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詳細(xì)介紹
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用，不直接用于食品、藥品、臨床或動(dòng)物的診斷或治療！
細(xì)胞屬性：
方法簡介
實(shí)驗(yàn)室分離的兔棕色前脂肪采用膠原酶消化法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
實(shí)驗(yàn)室分離的兔棕色前脂肪經(jīng)油紅O染色檢測，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 兔棕色前脂肪原代細(xì)胞 | 組織來源 | 脂肪 |
英文名稱 | Rabbit Brown Preadipocyte Cells | 貨號(hào) | YS-01X8488 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) |
細(xì)胞簡介：
兔棕色前脂肪細(xì)胞分離自棕色脂肪組織；動(dòng)物體內(nèi)存在棕色和白色兩種脂肪，白色脂肪堆積在皮下，負(fù)責(zé)儲(chǔ)存多余熱量；棕色脂肪負(fù)責(zé)分解引發(fā)肥胖的白色脂肪，將后者轉(zhuǎn)化成二氧化碳、水和熱量，本身不儲(chǔ)存熱量。棕色脂肪組織呈棕色，其特點(diǎn)是組織中有豐富的毛細(xì)血管，脂肪細(xì)胞內(nèi)散著許多小脂滴，線粒體大而豐富，核圓形，位于細(xì)胞中央，這種脂肪細(xì)胞也稱為多泡脂肪細(xì)胞。棕色脂肪組織在成年動(dòng)物極少，新生兒及冬眠動(dòng)物較多，在新生兒主要分布在肩胛間區(qū)、腋窩及頸后部等處。棕色脂肪組織僅在嬰兒時(shí)期發(fā)揮作用，它們堆積在新生兒肩胛處，幫助維持體溫。隨著年齡增長，棕色脂肪會(huì)逐漸消失。終，動(dòng)物體內(nèi)只殘存少量棕色脂肪細(xì)胞，分布于頸部和鎖骨。脂肪組織在體內(nèi)含有兩種主要的細(xì)胞：一種是在胞漿內(nèi)積聚脂滴的成熟脂肪細(xì)胞；另一種是雖未在胞漿內(nèi)積聚脂滴但有這種潛能的前脂肪細(xì)胞。前脂肪細(xì)胞呈梭形，有分裂和增殖的能力；成熟的脂肪細(xì)胞呈圓形，已經(jīng)失去了分裂及增殖的能力。由于前脂肪細(xì)胞是一類具有增殖和向脂肪細(xì)胞分化能力的特異化前體細(xì)胞，與肥胖有著非常密切的關(guān)系。前脂肪細(xì)胞是一種類成纖維細(xì)胞，在演變的過程中不斷吸收脂質(zhì)，終成為成熟的脂肪細(xì)胞。前脂肪細(xì)胞對外界機(jī)械損傷的抵抗力較強(qiáng)，可望成為軟組織缺損的有益填充物。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣
傳代特性：可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
兔棕色前脂肪細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞培養(yǎng)方法：
1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個(gè)瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時(shí)間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。
公司產(chǎn)品：
兔主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞;SMC | 干擾素β抗體 |
酸二酯酶7B抗體 | 干細(xì)胞生長因子受體/細(xì)胞表面分化抗原抗體 |
4號(hào)染色體開放閱讀框43抗體 | 巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子抗體 |
過敏毒素C3受體/補(bǔ)體C3受體抗體 | 肌營養(yǎng)不良蛋白抗體 |
1號(hào)染色體開放閱讀框84抗體 | 同源盒蛋白H6亞型2抗體 |
IL12A & IL12B Others Mouse 小鼠 IL12A & IL12B Heterodimer 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | TNFRSF17 Others Mouse 小鼠 BCMA / TNFRSF17 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
人導(dǎo)管癌細(xì)胞;ZR-75-1 | CTSD Others Human 人 Cathepsin D / CTSD 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
IgG1 Others Mouse 小鼠 IgG1-Fc 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | FAM3B Others Human 人 FAM3B 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
BRL-3A(大鼠正常肝細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CM-M038小鼠肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL 人耐VP16絨癌細(xì)胞株;JEG-3/VP16 | 豬靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞;ZYM-SVEC01 骨肉瘤細(xì)胞，SW1353細(xì)胞 EMT-6細(xì)胞，小鼠癌細(xì)胞株 |
CM-R028大鼠食管平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基100mL | 兔棕色前脂肪原代細(xì)胞巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子抗體 |
RSC96大鼠雪旺細(xì)胞 Schwann cells in RSC96 rats DMEM+10%FBS | 人脈絡(luò)叢成纖維細(xì)胞HCPF |
MT-4 人急性淋巴母細(xì)胞白血病細(xì)胞 | HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Vietnam/UT31413II/2008) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
HWP visceral Pellet 人類內(nèi)臟白前脂肪細(xì)胞團(tuán)塊 > 1 mio.cells 人真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞總RNAHDMEC NA | 粘蛋白-1/上皮膜抗原抗體 |
可溶性凝集素樣氧化低密度脂蛋白受體1抗體 | GES-1細(xì)胞，人胃粘膜細(xì)胞 人上皮瘤細(xì)胞,SH-SY5Y細(xì)胞 大額牛與婆羅門牛雜交F1代皮膚成纖維樣細(xì)胞;BOS-5 |
Bcl2抑凋亡蛋白Bag3抗體 | 細(xì)胞核因子p50/k基因結(jié)合核因子抗體 |
膠質(zhì)蛋白(肝癌相關(guān)基因2)抗體 | IL12A & IL12B Others Mouse 小鼠 IL12A & IL12B Heterodimer 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中，將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片，待細(xì)胞長至80%時(shí)取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍(lán)。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
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