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小鼠脊髓神經(jīng)元原代細(xì)胞

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×10?
貨號(hào) YS-01X7540 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn)    
小鼠脊髓神經(jīng)元原代細(xì)胞公司出售的產(chǎn)品:小鼠原代口腔上皮細(xì)胞 NCI-H1975(人肺腺癌細(xì)胞) CCC-HSF-1 人皮膚成纖維細(xì)胞 1ml/T75 B16 小鼠黑色素瘤細(xì)胞 R 1610 倉(cāng)鼠肺細(xì)胞 人原代膀胱癌組織源細(xì)胞

詳細(xì)介紹

本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,不直接用于食品、藥品、臨床或動(dòng)物的診斷或治療!
細(xì)胞屬性:

小鼠脊髓神經(jīng)元原代細(xì)胞

方法簡(jiǎn)介

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠脊髓元采用膠原酶&酶聯(lián)合消化法、元專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選結(jié)合化學(xué)試劑抑制法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè)

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠脊髓元經(jīng)β-Tubulin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBVHCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

產(chǎn)品名稱

小鼠脊髓神經(jīng)元原代細(xì)胞

組織來(lái)源

脊髓組織

英文名稱

Mouse Spinal Cord   Neuron Cells

貨號(hào)

YS-01X7540

產(chǎn)品規(guī)格

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

用途

僅供科研實(shí)驗(yàn)

 

細(xì)胞簡(jiǎn)介:

小鼠脊髓元細(xì)胞分離自脊髓組織;脊髓是細(xì)細(xì)的管束狀的結(jié)構(gòu),位于脊柱的椎管內(nèi)且被脊椎保護(hù);是源自腦的中樞系統(tǒng)延伸部分。中樞系統(tǒng)的細(xì)胞依靠復(fù)雜的聯(lián)系來(lái)處理傳遞信息。脊髓的主要功能是傳送腦與外周之間的信息。人和脊椎動(dòng)物中樞系統(tǒng)的一部分,在椎管里面,上端連接延髓,兩旁發(fā)出成對(duì)的,分布到四肢、體壁和內(nèi)臟。脊髓的內(nèi)部有一個(gè)H(蝴蝶型)灰質(zhì)區(qū),主要由細(xì)胞構(gòu)成;在灰質(zhì)區(qū)周圍為白質(zhì)區(qū),主要由有髓纖維組成;脊髓是許多簡(jiǎn)單反射的中樞。脊髓兩旁發(fā)出許多成對(duì)的(稱為脊)分布到全身皮膚、肌肉和內(nèi)臟器官。脊髓是周圍與腦之間的通路,也是許多簡(jiǎn)單反射活動(dòng)的低級(jí)中樞。按脊的出入可把脊髓也分為相應(yīng)的31節(jié),31對(duì)脊就是由不同的脊椎發(fā)出的。系統(tǒng)基本的結(jié)構(gòu)和功能單位是元,即細(xì)胞,其大小和外觀在中樞系統(tǒng)中差異很大。但都具有胞體和樹突、軸突。胞體又叫核周體,內(nèi)含絲、微管、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、游離核糖體和一個(gè)有明顯核仁的核。一些大元突起的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)可用Nissl染色顯示,在光鏡下是灰藍(lán)色斑塊狀,稱為尼氏小體。樹突和軸突是元的突起,能在元之間傳遞電沖動(dòng),突起的大小和形態(tài)各不相同,很難用常規(guī)的顯微鏡鑒別。脊髓組織內(nèi)含有大量膠質(zhì)細(xì)胞,元含量少,分離純化難度大,且脊髓元細(xì)胞是高度分化的終末細(xì)胞,不能分裂增殖,培養(yǎng)要求高。剛接種的脊髓元呈圓形,體積小,透亮,無(wú)突起。培養(yǎng)2-3d,可見胞體增大,突起增多延長(zhǎng);培養(yǎng)6-7d,細(xì)胞體大飽滿,突起明顯增加延長(zhǎng)并交織成網(wǎng),光暈明顯,立體感強(qiáng)。培養(yǎng)20d后,死亡細(xì)胞明顯增加,細(xì)胞出現(xiàn)內(nèi)空泡,突起粗細(xì)不均,甚至脫壁,發(fā)生細(xì)胞崩解。

