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詳細介紹
本網(wǎng)站銷售的化學產(chǎn)品僅供科學研究或工業(yè)應用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！
細胞屬性：
方法簡介
實驗室分離的兔滋養(yǎng)層干采用囊胚組織貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
實驗室分離的兔滋養(yǎng)層干經(jīng)HLA-E(白細胞抗原)免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 兔滋養(yǎng)層干原代細胞 | 組織來源 | 胎盤 |
英文名稱 | Rabbit Trophoblast Stem Cells | 貨號 | YS-01X8484 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
兔滋養(yǎng)層干細胞分離自胎盤組織；胎盤（placenta）是哺乳動物妊娠期間由胚胎的胚膜和母體子宮內(nèi)膜聯(lián)合長成的母子間交換物質(zhì)的過渡性器官，由羊膜、葉狀絨毛膜和底蛻膜構成。胎兒在子宮中發(fā)育，依靠胎盤從母體取得營養(yǎng)，而雙方保持相當?shù)莫毩⑿?。胎盤還產(chǎn)生多種維持妊娠的激素，是一個重要的內(nèi)分泌器官。有些爬行類和魚類也以胎生方式繁殖后代，胚胎生長出一些輔助結構如卵黃囊、鰓絲等與母體組織緊密結合，以達到母子間物質(zhì)的交換，這樣的結構稱假胎盤。滋養(yǎng)層干細胞是胎盤組織細胞的祖細胞，與胚胎著床和胎盤的形成密切相關。胚胎著床和胎盤形成是母體與胎兒建立聯(lián)系的關鍵時期，此時期滋養(yǎng)層細胞增殖速度快，滋養(yǎng)層干細胞自我更新和分化旺盛，與多種妊娠相關疾病的發(fā)生、發(fā)展及其增殖、功能調(diào)節(jié)的失常有密切關系。在哺乳動物胚胎發(fā)育過程中，胚胎細胞第一次分化形成內(nèi)細胞團和滋養(yǎng)外胚層。滋養(yǎng)層干細胞是胎盤細胞的前體細胞，在胎盤發(fā)育中有重要作用。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態(tài)：成纖維細胞樣
傳代特性：可傳3代左右
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
兔滋養(yǎng)層干細胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細胞培養(yǎng)方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
公司產(chǎn)品：
豚鼠胚胎細胞;104C1 | 腫瘤細胞凋亡ASPP家族的另一個成員抗體 |
多囊蛋白1樣3抗體 | 老年癡呆相關類鈣粘蛋白CS1抗體 |
酸化FMS樣酪激酶3抗體 | 基質(zhì)金屬蛋白酶-1抗體 |
酸化微管結合蛋白CYLD抗體 | 同源轉錄因子DLX1抗體 |
補體C1S鏈多肽抗體 | 螺旋環(huán)螺旋轉錄因子HATH6抗體 |
FKBP7 Others Human 人 PPIase / FKBP7 人細胞裂解液 (陽性對照) | HCT-8(人盲腸腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0402NCI-H520(人肺鱗癌細胞)5×106cells/瓶×2 恒河猴腎細胞;MMK3 |
人導管瘤細胞;BT-474 | PDPN Others Mouse 小鼠 Podoplanin / PDPN 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
MICB Others Human 人 MICB 人細胞裂解液 (陽性對照) | C6 Others Human 人 C6 / compleme compone 6 人細胞裂解液 (陽性對照) |
小鼠皮質(zhì)細胞(MN-c)(1×106) LncaP, 人前列腺癌細胞 Human | PLAT Others Human 人 tPAβ 人細胞裂解液 (陽性對照) |
CM-R036大鼠小腸血管內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基100mL | 兔滋養(yǎng)層干原代細胞基質(zhì)金屬蛋白酶-1抗體 |
ALCAM Others Human 人 ALCAM / CD166 人細胞裂解液 (陽性對照) | 人前脂肪細胞培養(yǎng)基 100mL |
小鼠淋巴瘤細胞;P388D1(IL-1) | A498人腎癌細胞 Human renal cell carcinoma A498 cells DMEM+10%FBS |
IL22RA2 Others Rat 大鼠 IL22BP / L22RA2 人細胞裂解液 (陽性對照) | 兒茶酚O甲基移位酶抗體 |
乳鐵蛋白抗體 | ECE1 Others Human 人 ECE1 人細胞裂解液 (陽性對照) |
轉錄因子BTF3抗體 | 新型核蛋白質(zhì)1抗體 |
糖基轉移酶樣1抗體 | FKBP7 Others Human 人 PPIase / FKBP7 人細胞裂解液 (陽性對照) |
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
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