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小鼠卵泡膜原代細(xì)胞

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×10?
貨號(hào) YS-01X7611 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn)    
小鼠卵泡膜原代細(xì)胞公司出售的產(chǎn)品:小鼠原代腎小球系膜細(xì)胞 COLO 320DM(人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞) HLCL 7D7 人類淋巴母細(xì)胞瘤細(xì)胞 1ml/T75 b16 小鼠黑色素瘤細(xì)胞 COS-1 非洲綠猴SV40 轉(zhuǎn)化的細(xì)胞 人原代宮頸癌成纖維細(xì)胞

詳細(xì)介紹

本網(wǎng)站銷(xiāo)售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,不直接用于食品、藥品、臨床或動(dòng)物的診斷或治療!
細(xì)胞屬性:

小鼠卵泡膜原代細(xì)胞

方法簡(jiǎn)介

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠卵泡膜采用先機(jī)械分離后膠原酶消化結(jié)合Percoll密度梯度離心法、并通過(guò)專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè)

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠卵泡膜經(jīng)3β-HSD免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

產(chǎn)品名稱

小鼠卵泡膜原代細(xì)胞

組織來(lái)源

卵巢組織

英文名稱

Mouse Follicle   Membrane Cells

貨號(hào)

YS-01X7611

產(chǎn)品規(guī)格

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

用途

僅供科研實(shí)驗(yàn)

 

細(xì)胞簡(jiǎn)介:

小鼠卵泡膜細(xì)胞分離自卵巢組織;卵巢是雌性動(dòng)物的生殖器官,卵巢的功能是產(chǎn)生卵以及類固醇激素。卵巢的位置與睪丸相同,僅左側(cè)發(fā)育(右側(cè)已退化),呈葡萄狀,均為處于不同發(fā)育時(shí)期的卵泡,卵泡呈黃色,卵巢表面密布血管。卵巢的大小與年齡和產(chǎn)卵期有關(guān)。大多數(shù)脊椎動(dòng)物有兩個(gè)卵巢,但是部分魚(yú)類的兩個(gè)卵巢融合為單個(gè)結(jié)構(gòu),而所有鳥(niǎo)類只有左側(cè)卵巢有機(jī)能。卵巢是位于子宮兩側(cè)的一對(duì)卵圓形的生殖器官,它的外表有一層上皮組織,其下方有薄層的結(jié)締組織。卵巢的內(nèi)部結(jié)構(gòu)可分為皮質(zhì)和髓質(zhì)。皮質(zhì)位于卵巢的周?chē)糠?,主要由卵泡和結(jié)締組織構(gòu)成;髓質(zhì)位于中央,由疏松結(jié)締組織構(gòu)成,其中有許多血管、淋巴管和。哺乳動(dòng)物的卵巢內(nèi)卵泡的發(fā)育需要相關(guān)激素的調(diào)節(jié)才能完成,垂體(卵泡刺激素和黃體生成素)使原始卵泡開(kāi)始發(fā)育,其過(guò)程中還產(chǎn)生大量的雌激素。雌激素是卵巢的顆粒細(xì)胞和卵泡膜細(xì)胞在垂體的作用下協(xié)同合成的,卵泡膜細(xì)胞合成的雄激素透過(guò)基膜進(jìn)入顆粒細(xì)胞,并轉(zhuǎn)變?yōu)榇萍に?。因此,卵泡膜?xì)胞在生殖內(nèi)分泌調(diào)節(jié)中占有關(guān)鍵的位置,了解其在病理及生理中的作用,對(duì)于與性激素有關(guān)的婦產(chǎn)科疾病(如多囊卵巢綜合癥、卵巢癌等)的研究有著重要意義。在哺乳動(dòng)物卵泡生長(zhǎng)發(fā)育的過(guò)程中,卵母細(xì)胞由不斷增加的顆粒細(xì)胞層包裹。卵巢組織中的膜細(xì)胞作為卵泡的外層細(xì)胞可以維持卵泡結(jié)構(gòu)的完整性,參與構(gòu)成卵母細(xì)胞和顆粒細(xì)胞發(fā)育的微環(huán)境且為類固醇激素的生成提供底物。在哺乳動(dòng)物中調(diào)節(jié)膜細(xì)胞類固醇激素生成的機(jī)制已見(jiàn)相關(guān)報(bào)道,但是有關(guān)卵泡膜細(xì)胞的聚集、生長(zhǎng)和分化的研究尚不深入。

