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詳細介紹
本網(wǎng)站銷售的化學產(chǎn)品僅供科學研究或工業(yè)應用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！
細胞屬性：
方法簡介
公司實驗室分離的兔脂肪干采用膠原酶消化法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的兔脂肪干經(jīng)CD90免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 兔脂肪干原代細胞 | 組織來源 | 脂肪組織 |
英文名稱 | Rabbit Adipose Stem Cells | 貨號 | YS-01X7113 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
兔脂肪干細胞分離自脂肪組織；脂肪組織主要由大量群集的脂肪細胞構成，聚集成團的脂肪細胞由薄層疏松結締組織分隔成小葉；貯存的脂肪，在需要時可迅速分解成甘油和脂肪酸，經(jīng)血液輸送到各組織以供利用。它們影響胰島素敏感性、血壓水平、內(nèi)皮功能、纖溶活動及炎癥反應，參與多種重要病理生理過程；脂肪組織已由過去單純作為能量儲存的器官而成為一個極其重要的內(nèi)分泌系統(tǒng)。脂肪干細胞（ADSCs）是一種具有多向分化潛能的干細胞，主要恢復組織細胞的修復功能，促進細胞的再生，恢復年輕面容的同時，身體機能也得到充分改善，有效改善亞健康、早衰等疾病，由內(nèi)而外真正的有效抵抗衰老。脂肪干細胞具有很多優(yōu)點：①具有自我更新及多向分化的潛能；②來源充足；③對供區(qū)的創(chuàng)傷較?。虎塬@得率及體外擴增速率高。脂肪干細胞是目前被廣泛應用于組織工程領域中理想的種子細胞。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞培養(yǎng)方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
公司產(chǎn)品：
MiaPaCa-2, 人胰腺癌細胞 非雄激素依賴型前列腺癌,Tsu-Pr1細胞 ZR-75-1(癌細胞) | 骨形態(tài)發(fā)生蛋白10抗體 |
Ras相關結構域蛋白質(zhì)2抗體 | 細胞分裂周期37樣蛋白1抗體 |
酸肌醇結合蛋白1抗體 | 蛋白O巖藻糖基轉(zhuǎn)移酶1抗體 |
酸鹽轉(zhuǎn)運三酸腺苷酶抗體 | 膀癌突變蛋白1抗體 |
鋅指蛋白23抗體 | 肌側(cè)索硬化癥相關蛋白4抗體 |
小鼠骨髓細胞;FDC-P1 | CM-R062大鼠腎小管上皮細胞培養(yǎng)基100mL |
JEC, 人子宮內(nèi)膜腺癌細胞系 胚肺細胞,SL-7細胞 SNU-182(人肝癌細胞) | 小鼠B淋巴細胞雜交瘤細胞;SH3 |
人臍靜脈平滑肌細胞HUVSMC | EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;HH-29 |
CL-0089H9c2(2-1) (大鼠心肌細胞)5×106cells/瓶×2 | A7r5(大鼠胸大動脈平滑肌細胞) 5×106cells/瓶×2 |
EB病毒轉(zhuǎn)化的絨猴淋巴細胞;B95-8 膀胱癌細胞，J82細胞 GBC-SD(膽囊癌細胞) | 兔脂肪干原代細胞蛋白O巖藻糖基轉(zhuǎn)移酶1抗體 |
WISH(人羊膜細胞) 5×106cells/瓶×2 | APCS Others Human 人 Serum amyloid P compone / APCS / SAP 人細胞裂解液 (陽性對照) |
轉(zhuǎn)PYTL基因小鼠支持細胞;15P-1 小鼠結腸平滑肌細胞培養(yǎng)基 100mL | 支氣管上皮細胞培養(yǎng)基BEpiCM |
T-106BIV型膠原酶(含100mL酶解緩沖液)10mL | 死亡受體3抗體 |
非霍奇金淋巴瘤重復蛋白3抗體 | 獼猴皮膚細胞;MMS4 |
異質(zhì)核糖核蛋白K抗體 | 白細胞介素-18受體β鏈抗體 |
抗冠狀表面S蛋白抗體 | 小鼠骨髓細胞;FDC-P1 |
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