細胞肺癌細胞) H1299 人肺癌細胞 1ml/T75 U266B1 [U266], 人多發(fā)性骨髓瘤細胞 Human RWPE-1 人正常前列腺上皮細胞 大鼠原代外周血白細胞

詳細介紹

小鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)前體原代細胞

小鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)前體原代細胞

小鼠少突膠質(zhì)前體細胞分離自腦皮層組織;大腦分左右兩個半球,大腦皮質(zhì)(灰質(zhì))覆蓋著每個大腦半球的大部分,它是元胞體集中的地方。內(nèi)部則是由纖維或髓鞘構(gòu)成的白質(zhì)。少突膠質(zhì)細胞分布于中樞系統(tǒng),在銀浸染標本中,少突膠質(zhì)細胞比星狀膠質(zhì)細胞小,其突起也較小而少,呈珠狀,故被稱為少突膠質(zhì)細胞或寡突膠質(zhì)細胞。少突膠質(zhì)細胞(oligodendrocyte)是中樞系統(tǒng)(CNS)的成髓鞘膠質(zhì)細胞,其發(fā)育要經(jīng)歷少突膠質(zhì)細胞祖細胞、前少突膠質(zhì)細胞祖細胞、未成熟和成熟少突膠質(zhì)細胞等階段。有學者將少突膠質(zhì)細胞按其發(fā)育程度和形態(tài)分為三型。但是,細胞發(fā)育是一個連續(xù)的過程,其形態(tài)、表達產(chǎn)物和功能的演變沒有嚴格的界限,因此,其分類是相對的。這三型分別為:Ⅰ型少突膠質(zhì)細胞又稱前O2Apre-O2A progenitor cell)。細胞呈圓形,表面光滑,直徑約3μm,體外混合培養(yǎng)時成簇生長在星形膠質(zhì)表面,具有很強的分裂增殖潛力,表達節(jié)苷脂GM1、波形蛋白和多唾液酸—粘附分子(polysialic acid-neural cell adhesion molecule,PSA-NCAM)等。Ⅱ型少突膠質(zhì)細胞胞體常有雙極或三極突起,極少數(shù)為單極突起,直徑約7μm,有一定的分裂增殖能力。體外培養(yǎng)時為雙潛能細胞,既可分化為少突膠質(zhì)細胞又可分化為Ⅱ型星形膠質(zhì),故又稱為少突膠質(zhì)細胞-Ⅱ型星形膠質(zhì)祖細胞(oligodendrocyte-type-2 astrocyte progenitor cell,O2A)。O2A除表達GM1和波形蛋白外還表達節(jié)苷脂GD3GQ(淋巴雜交瘤株A2B5產(chǎn)生GQ的抗體),故常用A2B5抗體標記O2A。Ⅲ型少突膠質(zhì)細胞不再具有分裂增殖能力,為分裂終期細胞。直徑約10μm。根據(jù)其形成髓鞘的能力,又分為不成熟的和成熟的兩類少突膠質(zhì)細胞。不成熟的OL胞體常伸出45條較粗大突起,表面還殘留有A2B5標記物,同時也表達O1-O4抗原,無形成髓鞘的能力。成熟的少突膠質(zhì)細胞突起有如蜘蛛網(wǎng),大量表達半乳糖腦苷脂(galactocerebro side,GC)、蛋白脂蛋白(proteio lipid protein,PLP)、髓鞘堿性蛋白(myelin basic protein,MBP)等,有對軸突髓鞘化的能力。體外培養(yǎng)的少突膠質(zhì)細胞前體細胞(簡稱少突膠質(zhì)細胞前體細胞)包括前O2AO2A和未成熟少突膠質(zhì)細胞,前兩者具有增殖能力。

英文名稱

Mouse   Oligodendrocyte Precursor Cells

組織來源

腦組織

產(chǎn)品規(guī)格

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

產(chǎn)品貨號

YS-01X7716

細胞形態(tài)

雙極、多極形

生長特性

貼壁

產(chǎn)品名稱:小鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)前體細胞

組織來源:腦組織

產(chǎn)品規(guī)格:5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

小鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)前體原代細胞

包被條件 PLL0.1mg/ml

培養(yǎng)基 含B-27 Supplement、PDGF、bFGF、Penicillin、Streptomycin

換液頻率 每2天半量換液1

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 雙極、多極形

傳代特性 不傳代,不增值,存活1-2

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%CO2,5%

方法簡介

公司實驗室分離的小鼠少突膠質(zhì)采用消化、混合細胞營養(yǎng)缺失培養(yǎng)、搖床振蕩結(jié)合差速貼壁法并通過專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×105cells/瓶。

質(zhì)量檢測

公司實驗室分離的小鼠少突膠質(zhì)前體經(jīng)A2B5免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

小鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)前體原代細胞小鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)前體原代細胞

1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;

②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;

③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;

④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;

⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2、細胞復蘇:

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補加適量培養(yǎng)基。

3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)

②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;

③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;

④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。

小鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)前體原代細胞

小鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)前體原代細胞

WERI-Rb-1人視網(wǎng)膜膠質(zhì)瘤細胞 WERI-Rb-1 human retinal glial cell RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS

核苷酸還原酶M2B抗體

TANC1蛋白抗體

嘧啶c氧化酶1抗體

 LDH細胞毒性檢測試劑盒LDH

蛋白質(zhì)酸酶1B抗體(PP2Cβ)

細胞膜糖蛋白M6a

前列腺相關(guān)P抗原家族成員1抗體

信號轉(zhuǎn)導功能0蛋白DAB2抗體

脊髓小腦共濟失調(diào)蛋白BEAN1抗體

VEGFA Protein Human 重組人 VEGF121 / VEGF-A 蛋白

食管上皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)

3T3 swiss細胞,swiss鼠胚胎成纖維細胞 人癌細胞,MB-271細胞

非洲綠猴腎細胞;CV-1

人真皮成纖維母細胞-新生HDF-n

MDA-MB-157(人癌細胞) 5×106cells/瓶×2

HuTu-80 人十二指腸腺癌細胞

IL1B Protein Human 重組人 IL-1 beta / IL1B 蛋白

RWPE-1細胞,人正常前列腺上皮細胞 小鼠B淋巴細胞雜交瘤細胞,SH3細胞 成纖維細胞培養(yǎng)基-2(用于心肌成纖維細胞)FM-2

小鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)前體原代細胞蛋白質(zhì)酸酶1B抗體(PP2Cβ)

MMQ 小鼠垂體瘤細胞

EPHB2 Others Human EphB2 / Hek5 (aa 570-987) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

MC-3T3細胞,小鼠前成骨細胞   LoVo(人結(jié)腸癌細胞) 兔眼Tenon's囊成纖維細胞;RYTF

人心肌細胞-HCM-a

艾氏腹水瘤瘤株;Ehrlich

碳酸酶7抗體

富含的酪激酶2抗體

COS-7(非洲綠猴SV40轉(zhuǎn)化的腎細胞) 5×106cells/瓶×2

原癌基因蛋白/活化蛋白1抗體

胞質(zhì)緊密粘連蛋白1抗體(閉鎖小帶蛋白1

酪蛋白激酶受體A10抗體

VEGFA Protein Human 重組人 VEGF121 / VEGF-A 蛋白

 

小鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)前體原代細胞

1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;

1. 細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。




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