詳細介紹
小鼠骨髓造血干原代細胞
小鼠骨髓造血干細胞分離自骨髓;骨髓是機體的造血組織,位于身體的許多骨骼內(nèi)。成年動物的骨髓分兩種:紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細胞、血小板和各種白細胞。血小板有止血作用,白細胞能殺滅與抑制各種病原體,包括細菌、病毒等;某些淋巴細胞能制造抗體。因此,骨髓不但是造血器官,它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中,是一種海綿狀的組織,能產(chǎn)生血細胞的骨髓略呈紅色,稱為紅骨髓。出生時,紅骨髓充滿全身骨髓腔,隨著年齡增大,脂肪細胞增多,相當部分紅骨髓被黃骨髓取代,后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。造血干細胞具有自我更新能力并能分化為各種血細胞的前提細胞,終生成各種血細胞成分,包括紅細胞,白細胞和血小板。造血干細胞需要根據(jù)機體的生理需求適時的補充血液系統(tǒng)各個成熟細胞組分。同時在損傷、炎癥等應激狀態(tài)下,造血干細胞也扮演著調(diào)節(jié)和維持體內(nèi)血液系統(tǒng)各個細胞組分的生理平衡的角色。臨床治療中,造血干細胞移植廣泛應用于血液系統(tǒng)疾病以及自身免疫疾病,在其它實體瘤的治療中,比如淋巴瘤,生殖細胞瘤,乳腺癌,小細胞肺癌,主要應用于常規(guī)治療失敗或復發(fā)難治以及具有不良預后因素的患者。
英文名稱 | Mouse Bone Marrow Hematopoietic Stem Cells | 組織來源 | 骨髓組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7718 |
細胞形態(tài) | 圓形 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱:小鼠骨髓造血干細胞
組織來源:骨髓組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 懸浮
細胞形態(tài) 圓形
傳代特性 可傳3代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
方法簡介
公司實驗室分離的小鼠骨髓造血干采用沖洗骨髓、密度梯度離心、差速貼壁法結(jié)合培養(yǎng)基篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的小鼠骨髓造血干經(jīng)CD34、Sca-1免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
視網(wǎng)膜muller細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml) | 整合素αE抗體Integrin αE |
26S蛋白酶調(diào)節(jié)亞型抗體 | 腫瘤/抗原2抗體 |
泛素樣核糖體蛋白S30/MNSF-β抗體 | 肌球蛋白重鏈9抗體 |
5號染色體開放閱讀框60抗體 | DDX4抗體 |
1號染色體開放閱讀框150抗體 | 同源盒蛋白HOXB5抗體 |
FSTL1 Others Mouse 小鼠 FSTL1 人細胞裂解液 (陽性對照) | 293來源病毒包裝細胞;ΦA-GP 人成纖維細胞培養(yǎng)基 100mL |
人癌細胞;MDA-MB-468 | 人脂肪細胞-皮下(HPA-s)(1×106 ) |
TNFRSF10B Others Mouse 小鼠 AILR2 / TNFRSF10B 人細胞裂解液 (陽性對照) | PROC Others Mouse 小鼠 PROC1 / Protein C / PROC 人細胞裂解液 (陽性對照) |
HCAEC-c 人冠狀動脈內(nèi)皮細胞(HCAEC) 500,000cells 滑膜細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml) | FAM19A4 Others Human 人 FAM19A4 / TAFA4 人細胞裂解液 (陽性對照) |
CM-M048小鼠腸巨噬細胞培養(yǎng)基100mL | 小鼠骨髓造血干原代細胞肌球蛋白重鏈9抗體 |
FGFR2 Others Human 人 FGFR2 / CD332 (aa 400-821) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) | 小鼠Lewis肺癌瘤株;LLT |
人表皮黑色素細胞-淺色素HEM-l | SPINK4 Others Human 人 SPINK4 人細胞裂解液 (陽性對照) |
293XL-hTLR7人胚腎細胞 Human embryonic kidney cell line 293XL-hTLR7 DMEM+10% Hyclone 滅活血清+10 μg/ml Blasticidin | 氯離子通道調(diào)節(jié)蛋白1A抗體 |
LRRFIP2蛋白抗體 | EFNA5 Others Canine 狗 Ephrin-A5 / EFNA5 人細胞裂解液 (陽性對照) |
原癌基因Bcl-6抗體 | 心臟特異性同源盒轉(zhuǎn)錄因子NKX2.5抗體 |
γ-谷氨酰羧化酶抗體 | FSTL1 Others Mouse 小鼠 FSTL1 人細胞裂解液 (陽性對照) |