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兔棕色前脂肪原代細(xì)胞

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更新時(shí)間:2025-05-19 14:18:14瀏覽次數(shù):39

聯(lián)系我們時(shí)請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×10?
貨號(hào) YS-01X8488 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn)    
兔棕色前脂肪原代細(xì)胞公司出售的產(chǎn)品:人原代尿道上皮細(xì)胞 NIH/3T3(小鼠胚胎細(xì)胞) PUMC-HUVEC-T1 SV40T轉(zhuǎn)化人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞 1ml/T75 KYSE30 人食管癌細(xì)胞 LNCaP clone FGC 人前列腺癌細(xì)胞 兔原代血管外膜成纖維細(xì)胞

詳細(xì)介紹

本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,不直接用于食品、藥品、臨床或動(dòng)物的診斷或治療!
細(xì)胞屬性:

兔棕色前脂肪原代細(xì)胞

方法簡介

實(shí)驗(yàn)室分離的兔棕色前脂肪采用膠原酶消化法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測

實(shí)驗(yàn)室分離的兔棕色前脂肪經(jīng)油紅O染色檢測,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBVHCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

產(chǎn)品名稱

兔棕色前脂肪原代細(xì)胞

組織來源

脂肪

英文名稱

Rabbit Brown   Preadipocyte Cells

貨號(hào)

YS-01X8488

產(chǎn)品規(guī)格

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

用途

僅供科研實(shí)驗(yàn)

 

兔棕色前脂肪原代細(xì)胞
細(xì)胞簡介:

兔棕色前脂肪細(xì)胞分離自棕色脂肪組織;動(dòng)物體內(nèi)存在棕色和白色兩種脂肪,白色脂肪堆積在皮下,負(fù)責(zé)儲(chǔ)存多余熱量;棕色脂肪負(fù)責(zé)分解引發(fā)肥胖的白色脂肪,將后者轉(zhuǎn)化成二氧化碳、水和熱量,本身不儲(chǔ)存熱量。棕色脂肪組織呈棕色,其特點(diǎn)是組織中有豐富的毛細(xì)血管,脂肪細(xì)胞內(nèi)散著許多小脂滴,線粒體大而豐富,核圓形,位于細(xì)胞中央,這種脂肪細(xì)胞也稱為多泡脂肪細(xì)胞。棕色脂肪組織在成年動(dòng)物極少,新生兒及冬眠動(dòng)物較多,在新生兒主要分布在肩胛間區(qū)、腋窩及頸后部等處。棕色脂肪組織僅在嬰兒時(shí)期發(fā)揮作用,它們堆積在新生兒肩胛處,幫助維持體溫。隨著年齡增長,棕色脂肪會(huì)逐漸消失。終,動(dòng)物體內(nèi)只殘存少量棕色脂肪細(xì)胞,分布于頸部和鎖骨。脂肪組織在體內(nèi)含有兩種主要的細(xì)胞:一種是在胞漿內(nèi)積聚脂滴的成熟脂肪細(xì)胞;另一種是雖未在胞漿內(nèi)積聚脂滴但有這種潛能的前脂肪細(xì)胞。前脂肪細(xì)胞呈梭形,有分裂和增殖的能力;成熟的脂肪細(xì)胞呈圓形,已經(jīng)失去了分裂及增殖的能力。由于前脂肪細(xì)胞是一類具有增殖和向脂肪細(xì)胞分化能力的特異化前體細(xì)胞,與肥胖有著非常密切的關(guān)系。前脂肪細(xì)胞是一種類成纖維細(xì)胞,在演變的過程中不斷吸收脂質(zhì),終成為成熟的脂肪細(xì)胞。前脂肪細(xì)胞對外界機(jī)械損傷的抵抗力較強(qiáng),可望成為軟組織缺損的有益填充物。

培養(yǎng)信息:

兔棕色前脂肪原代細(xì)胞

培養(yǎng)基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin

換液頻率:每2-3天換液一次

生長特性:貼壁

細(xì)胞形態(tài):成纖維細(xì)胞樣

傳代特性:可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液:0.25%

培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%CO2,5%

兔棕色前脂肪細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

兔棕色前脂肪原代細(xì)胞

細(xì)胞培養(yǎng)方法:

兔棕色前脂肪原代細(xì)胞

1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;

②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個(gè)瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;

③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;

④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;

⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2、細(xì)胞復(fù)蘇:

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時(shí)間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。

3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)

②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;

③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞;

④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。

公司產(chǎn)品:兔棕色前脂肪原代細(xì)胞

兔主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞;SMC

干擾素β抗體

酸二酯酶7B抗體

干細(xì)胞生長因子受體/細(xì)胞表面分化抗原抗體

4號(hào)染色體開放閱讀框43抗體

巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子抗體

過敏毒素C3受體/補(bǔ)體C3受體抗體

肌營養(yǎng)不良蛋白抗體

1號(hào)染色體開放閱讀框84抗體

同源盒蛋白H6亞型2抗體

IL12A & IL12B Others Mouse 小鼠 IL12A & IL12B Heterodimer 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

TNFRSF17 Others Mouse 小鼠 BCMA / TNFRSF17 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

人導(dǎo)管癌細(xì)胞;ZR-75-1

CTSD Others Human Cathepsin D / CTSD 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

IgG1 Others Mouse 小鼠 IgG1-Fc 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

FAM3B Others Human FAM3B 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

BRL-3A(大鼠正常肝細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CM-M038小鼠肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL 人耐VP16絨癌細(xì)胞株;JEG-3/VP16

豬靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞;ZYM-SVEC01 骨肉瘤細(xì)胞,SW1353細(xì)胞 EMT-6細(xì)胞,小鼠癌細(xì)胞株

CM-R028大鼠食管平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

兔棕色前脂肪原代細(xì)胞巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子抗體

RSC96大鼠雪旺細(xì)胞   Schwann cells in RSC96 rats DMEM+10%FBS

人脈絡(luò)叢成纖維細(xì)胞HCPF

MT-4 人急性淋巴母細(xì)胞白血病細(xì)胞

HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Vietnam/UT31413II/2008) 血凝素HA1   (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

HWP visceral Pellet 人類內(nèi)臟白前脂肪細(xì)胞團(tuán)塊 > 1 mio.cells 人真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞總RNAHDMEC NA

粘蛋白-1/上皮膜抗原抗體

可溶性凝集素樣氧化低密度脂蛋白受體1抗體

GES-1細(xì)胞,人胃粘膜細(xì)胞 人上皮瘤細(xì)胞,SH-SY5Y細(xì)胞 大額牛與婆羅門牛雜交F1代皮膚成纖維樣細(xì)胞;BOS-5

Bcl2抑凋亡蛋白Bag3抗體

細(xì)胞核因子p50/k基因結(jié)合核因子抗體

膠質(zhì)蛋白(肝癌相關(guān)基因2)抗體

IL12A & IL12B Others Mouse 小鼠 IL12A & IL12B Heterodimer 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

 


操作步驟:

兔棕色前脂肪原代細(xì)胞
1.將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中,將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片,待細(xì)胞長至80%時(shí)取出爬片。

2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。

3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細(xì)胞通透。

4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。

5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。

6. 細(xì)胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。

7. 二抗孵育:選與一抗對應(yīng)的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。

8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。

9. 復(fù)染:用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍(lán)。

10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側(cè),再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),以免產(chǎn)生氣泡,封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。

11. 鏡檢觀察。



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