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詳細介紹
本網(wǎng)站銷售的化學產(chǎn)品僅供科學研究或工業(yè)應用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！
細胞屬性：
方法簡介
公司實驗室分離的小鼠前列腺干采用-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法，并通過前列腺干細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的小鼠前列腺干經(jīng)Sca-1免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 小鼠前列腺干原代細胞 | 組織來源 | 前列腺 |
英文名稱 | Mouse Prostate Stem Cells | 貨號 | YS-01X7430 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
小鼠前列腺干細胞分離自前列腺組織；前列腺（Prostate）是雄性的性腺器官；前列腺是不成對的實質(zhì)性器宮，由腺組織和肌組織構成。前列腺如栗子，底朝上，與膀胱相貼，尖朝下，抵泌尿生殖膈，前面貼恥骨聯(lián)合，后面依直腸。前列腺腺體的中間有尿道穿過，扼守著尿道上口，所以，前列腺有問題時，排尿首先受影響。前列腺是機體非常少有的，具有內(nèi)、外雙重分泌功能的性分泌腺。作為外分泌腺，前列腺每天分泌前列腺液，是構成精液主要成分；作為內(nèi)分泌腺，前列腺分泌的激素稱為“前列腺素"。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 長梭形
傳代特性 可傳2-3代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞培養(yǎng)方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
公司產(chǎn)品：
上皮細胞培養(yǎng)基-2EpiCM-2-prf | KB抑制蛋白激酶Ζ抗體 |
絲/蘇蛋白激酶39抗體 | 凋亡抑制因子2抗體 |
酸化原活化蛋白激酶ERK抗體 | 增殖相關蛋白MAGOH抗體 |
細胞角蛋白20抗體 | 雙PHD-D4鋅指蛋白2抗體 |
酸化周期素E抗體 | 解旋酶樣轉(zhuǎn)錄因子抗體 |
CDH2 Others Human 人 N-Cadherin / CD325 / CDH2 人細胞裂解液 (陽性對照) | 人胃腺癌細胞;BGC-823 大鼠骨髓基質(zhì)細胞培養(yǎng)基 100mL |
臍靜脈平滑肌細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/common magpie/Hong Kong/5052/2007) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照) |
GFRA2 Others Human 人 GFRA2 / GFRα2 / GDNFRB 人細胞裂解液 (陽性對照) | SCG3 Others Human 人 SCG3 / Secretogranin 3 人細胞裂解液 (陽性對照) |
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KMY0902 胎兒表皮角化細胞培養(yǎng)基 100mL | HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Egypt/2321-NAMRU3/2007) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照) |
CM-H085人臍動脈平滑肌細胞培養(yǎng)基100mL | 小鼠前列腺干原代細胞增殖相關蛋白MAGOH抗體 |
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;Mao 人骨骼肌細胞培養(yǎng)基 100mL | 人角膜上皮細胞培養(yǎng)基 100mL |
NRK-52E，大鼠腎細胞 Rattus | THP1-Blue-CD14(穩(wěn)定株)人單核細胞 THP1-Blue-CD14 (stable sain) in human monocytes 1640+10% |
B2M Others Cynomolgus 食蟹猴 B2M / Beta-2-microglobulin 人細胞裂解液 (陽性對照) | 老年癡呆相關類鈣粘蛋白CS2抗體 |
FBS(熱滅活)+200ug/ml Zeocin+10ug/ml Blasticidin S+0.05mM β-ME | TNFSF13B Others Human 人 BAFF / TNFSF13B |
桿菌致死因子LF抗體 | NIFK蛋白抗體 |
生長分化因子6抗體 | CDH2 Others Human 人 N-Cadherin / CD325 / CDH2 人細胞裂解液 (陽性對照) |
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
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