小鼠脊髓神經(jīng)元原代細(xì)胞

培養(yǎng)信息:

小鼠脊髓神經(jīng)元原代細(xì)胞

包被條件 PLL0.1mg/ml

培養(yǎng)基 B-27 Supplement、PenicillinStreptomycin

換液頻率 2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 元細(xì)胞樣

傳代特性 屬于終末分化細(xì)胞;屬于不增殖細(xì)胞群

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%CO2,5%

小鼠脊髓神經(jīng)元原代細(xì)胞

細(xì)胞培養(yǎng)方法:

小鼠脊髓神經(jīng)元原代細(xì)胞

1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;

②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個(gè)瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;

③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;

④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;

⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2、細(xì)胞復(fù)蘇:

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時(shí)間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。

3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)

②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;

③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞;

④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。

操作步驟:

小鼠脊髓神經(jīng)元原代細(xì)胞
1.將無(wú)菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中,將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片,待細(xì)胞長(zhǎng)至80%時(shí)取出爬片。

2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。

3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細(xì)胞通透。

4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過(guò)氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。

5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。

6. 細(xì)胞特異性一抗孵育:按照抗體說(shuō)明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。

7. 二抗孵育:選與一抗對(duì)應(yīng)的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。

8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽(yáng)性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。

9. 復(fù)染:用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍(lán)。

10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側(cè),再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),以免產(chǎn)生氣泡,封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。

11. 鏡檢觀察。

公司產(chǎn)品:小鼠脊髓神經(jīng)元原代細(xì)胞


C6/36細(xì)胞,蚊子細(xì)胞   A-704(人腎癌細(xì)胞) 非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-NS5A;Vero-HCV-NS5A

過(guò)氧化物酶體肉堿?;D(zhuǎn)移酶抗體

S100A13抗體

細(xì)胞角蛋白19抗體

硫酸角質(zhì)素抗體

蛋白酸激酶PKC/CPI-17抗體

束蛋白抗體

葡萄糖激酶調(diào)節(jié)蛋白抗體

鋅指蛋白BED5抗體

畸胎瘤衍化生長(zhǎng)因子抗體(C)

NRG1 Protein Canine 重組狗 NRG1-alpha 蛋白 (ECD)

RA, 大鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞

3T3/e細(xì)胞,小鼠成纖維細(xì)胞 白介素-2轉(zhuǎn)染耐VP16絨癌細(xì)胞,JEG-3/VP16-IL-2細(xì)胞   人腎系膜細(xì)胞RNAHRMC miRNA5 μg

恒河猴肺細(xì)胞;RM-L1

間充質(zhì)干細(xì)胞脂肪細(xì)胞分化培養(yǎng)基MADM

小鼠髖動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞;PIEC

大鼠肺血管平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL

CL-0234TM3(小鼠間質(zhì)細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

NCI-H2170[H2170]細(xì)胞,人肺鱗狀細(xì)胞癌   人胚腎二倍體細(xì)胞,CCC-HEK-1細(xì)胞 人腦干星形膠質(zhì)細(xì)胞HA-bs

小鼠脊髓神經(jīng)元原代細(xì)胞蛋白酸激酶PKC/CPI-17抗體

骨骼肌細(xì)胞培養(yǎng)基SkMCM

AAV-293人胚腎細(xì)胞 Human   embryonic kidney cell line AAV-293 DMEM+10%FBS

Gibco 12558-011 TM-C100 Complete   Medium,(system) 1 set

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0902

表皮黑色素細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)

髓系細(xì)胞觸發(fā)受體樣轉(zhuǎn)錄因子1抗體

復(fù)制因子A蛋白2

人食道平滑肌細(xì)胞RNAHESMC miRNA5 μg

有絲分裂蛋白BUB3抗體

半乳糖腦苷脂酶抗體

跨膜蛋白Orai2抗體

NRG1 Protein Canine 重組狗 NRG1-alpha 蛋白 (ECD)

 

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