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詳細介紹
本網(wǎng)站銷售的化學產(chǎn)品僅供科學研究或工業(yè)應用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！
細胞屬性：
方法簡介
公司實驗室分離的小鼠干采用消化后差速貼壁，結合干細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
公司實驗室分離的小鼠干經(jīng)Nestin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 小鼠神經(jīng)干原代細胞 | 組織來源 | 腦組織 |
英文名稱 | Mouse Neural Stem Cells | 貨號 | YS-01X7436 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
小鼠干細胞分離自腦皮層組織；大腦分左右兩個半球，大腦皮質（灰質）覆蓋著每個大腦半球的大部分，它是元胞體集中的地方。內(nèi)部則是由纖維或髓鞘構成的白質。每一個半球都有三個面，即外側面（約占整個皮質面積的1/3）、內(nèi)側面和底面（占2/3的面積）；半球表面有很多深淺不等的溝或裂，溝或裂之間的隆起叫回，它們大大增加了大腦的表面積；大腦外側面重要的溝、裂有大腦外側裂、頂枕裂和中央溝。由于三溝裂之界隔，使大腦皮質組分為額葉、頂葉、顳葉、枕葉四大部分。干細胞具有分化為元、星形膠質細胞和少突膠質細胞的能力，能自我更新，并足以提供大量腦組織細胞的細胞群。干細胞是一類具有分裂潛能和自更新能力的母細胞，它可以通過不對等的分裂方式產(chǎn)生組織的各類細胞。需要強調(diào)的是，在腦脊髓等所有組織中，不同的干細胞類型產(chǎn)生的子代細胞種類不同，分布也不同。干細胞作為干細胞的一種，它具有其它所有干細胞的基本特征：具有自我維持和自我更新能力，具有多種分化潛能，具有分化為本系統(tǒng)大部分類型細胞的能力，這種自我更新和分化潛能可以維持相當長的時間甚至終生，對損傷和疾病具有反應能力。干細胞在疾病、損傷狀態(tài)下具有增殖、遷移，并向細胞、星形膠質細胞和少突膠質細胞分化的能力，已成為系統(tǒng)損傷修復和再生研究的熱點，體外建立穩(wěn)定的干細胞培養(yǎng)模型是其基礎和臨床應用的前提。干細胞在培養(yǎng)3-4d后，可形成球，球在培養(yǎng)基中呈懸浮生長，予以更換半量培基，1周后用吸管輕柔吹打球形克隆成為小的球和單細胞懸液，將部分細胞接種到新的培養(yǎng)瓶中，2×105個細胞/瓶，每7-10d傳代1次，每隔3d離心更換半量培養(yǎng)基1次，培養(yǎng)條件不變。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含B-27 Supplement、EGF、bFGF、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 懸浮
細胞形態(tài) 球形
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%，Accutase
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞培養(yǎng)方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
公司產(chǎn)品：
山羊皮膚成纖維樣細胞;DG-S1 | 胰島素樣生長因子1抗體 |
蛋白酪激酶9抗體 | 鈣調(diào)蛋白激酶激酶β抗體 |
真核翻譯延長因子2抗體 | 自噬微管相關蛋白輕鏈β3抗體 |
B淋巴細胞粘附分子CD22抗體 | 同源轉錄因子DLX5抗體 |
胞粘蛋白2抗體 | 滋養(yǎng)層細胞抗原3β-HSD抗體 |
PDCD1LG2 Others Mouse 小鼠 B7-DC / PD-L2 / CD273 人細胞裂解液 (陽性對照) | NHDF-c 正常人皮膚成纖維細胞(NHDF)來自少年者 x500,000cells 氣管上皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) |
婆羅門牛皮膚成纖維樣細胞;BOS-4 | DPP4 Others Cynomolgus 食蟹猴 DPP4 / DPPIV / CD26 人細胞裂解液 (陽性對照) |
人星形膠質細胞 (HA) (1×106 ) 小鼠皮層膠質細胞(EGFP標記) Mouse | TNFRSF10D Others Cynomolgus 食蟹猴 AIL R4 / CD264 / TNFRSF10D 人細胞裂解液 (陽性對照) |
TACSTD2 Others Human 人 OP2 / TACSTD2 人細胞裂解液 (陽性對照) | PC-12(大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 RSC96(大鼠雪旺細胞) |
CM-H073人膀胱成纖維細胞培養(yǎng)基100mL | 小鼠神經(jīng)干原代細胞自噬微管相關蛋白輕鏈β3抗體 |
TIMP2 Others Human 人 TIMP2 / TIMP-2 人細胞裂解液 (陽性對照) | mRTEC, 小鼠腎小管上皮細胞 |
EFNB2 Protein Human 重組人 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白 (His 標簽) | 長尾綠猴腎細胞;4647 紅白血病細胞，HEL細胞 SMC-1(胸膜細胞瘤) |
人虹狀體上皮細胞 (HIPEpiC)( 5×105 ) | 轉錄調(diào)節(jié)因子C/EBPγ抗體 |
鈣激活鉀通道蛋白β1抗體 | CA12 Others Human 人 CA12 人細胞裂解液 (陽性對照) |
膽汁酸鹽輸出泵/ATP結合盒轉運蛋白11抗體 | N-乙酰氨基葡萄糖激酶抗體 |
G蛋白偶聯(lián)受體10抗體 | PDCD1LG2 Others Mouse 小鼠 B7-DC / PD-L2 / CD273 人細胞裂解液 (陽性對照) |
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
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