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小鼠骨髓樹突狀原代細胞(未成熟DC細胞)

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更新時間:2025-05-20 08:55:32瀏覽次數(shù):25

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×10?
貨號 YS-01X8498 應用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 僅供科研實驗    
小鼠骨髓樹突狀原代細胞(未成熟DC細胞)公司出售的產(chǎn)品:小鼠原代多巴胺元細胞 BC-022(人癌細胞) MDA-MB-175Ⅶ 人導管癌細胞 1ml/T75 MDBK (NBL-1) 牛細胞 Daudi 人成巨核細胞白血病細胞 人原代腎動脈平滑肌細胞

詳細介紹

小鼠骨髓樹突狀原代細胞(未成熟DC細胞)

小鼠骨髓樹突狀原代細胞(未成熟DC細胞)

小鼠骨髓樹突狀細胞分離自骨髓;骨髓是機體的造血組織,位于身體的許多骨骼內(nèi)。成年動物的骨髓分兩種:紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細胞、血小板和各種白細胞。血小板有止血作用,白細胞能殺滅與抑制各種病原體,包括細菌、病毒等;某些淋巴細胞能制造抗體。因此,骨髓不但是造血器官,它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中,是一種海綿狀的組織,能產(chǎn)生血細胞的骨髓略呈紅色,稱為紅骨髓。出生時,紅骨髓充滿全身骨髓腔,隨著年齡增大,脂肪細胞增多,相當部分紅骨髓被黃骨髓取代,后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。骨髓DC細胞是由骨髓單核細胞誘導而成的;樹突狀細胞分為成熟樹突狀細胞和未成熟樹突狀細胞,典型的未成熟樹突狀細胞呈半貼壁生長,在GM-CSFIL4的作用下形成葡萄串樣集落,細胞大而形態(tài)不規(guī)則,表面皺褶多,亦可見少量短刺狀突,胞內(nèi)細胞器豐富并可見吞噬泡,具有較強的遷移能力,伴隨有部分未誘導成的單核細胞,貼壁形態(tài)多樣。而成熟的樹突狀細胞由未成熟DC進一步經(jīng)TNFα、LPS等誘導而成,多數(shù)呈懸浮生長, 細胞呈圓形,細胞體積進一步增大,表面大量粗細不等的樹枝樣突起(高倍鏡或者電鏡下可觀察到 ),伴隨少量貼壁未成熟細胞或者單核細胞。未成熟DC細胞長時間培養(yǎng)也可能導致自發(fā)分化成熟。DC細胞尚無特異性細胞表面分子標志,主要通過形態(tài)學、組合性細胞表面標志、在混合淋巴細胞反應中能激活初始T細胞等特征進行鑒定。其中成熟樹突狀細胞表面高表達主要組織相容性復合物(MHC)以及CD80CD86等共刺激分子,進而激活T淋巴細胞,誘導免疫應答,處于啟動、調(diào)控、并維持免疫應答的中心環(huán)節(jié);未成熟樹突狀細胞具有很強的抗原攝取加工能力,但由于缺乏多種共刺激分子不能使初始T細胞活化、增殖產(chǎn)生免疫應答,不能激活T細胞的第二信號,可導致T細胞無能,從而誘導免疫低反應或抗原免疫特異性耐受。未成熟樹突狀細胞表面CD80、CD86MHC-Ⅱ類分子等共刺激分子表達較低,一般在30%以下。

英文名稱

Mouse Bone Marrow   Immature Dendritic Cells

組織來源

骨髓

產(chǎn)品規(guī)格

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

產(chǎn)品貨號

YS-01X8498

細胞形態(tài)

圓形、梭形、多角形,形態(tài)多樣

生長特性

貼壁

產(chǎn)品名稱:小鼠骨髓樹突狀細胞(未成熟DC細胞)

組織來源:骨髓

產(chǎn)品規(guī)格:5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

小鼠骨髓樹突狀原代細胞(未成熟DC細胞)

培養(yǎng)基:含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

換液頻率:每2-3天換液一次

生長特性:半貼壁半懸浮

細胞形態(tài):圓形、梭形、多角形,形態(tài)多樣

傳代特性:屬于高度分化細胞;屬于不增殖細胞群

消化液:0.25%

培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%CO2,5%

小鼠骨髓樹突狀細胞(未成熟DC細胞)體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

方法簡介

實驗室分離的小鼠骨髓未成熟DC采用密度梯度離心法分離骨髓單個核細胞、培養(yǎng)過程添加細胞因子誘導而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測

實驗室分離的小鼠骨髓樹突狀細胞經(jīng)CD86免疫熒光鑒定、細 胞 形態(tài)等綜合鑒定,純度可達80%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

小鼠骨髓樹突狀原代細胞(未成熟DC細胞)小鼠骨髓樹突狀原代細胞(未成熟DC細胞)

1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;

②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;

③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;

④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;

⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2、細胞復蘇:

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補加適量培養(yǎng)基。

3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)

②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;

③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;

④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。

小鼠骨髓樹突狀原代細胞(未成熟DC細胞)

小鼠骨髓樹突狀原代細胞(未成熟DC細胞)

GLC-82細胞,人肺腺癌細胞 轉(zhuǎn)S9基因倉鼠卵巢細胞,ZA6細胞 CL-0050Caco-2(人結(jié)直腸腺癌細胞)5×106cells/瓶×2

過敏毒素C3(補體C3)抗體

RNA結(jié)合蛋白片段Y染色體家族蛋白2抗體

細胞間粘附分子-3抗體

0酯酶Cβ1抗體

蛋白酪激酶BAP135抗體

前體細胞發(fā)育下調(diào)蛋白4抗體

脯氨酰羧肽酶抗體

鋅指蛋白830抗體

基質(zhì)金屬蛋白酶2抗體

SV-HUC-1(人膀胱上皮永生化細胞) 5×106cells/瓶×2

MJ(懸浮) 淋巴瘤

95-D人高轉(zhuǎn)移肺癌細胞   Human high metastatic lung cancer cell line 95-D RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS

SERPINA12 Protein Human 重組人 Vaspin / SerpinA12 蛋白 (His 標簽)

周邊細胞培養(yǎng)基PM-prf

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KMY0905

雜交瘤(B);Z1510A2G6A2C7

人牙齦成纖維細胞cDNAHGF cDNA

水牛皮膚成纖維樣細胞;WB-S2 癌細胞,Bcap-37細胞 Hce-8693(盲腸腺癌細胞(未分化))

小鼠骨髓樹突狀原代細胞(未成熟DC細胞)蛋白酪激酶BAP135抗體

CL-0113HO-8910(人卵巢癌細胞)5×106cells/瓶×2

IL13RA2 Others Mouse 小鼠 IL13RA2 / CD213A2 人細胞裂解液 (陽性對照)

CD22 Others Human Siglec-2 / CD22 人細胞裂解液 (陽性對照)

CM-M064小鼠前列腺上皮細胞培養(yǎng)基100mL

NOG Protein Human 重組人 Noggin / NOG 蛋白 (His 標簽)

0酯髓鞘蛋白1抗體

分子生物鐘調(diào)控蛋白NOC抗體

二氫還原酶缺陷型中國倉鼠卵巢細胞;CHO/dhFr-

吲哚胺2,3-雙加氧酶抗體

半胺酸蛋白酶蛋白-12抗體

跨膜蛋白166抗體

SV-HUC-1(人膀胱上皮永生化細胞) 5×106cells/瓶×2

 

小鼠骨髓樹突狀原代細胞(未成熟DC細胞)

1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;

1. 細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。




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