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兔子宮內(nèi)膜基質(zhì)原代細(xì)胞

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×10?
貨號(hào) YS-01X8487 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn)    
兔子宮內(nèi)膜基質(zhì)原代細(xì)胞公司出售的產(chǎn)品:人原代脈絡(luò)膜血管內(nèi)皮細(xì)胞 NCI-H1650(人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞) UMNSAH/DF-1 雞胚成纖維細(xì)胞 1ml/T75 NCI-H520 人肺鱗癌細(xì)胞 DU145 人前列腺癌細(xì)胞 兔原代脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞

詳細(xì)介紹

本網(wǎng)站銷(xiāo)售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,不直接用于食品、藥品、臨床或動(dòng)物的診斷或治療!
細(xì)胞屬性:

兔子宮內(nèi)膜基質(zhì)原代細(xì)胞

方法簡(jiǎn)介

實(shí)驗(yàn)室分離的兔子宮內(nèi)膜基質(zhì)采用膠原酶消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè)

實(shí)驗(yàn)室分離的兔子宮內(nèi)膜基質(zhì)經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

產(chǎn)品名稱

兔子宮內(nèi)膜基質(zhì)原代細(xì)胞

組織來(lái)源

子宮

英文名稱

Rabbit Endometrial   Stromal Cells

貨號(hào)

YS-01X8487

產(chǎn)品規(guī)格

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

用途

僅供科研實(shí)驗(yàn)

 

兔子宮內(nèi)膜基質(zhì)原代細(xì)胞
細(xì)胞簡(jiǎn)介:

兔子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞分離自子宮組織;子宮是孕育胎兒的器官,位于盆腔中部,膀胱與直腸之間,其位置可隨膀胱與直腸的充盈程度或體位而有變化。子宮的正常位置主要依靠子宮諸韌帶、盆膈、尿生殖膈及會(huì)陰中心腱等結(jié)構(gòu)維持,這些結(jié)構(gòu)受損或松弛時(shí),可以引起子宮脫垂。子宮內(nèi)膜即黏膜,由上皮(屬單層柱狀上皮,有分泌細(xì)胞和纖毛細(xì)胞二種)和固有膜(由結(jié)締組織構(gòu)成,其內(nèi)有大量的星形細(xì)胞,稱為基質(zhì)細(xì)胞)組成,子宮內(nèi)膜可分為淺表的功能膜和深部的基底層,功能層較厚,約占內(nèi)膜厚度的4/5;基底層較薄較致密,約占1/5,功能層可剝脫,而基底層不可剝脫。子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞主要功能:①子宮內(nèi)膜亦稱子宮黏膜,是指構(gòu)成哺乳類(lèi)子宮內(nèi)壁的一層;②子宮內(nèi)膜對(duì)動(dòng)情素和孕激素都起反應(yīng),因此可隨著性周期(發(fā)情周期、月經(jīng)周期)發(fā)生顯著的變化。子宮內(nèi)膜與胚胎附植密切相關(guān),在生殖生理的研究中占重要地位。在胚胎與母體“對(duì)話"的過(guò)程中,子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞充當(dāng)了極其重要的角色。子宮內(nèi)膜構(gòu)成雌性哺乳動(dòng)物子宮壁的內(nèi)層,位于子宮腔面,在動(dòng)物生殖生理活動(dòng)中占有重要地位。子宮和子宮內(nèi)膜是維持雌性動(dòng)物生理功能和生育能力的重要器官,子宮內(nèi)膜的再生修復(fù)是子宮的重要生理功能。體外培養(yǎng)的子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞對(duì)于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。

培養(yǎng)信息:

兔子宮內(nèi)膜基質(zhì)原代細(xì)胞

培養(yǎng)基:含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin

換液頻率:每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性:貼壁

細(xì)胞形態(tài):成纖維細(xì)胞樣

傳代特性:可傳3代左右

消化液:0.25%

培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%

兔子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專(zhuān)用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

兔子宮內(nèi)膜基質(zhì)原代細(xì)胞

細(xì)胞培養(yǎng)方法:

兔子宮內(nèi)膜基質(zhì)原代細(xì)胞

1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;

②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個(gè)瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;

③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;

④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;

⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2、細(xì)胞復(fù)蘇:

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時(shí)間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。

3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)

②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;

③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞;

④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。

公司產(chǎn)品:兔子宮內(nèi)膜基質(zhì)原代細(xì)胞

豚鼠肺細(xì)胞;GP-F1

擬南芥IKI3抗體

母細(xì)胞瘤蛋白PHOX2B抗體

鈣平衡調(diào)節(jié)蛋白1抗體

細(xì)絲蛋白2抗體

巨噬細(xì)胞炎癥因子1β 抗體 MIP-1β

酸化巨噬細(xì)胞集落刺激因子受體抗體

單克隆抗體

1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框87抗體

同源盒蛋白HOXC9抗體

人滑膜細(xì)胞(HS)( 5×105 )

人結(jié)膜纖維原細(xì)胞(HConF)(5×105 ) HAVSMC, 人主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞 Human

人導(dǎo)管癌細(xì)胞;ZR-75-30

ENPEP Others Rat 大鼠 ENPEP / Aminopeptidase A (aa 41-945) 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

A172(人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CM-H107人軟骨細(xì)胞培養(yǎng)基100mL 人胚腎二倍體細(xì)胞;CCC-HEK-1

HA Others H7N9 甲型流感 H7N9 (A/Anhui/1/2013) 血凝素 (Hemagglutinin   / HA) 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

CFPAC-1(人胰腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2   CL-0102Hep 3B(人肝癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 小鼠腹水瘤細(xì)胞;S-180

PBK Others Human PDK / PDZ binding kinase / TOPK 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

CM-R031大鼠腸動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

兔子宮內(nèi)膜基質(zhì)原代細(xì)胞巨噬細(xì)胞炎癥因子1β 抗體 MIP-1β

HA Others H9N2 甲型流感 H9N2 (A/Hong Kong/35820/2009) 血凝素   (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

正常大鼠腎細(xì)胞;NRK

人癌細(xì)胞;MDA-MB-157

PDCD1LG2 Others Human PD-L2 / B7-DC / CD273 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

白牦牛皮膚細(xì)胞;Yak-2 橫紋肌瘤細(xì)胞,A673細(xì)胞 NAMALWA(Butt's 淋巴瘤細(xì)胞)

N-鈣粘附分子抗體

宮頸癌原癌基因2抗體

人表皮角質(zhì)細(xì)胞-新生兒(HEK-n)(   5×105 )

BCL212含蛋白抗體

鼻咽癌細(xì)胞相關(guān)基因6抗體

丙型肝炎病毒-NS3反轉(zhuǎn)錄激活蛋白2抗體

人滑膜細(xì)胞(HS)( 5×105 )

 


操作步驟:

兔子宮內(nèi)膜基質(zhì)原代細(xì)胞
1.將無(wú)菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中,將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片,待細(xì)胞長(zhǎng)至80%時(shí)取出爬片。

2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。

3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細(xì)胞通透。

4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過(guò)氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。

5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。

6. 細(xì)胞特異性一抗孵育:按照抗體說(shuō)明書(shū)稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。

7. 二抗孵育:選與一抗對(duì)應(yīng)的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。

8. 將爬片周?chē)疂n吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽(yáng)性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。

9. 復(fù)染:用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍(lán)。

10. 封片:將中性樹(shù)膠滴在爬片一側(cè),再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),以免產(chǎn)生氣泡,封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。

11. 鏡檢觀察。



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