詳細介紹
小鼠淋巴管內(nèi)皮原代細胞
小鼠淋巴管內(nèi)皮細胞分離自淋巴管組織;淋巴管由毛細淋巴管匯合而成。其形態(tài)結(jié)構(gòu)與靜脈相似,但管徑較細,管壁較薄,瓣膜較多且發(fā)達,外形呈串珠狀。淋巴管根據(jù)其位置分為淺、深二種。它們管位于皮下,常與淺靜脈伴行,收集皮膚和皮下組織的淋巴。深淋巴管與深部血管伴行,收集肌肉和內(nèi)臟的淋巴。淺、深淋巴管之間有廣泛的交通支。淋巴管在向心行程中,通常經(jīng)過一個或多個淋巴結(jié),從而把淋巴細胞帶入淋巴液。主要功能是濾過淋巴液,產(chǎn)生淋巴細胞和漿細胞,參與機體的免疫反應。當局部感染時,細菌、病毒或癌細胞等可沿淋巴管侵入,引起局部淋巴結(jié)腫大。如該淋巴結(jié)不能阻止和消滅它們,則病變可沿淋巴管的流注方向擴散和轉(zhuǎn)移。淋巴管內(nèi)皮細胞(LEC)是襯覆于淋巴管內(nèi)表面的一種單層扁平上皮,是構(gòu)成淋巴管壁的主要結(jié)構(gòu),參與維持體液平衡,調(diào)節(jié)淋巴細胞再循環(huán)和機體的免疫反應和組織液及蛋白質(zhì)的運輸,在疾病過程中也起著重要作用。近年研究表明,LEC還在傷口愈合、淋巴管水腫和炎癥擴散等病理過程中起重要作用,而且與腫瘤轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。淋巴管內(nèi)皮細胞主要功能:①調(diào)節(jié)體液、蛋白和組織壓力平衡;②為免疫系統(tǒng)的重要組成部分。淋巴管內(nèi)皮細胞與主要病生理變化:①囊腫型淋巴管瘤;②淋巴管炎;③淋巴結(jié)核。
英文名稱 | Mouse Lymphatic Endothelial Cells | 組織來源 | 淋巴管 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7098 |
細胞形態(tài) | 內(nèi)皮細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱:小鼠淋巴管內(nèi)皮細胞
組織來源:淋巴管
產(chǎn)品規(guī)格:5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
包被條件 PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%)
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 內(nèi)皮細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
方法簡介
公司實驗室分離的小鼠淋巴管內(nèi)皮采用蛋白酶消化法結(jié)合內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的小鼠淋巴管內(nèi)皮經(jīng)VEGFR3免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
長白山豬胚胎皮膚成纖維樣細胞;201184 | 海馬豐富基因轉(zhuǎn)錄蛋白1抗體 |
Saitohin蛋白抗體 | 細胞角蛋白5抗體 |
硫酸酯酶1抗體 | 蛋白酶激活受體-1抗體 |
肽Y受體2抗體 | 葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白2抗體 |
鋅指蛋白ZBTB3抗體 | 激活素受體樣激酶1抗體 |
JEC, 人子宮內(nèi)膜腺癌細胞系 | 人臍帶單核細胞培養(yǎng)基 100mL |
143TK細胞,人胸腺激酶缺陷性細胞系 鼠沙門氏菌Ta100 大鼠腎小球系膜細胞;HBZY-1 | CX3CL1 Protein Canine 重組狗 Fractalkine / CX3CL1 蛋白 (Fc 標簽) |
小鼠腎足突細胞培養(yǎng)基 100mL | IL12A & IL12B Protein Mouse 重組小鼠 IL-12 (IL12A & IL12B Heterodimer) 蛋白 |
OK 負鼠腎細胞 | CL-0240V79(倉鼠肺細胞)5×106cells/瓶×2 |
Ishikawa人子宮內(nèi)膜癌細胞 Human endomeial carcinoma cells Ishikawa RPMI-1640+10%FBS | 小鼠淋巴管內(nèi)皮原代細胞蛋白酶激活受體-1抗體 |
骨細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml) | BT-325細胞,人膠質(zhì)瘤細胞 空腸彎曲菌 人胚皮膚成纖維細胞;CCC-ESF-1 |
AM(人腺樣囊性癌細胞(高轉(zhuǎn)移)) 5×106cells/瓶×2 綠色熒光蛋白標記小鼠前胃癌細胞;MFC-GFP | 豬源細胞 |
腸動脈內(nèi)皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml) | 羧肽酶抑制劑抗體 |
富含半分泌蛋白3抗體 | 人食管癌細胞;EC109 |
有絲分裂驅(qū)動蛋白樣2抗體 | 半乳糖酶抗體 |
跨膜蛋白聚糖C抗體 | JEC, 人子宮內(nèi)膜腺癌細胞系 |
1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。