詳細(xì)介紹
兔子宮內(nèi)膜干原代細(xì)胞
兔子宮內(nèi)膜干細(xì)胞細(xì)胞分離自子宮組織;子宮是孕育胎兒的器官,位于盆腔中部,膀胱與直腸之間,其位置可隨膀胱與直腸的充盈程度或體位而有變化。子宮的正常位置主要依靠子宮諸韌帶、盆膈、尿生殖膈及會陰中心腱等結(jié)構(gòu)維持,這些結(jié)構(gòu)受損或松弛時,可以引起子宮脫垂。子宮內(nèi)膜即黏膜,由上皮(屬單層柱狀上皮,有分泌細(xì)胞和纖毛細(xì)胞二種)和固有膜(由結(jié)締組織構(gòu)成,其內(nèi)有大量的星形細(xì)胞,稱為基質(zhì)細(xì)胞)組成,子宮內(nèi)膜可分為淺表的功能膜和深部的基底層,功能層較厚,約占內(nèi)膜厚度的4/5;基底層較薄較致密,約占1/5,功能層可剝脫,而基底層不可剝脫。子宮內(nèi)膜構(gòu)成雌性哺乳動物子宮壁的內(nèi)層,位于子宮腔面,在動物生殖生理活動中占有重要地位。子宮和子宮內(nèi)膜是維持雌性動物生理功能和生育能力的重要器官,子宮內(nèi)膜的再生修復(fù)是子宮的重要生理功能。間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stem cells,MSCs)來源于胚胎時期的中胚層組織,具有很強(qiáng)的自我復(fù)制和多向分化潛能,具有向脂肪細(xì)胞、成骨細(xì)胞、軟骨細(xì)胞及肌細(xì)胞等多種終末細(xì)胞定向分化的能力,運(yùn)用 MSCs來修復(fù)軟骨損傷具有很好的應(yīng)用前景,目前已能夠從骨髓、脂肪、滑膜、骨骼、肌肉等組織以及羊水、臍帶、臍帶血中分離和制備間充質(zhì)干細(xì)胞。體外培養(yǎng)的子宮內(nèi)膜干細(xì)胞細(xì)胞對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。
英文名稱 | Rabbit Endometrial Stem Cells | 組織來源 | 子宮 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X8486 |
細(xì)胞形態(tài) | 成纖維細(xì)胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱:兔子宮內(nèi)膜干細(xì)胞
組織來源:子宮
產(chǎn)品規(guī)格:5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):成纖維細(xì)胞樣
傳代特性:可傳3代左右
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
兔子宮內(nèi)膜干細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
方法簡介
實驗室分離的兔子宮內(nèi)膜干采用膠原酶消化法、低密度稀釋克隆制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
實驗室分離的兔子宮內(nèi)膜干經(jīng)CD90免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
Ramos細(xì)胞,血細(xì)胞瘤細(xì)胞系 615小鼠前胃癌瘤株,Fc細(xì)胞 人心臟成纖維細(xì)胞-心房裂解物HCF-aa L | 骨形態(tài)發(fā)生蛋白7抗體 |
Ras樣蛋白B抗體 | 細(xì)胞分裂周期蛋白25抗體 |
酸酶/酸二酯酶家族成員6抗體 | 蛋白激酶AKT底物1抗體 |
叢蛋白B1抗體 | 胚胎干細(xì)胞相關(guān)蛋白TXNDC9抗體 |
鋅指蛋白3/環(huán)指蛋白3抗體 | 肌細(xì)胞增強(qiáng)因子2C抗體 |
NCI-H358(人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 | Dami 人成巨核細(xì)胞白血病細(xì)胞 |
MHCC-97L人肝癌細(xì)胞(低轉(zhuǎn)移) MHCC-97L human hepatoma cells (low metastasis) DMEM+10%FBS | TNFSF11 Protein Human 重組人 RANKL / OPGL / TNFSF11 / CD254 蛋白 |
人卵巢成纖維細(xì)胞HOF | INS-1(大鼠胰島細(xì)胞瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 |
腦成纖維細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml) | 人少突膠質(zhì)前體細(xì)胞cDNAHOPC cDNA |
JEG-3/VP16-IL-2細(xì)胞,白介素-2轉(zhuǎn)染耐VP16絨癌細(xì)胞 兔角膜后基質(zhì)層成纖維細(xì)胞,RCBBF細(xì)胞 人羊膜間充質(zhì)基質(zhì)細(xì)胞HAMSC | 兔子宮內(nèi)膜干原代細(xì)胞蛋白激酶AKT底物1抗體 |
人T淋巴瘤細(xì)胞Jurkat亞系;Jurkat77 | CDH6 Others Human 人 CDH6 / KCAD 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
TYRP1 Others Human 人 P1 / TYRP1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | CM-M039小鼠胃粘膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL |
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;Mao | 死亡效應(yīng)結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體 |
非洲爪蟾IGC抗體 | RGC-5, 小鼠視網(wǎng)膜節(jié)細(xì)胞 |
抑癌蛋白AIMP3抗體 | 白細(xì)胞介素28A抗體 |
抗3抗體 | NCI-H358(人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 |
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細(xì)胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。