小鼠卵泡膜原代細(xì)胞

培養(yǎng)信息:

小鼠卵泡膜原代細(xì)胞

培養(yǎng)基 FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin

換液頻率 2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性 可傳3代左右

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO25%

小鼠卵泡膜原代細(xì)胞

細(xì)胞培養(yǎng)方法:

小鼠卵泡膜原代細(xì)胞

1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;

②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個(gè)瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;

③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;

④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;

⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2、細(xì)胞復(fù)蘇:

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時(shí)間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。

3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)

②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;

③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞;

④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。

操作步驟:

小鼠卵泡膜原代細(xì)胞
1.將無(wú)菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中,將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片,待細(xì)胞長(zhǎng)至80%時(shí)取出爬片。

2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。

3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細(xì)胞通透。

4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過(guò)氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。

5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。

6. 細(xì)胞特異性一抗孵育:按照抗體說(shuō)明書(shū)稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。

7. 二抗孵育:選與一抗對(duì)應(yīng)的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。

8. 將爬片周?chē)疂n吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽(yáng)性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。

9. 復(fù)染:用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍(lán)。

10. 封片:將中性樹(shù)膠滴在爬片一側(cè),再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),以免產(chǎn)生氣泡,封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。

11. 鏡檢觀察。

公司產(chǎn)品:小鼠卵泡膜原代細(xì)胞


中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞系;CHO-TGF-beta-3/2000   Carrying Psv2-beta-TGF 肥大細(xì)胞瘤細(xì)胞,P815細(xì)胞 INS-1細(xì)胞,大鼠胰島素細(xì)胞

含賴卷曲螺旋蛋白1抗體

SCYL結(jié)合蛋白1抗體

細(xì)胞酪轉(zhuǎn)氨酶抗體

硫氧環(huán)蛋白還原酶1抗體

蛋白酶體PRS7抗體

調(diào)節(jié)蛋白1β2抗體

葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白6抗體

鋅指蛋白Zdhhc12抗體

14抗體

293來(lái)源病毒包裝細(xì)胞;ΦA-GP

人前列腺上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL

A673細(xì)胞,人橫紋癌細(xì)胞 肺炎鏈球菌 615小鼠狀肺腺癌瘤株;P615

CCL16 Protein Human 重組人 CCL16 / HCC-4 / NCC4 蛋白 (His 標(biāo)簽)

小鼠表皮黑色素細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL

IL17A Protein Human 重組人 IL17 / IL17A 蛋白 (His 標(biāo)簽)

雜交瘤(B);Z51B3C10H12A12G2F7B5

人骨骼肌細(xì)胞cDNAHSkMC cDNA

Ana-1小鼠巨噬細(xì)胞 Mouse   macrophage Ana-1 RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS

小鼠卵泡膜原代細(xì)胞蛋白酶體PRS7抗體

人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤;U-87 MG [U87MG;U87 MG]

CA12 Others Mouse 小鼠 Ca12 / Car12 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

ACO1 Others Human ACO1 / irp1 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

CM-M097小鼠皮下脂肪細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

小鼠原B細(xì)胞株;BaF3

胎盤(pán)和前列腺相關(guān)蛋白DLG5抗體

富含亮跨膜纖連蛋白2抗體

非洲綠猴腎細(xì)胞;VERO

有絲分裂原和應(yīng)激活化型蛋白激酶1抗體

伴侶蛋白9抗體

跨膜通道蛋白8抗體

293來(lái)源病毒包裝細(xì)胞;ΦA-GP

 

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