詳細介紹
兔子宮頸上皮原代細胞
兔子宮頸上皮細胞分離自子宮頸組織;子宮頸位于子宮下部,近似圓錐體,上端與子宮體相連,下端深入陰道。陰道頂端的穹隆又將子宮頸分為兩部分:宮頸突入陰道的部分稱宮頸陰道部,在陰道穹隆以上的部分稱宮頸陰道上部。宮頸的中央為前后略扁的長梭性管腔,其上端通過宮頸內(nèi)口與子宮腔相連,其下端通過宮頸外口開口于陰道。內(nèi)外口之間即宮頸管。宮頸的大小與宮體比例隨年齡及內(nèi)分泌狀態(tài)等而變化;宮頸壁由黏膜、肌層和外膜組成。子宮頸可有多種疾病,包括胚胎發(fā)育異常、炎癥、瘤樣病變、良性腫瘤、惡性腫瘤、損傷、宮頸性不孕、輔助生育技術(shù)、宮頸與性、宮頸妊娠等許多問題,體外培養(yǎng)的子宮頸上皮細胞對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。
英文名稱 | Rabbit Cervical Epithelial Cells | 組織來源 | 子宮 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X8485 |
細胞形態(tài) | 上皮細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱:兔子宮頸上皮細胞
組織來源:子宮
產(chǎn)品規(guī)格:5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
包被條件:鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養(yǎng)基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態(tài):上皮細胞樣
傳代特性:可傳1-2代
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
兔子宮頸上皮細胞體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
方法簡介
實驗室分離的兔子宮頸上皮采用膠原酶消化法,結(jié)合上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
實驗室分離的tu子宮頸上皮經(jīng)Cytokeratin-19免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
1)復(fù)蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
豚鼠胚胎細胞;104C1 | 胰島素降解酶抗體 |
細胞周期蛋白依賴性激酶5激活因子1抗體 | 阿爾茨海默病淀粉樣蛋白相關(guān)膠原蛋白抗體 |
酸化細絲蛋白2抗體 | 間皮素抗體 |
微管結(jié)合蛋白CYLD抗體 | 抑癌蛋白DKK3抗體 |
1號染色體開放閱讀框95抗體 | 調(diào)節(jié)蛋白1β2抗體 |
CALR Others Human 人 CALR / Calreticulin 人細胞裂解液 (陽性對照) | SLAMF7 Others Mouse 小鼠 SLAMF7 / CRACC 人細胞裂解液 (陽性對照) |
人導(dǎo)管瘤細胞;BT-474 | CD84 Others Mouse 小鼠 CD84 人細胞裂解液 (陽性對照) |
人脈絡(luò)絲內(nèi)皮細胞 (HCPEC)( 5×105 ) 人臍動脈平滑肌細胞 Raji,人Butt's淋巴瘤細胞 | SHH Others Mouse 小鼠 SHH / Sonic hedgehog 人細胞裂解液 (陽性對照) |
MDA-MB-231(人癌細胞) 5×106cells/瓶×2 大鼠 PD-L1 / B7-H1 / CD274 人細胞裂解液 (陽性對照) | MCF-7細胞,人癌細胞 人肺鱗癌細胞,LTEP-s細胞 滑膜細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml) |
CM-R033大鼠肝實質(zhì)細胞培養(yǎng)基100mL | 兔子宮頸上皮原代細胞間皮素抗體 |
豚鼠胚胎細胞;104C1 貂肺上皮細胞,Mv.1.Lu細胞 GT1-1細胞,小鼠垂體瘤細胞 | 人脈絡(luò)叢成纖維細胞cDNAHCPF cDNA |
CM-H134人角膜內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基100mL | TACSTD2 Others Mouse 小鼠 OP2 / TACSTD2 人細胞裂解液 (陽性對照) |
IL11RA Others Human 人 IL11RA / IL11Rα 人細胞裂解液 (陽性對照) | 肌酸酸激酶2抗體 |
賴氨酰氧化酶樣蛋白4抗體 | 人十二脂腸腺癌;HuTu-80 大鼠前列腺上皮細胞培養(yǎng)基 100mL |
BCL2分子伴侶調(diào)節(jié)蛋白5抗體 | 氫通道蛋白抗體 |
谷甘肽硫轉(zhuǎn)移酶C段結(jié)構(gòu)域抗體 | CALR Others Human 人 CALR / Calreticulin 人細胞裂解液 (陽性對照) |