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兔真皮微血管內(nèi)皮原代細(xì)胞

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更新時間:2025-05-19 13:53:12瀏覽次數(shù):34

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×10?
貨號 YS-01X8478 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 僅供科研實驗    
兔真皮微血管內(nèi)皮原代細(xì)胞公司出售的產(chǎn)品:人原代肝動脈內(nèi)皮細(xì)胞 Lncap clone FGC(人前列腺癌細(xì)胞) YAC-1 小鼠淋巴瘤細(xì)胞(NK靶細(xì)胞) 1ml/T75 NCI-H520 肺鱗癌 LS 174T 人結(jié)腸腺癌細(xì)胞 小鼠原代肺大靜脈平滑肌細(xì)胞

詳細(xì)介紹

本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療!
細(xì)胞屬性:

兔真皮微血管內(nèi)皮原代細(xì)胞

方法簡介

實驗室分離的兔真皮微血管內(nèi)皮采用膠原酶-蛋白酶混合消化法結(jié)合密度梯度離心法、后通過內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測

實驗室分離的兔真皮微血管內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBVHCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

產(chǎn)品名稱

兔真皮微血管內(nèi)皮原代細(xì)胞

組織來源

皮膚

英文名稱

Rabbit Dermal Microvascular   Endothelial Cells

貨號

YS-01X8478

產(chǎn)品規(guī)格

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

用途

僅供科研實驗

 

細(xì)胞簡介:

兔真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞分離自真皮組織;真皮,位于表皮深層,向下與皮下組織相連,真皮結(jié)締組織的膠原纖維和彈性纖維互相交織在一起,埋于基質(zhì)內(nèi)。其內(nèi)分布著各種結(jié)締組織細(xì)胞和大量的膠原纖維彈性纖維,使皮膚既有彈性,又有韌性。其由兩層組成——乳頭層與網(wǎng)狀層。真皮的結(jié)構(gòu)組成是膠原蛋白、彈性纖維以及基質(zhì)。微血管內(nèi)皮細(xì)胞(MEC)在炎癥反應(yīng)、腫瘤生長、創(chuàng)面愈合過程中起著非常重要的作用。在創(chuàng)面愈合研究領(lǐng)域,由于表皮細(xì)胞、真皮成纖維細(xì)胞體外培養(yǎng)技術(shù)的成熟,人們對這兩種細(xì)胞早已進(jìn)行了大量深入的研究。與之相比,對參與創(chuàng)面愈合過程的另一種主要細(xì)胞——真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞,則因其體外分離培養(yǎng)技術(shù)的困難而使相關(guān)的研究受限。

兔真皮微血管內(nèi)皮原代細(xì)胞

培養(yǎng)信息:

兔真皮微血管內(nèi)皮原代細(xì)胞

包被條件:PLL0.1mg/ml),明膠(0.1%

培養(yǎng)基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin

換液頻率:每2-3天換液一次

生長特性:貼壁

細(xì)胞形態(tài):內(nèi)皮細(xì)胞樣

傳代特性:可傳2-3

消化液:0.25%

培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%

兔真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

兔真皮微血管內(nèi)皮原代細(xì)胞

細(xì)胞培養(yǎng)方法:

兔真皮微血管內(nèi)皮原代細(xì)胞

1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;

②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;

③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;

④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;

⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2、細(xì)胞復(fù)蘇:

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。

3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時進(jìn)行細(xì)胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)

②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;

③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞;

④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。

操作步驟:

兔真皮微血管內(nèi)皮原代細(xì)胞
1.將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中,將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片,待細(xì)胞長至80%時取出爬片。

2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。

3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細(xì)胞通透。

4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。

5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。

6. 細(xì)胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。

7. 二抗孵育:選與一抗對應(yīng)的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。

8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。

9. 復(fù)染:用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍(lán)。

10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側(cè),再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),以免產(chǎn)生氣泡,封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。

11. 鏡檢觀察。

公司產(chǎn)品:兔真皮微血管內(nèi)皮原代細(xì)胞


非洲綠猴腎細(xì)胞;BS-C-1

骨涎蛋白抗體

RAS相關(guān)蛋白癌基因Rab14抗體

細(xì)胞分裂周期2樣蛋白激酶5抗體

酸化組蛋白去乙酰化酶7抗體

蛋白BOC抗體

伸長因子結(jié)合蛋白抗體

旁瘤抗原MA1抗體

鋅指蛋白230抗體

肌側(cè)索硬化癥相關(guān)蛋白22號染色體)抗體

SKOV3 [SK-OV-3], 人卵巢癌腺癌細(xì)胞系

CM-H094人滑膜細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

LncaP, 人前列腺癌細(xì)胞 腹水瘤,SRS-82細(xì)胞 TOV-112D(人上皮性卵巢癌細(xì)胞)

轉(zhuǎn)PYTL基因小鼠支持細(xì)胞;15P-1

小鼠關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL

IL12A Protein Human 重組人 IL12A / NKSF1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

NR8383 大鼠肺泡巨噬細(xì)胞

人脈絡(luò)叢上皮細(xì)胞cDNAHCPEpiC cDNA

T24-EGFP(CMV-EGFP慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)人膀胱癌細(xì)胞 T24-EGFP (CMV-EGFP leiviral   consuct stable sain) of human bladder cancer cells 1640+10% FBS

兔真皮微血管內(nèi)皮原代細(xì)胞蛋白BOC抗體

大鼠骨骼肌細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL

Hepa 1-6(小鼠肝癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2   CL-0458U-118 MG(人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤)5×106cells/瓶×2 人胎兒胸腺細(xì)胞株;HFT-8810 [HFT8810]

人內(nèi)殼細(xì)胞(HHirSC)( 5×105 )

CM-M032小鼠腸靜脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

H4-II-E-C3(大鼠肝癌細(xì)胞 ) 5×106cells/瓶×2

絲狀肌動蛋白結(jié)合蛋白抗體

非紅細(xì)胞血影腦蛋白β2/spectrin β III抗體

中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-DUKXB11-prepro-TGFβ1 cDNA

異質(zhì)核糖核蛋白F抗體

白細(xì)胞介素18結(jié)合蛋白抗體

Rap1A抗體

SKOV3 [SK-OV-3], 人卵巢癌腺癌細(xì)胞系

 

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